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兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立.doc

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兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立 【摘要】 目的 建立小肠急性缺血再灌注损伤模型,确定合适的 肠系膜上动脉阻断时间。方法 将 70 只新西兰兔按不同的肠系膜缺血 时间(0、15、30、45、60 min)分为 A、B、C、D、E 共 5 组,每组 14 只。 每组取 8 只于恢复血供 2 h 后留取兔下腔静脉血标本及肠组织, 检测血清中丙二醛(MDA)含量的变化,光镜下观察小肠组织形态学变 化并对小肠黏膜损伤程度进行评分。另 6 只兔用于术后 24、48、72 h 生存率的观察。结果 A、B、C 组的术后生存率均>83.3%。C、D、E 组的 MDA 含量及肠黏膜损伤评分与 A 组比较,差异均有显著性 (F=12.13、280.24,P<0.01) 结论 肠系膜缺血 30 min 再灌注 2 h 。 是建立兔小肠急性缺血再灌注损伤的合适时间。 【关键词】 肠;缺血;再灌注损伤;模型,动物 [ ABSTRACT ] Objective To create a model of acute intestinal ischemia reperfusion injury in rabbits so as to determine suitable blocking duration of superior mesenteric arteries (SMA). Methods Seventy rabbits were divided into five groups as groups A, B, C, D, and E, based on the different blocking durations of SMA for 0, 15, 30, 45 and 60 minutes, respectively, with 14 rabbits in each group. Eight of the rabbits in each group were detected for serum levels of MDA 2 h after 1 recovery of blood supply, the changes of histomorphology of small intestine observed light microscopically. The other six rabbbits in each group were used to observe the 24 h , 48 h and 72 h survival rates after the blockage of SMA. Results The survival rates were over 83.3% in groups A, B and C. Serum levels of MDA and score of injury of intestinal mucosa were significantly higher in groups C, D and E than that in group A (F=12.13,280.24;P<0.01). Conclusion The suitable duration for creating a model of acute SMA ischemia reperfusion injury in small bowel is ischemia for 30 minutes and reperfusion for 2 hours. [KEY WORDS] intestines; ischemia; reperfusion injury; model, animal 缺血再灌注损伤(IRI)是指组织缺血一段时间,当血流重新恢复 后,细胞功能代谢障碍及结构破坏反而较缺血时进一步加重,器官功 能进一步恶化的临床综合征[1]。IRI 具有种属、器官的普遍性和广泛 性,在临床上常见于动脉阻塞性疾病治疗过程中、器官移植、术中血 流阻断、休克、心肺复苏等情况。IRI 对器官的功能和组织结构都可 以造成明显的损伤,甚至引起急、慢性器官衰竭[2]。临床上肠系膜缺 血性疾病具有诊断困难、预后差、病死率高的特点。本研究旨在探索 2 建立急性肠道 IRI 模型的条件,为研究如何减轻甚至阻止肠道 IRI 提 供工具。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物及分组 健康封闭清洁级雄性新西兰兔,体质量 2.0~2.5 kg。动物 饲养于干净、清洁、20~22 ℃的环境下,提供标准的饮食。将 70 只 新西兰兔按不同的肠系膜缺血时间(0、15、30、45、60 min)分为 A、 B、C、D、E 共 5 组,每组 14 只。 1.1.2 主要试剂及仪器 丙二醛(MDA)测定试剂盒、蛋白定量(双缩脲法)试剂盒, 均由南京建成生物工程研究所提供。主要仪器:752 型紫外线分光光度 计(Beckman Coulter, Ltd) ,可调到 95 ℃左右的恒温水浴箱(上海 医用分析仪器厂) 台式高速冷冻离心机,XW , 80A 型旋涡混合器(上 海医用仪器厂) 组织切片机,组织贴片机,组织包埋机,生物显微镜。 , 3
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