塞来昔布对宫颈癌HeLa细胞放射增敏效应的观察.doc

塞来昔布对宫颈癌 HeLa 细胞放射增敏效应
的观察

作者：宫文静 何信佳 于丽 安永恒

【摘要】 目的 探讨环氧合酶 2（COX 2）抑制剂塞来昔布对人

宫颈癌 HeLa 细胞株的放射增敏作用及其机制。方法 MTT 实验测定塞

来昔布对宫颈癌 HeLa 细胞的毒性，筛选出塞来昔布的半数抑制浓度

（IC50） ，实验分为不同浓度药物组（10、20、40、80 mmol/L） 、对

照组和空白组。克隆形成实验检测 20% IC50 浓度的塞来昔布对 HeLa

细胞的放射增敏作用，实验分为空白对照组、单纯放射组（2、4、6、

8 Gy） 、单纯加药组（药物浓度为 20% IC50） 、放射加药组（20% IC50

药物浓度+2、4、6、8 Gy 放射剂量） ，根据各组的克隆形成率，计算

放射敏感性相关参数；流式细胞仪（FCM）分析细胞周期的分布情况，

实验分为对照组和药物组（药物浓度为 20% IC50） 。结果 MTT 实验显

示塞来昔布对 HeLa 细胞毒性呈现出浓度和时间依赖性，72 h 的 IC50

是 44 mmol/L；克隆形成实验显示，放射加药组与单纯放射组相比，

反映放射敏感性的指标平均致死剂量（D0） 准域剂量（Dq） 2 Gy 照
、 、

射的存活分数（SF2）均下降，放射增敏比（SER）升高。流式细胞术

检测细胞周期 S 期细胞明显减少，G0～G1 期细胞增多，细胞阻滞于 G1

期。结论塞来昔布能增强宫颈癌 HeLa 细胞的放射敏感性，其机制可能

与促进细胞凋亡、抑制肿瘤细胞亚致死性损伤修复和促进肿瘤细胞周

期再分布有关。

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【关键词】 塞来昔布；宫颈肿瘤；辐射增敏药

［ABSTRACT］ Objective To investigate the effect of

celecoxib, an inhibitor of cyclooxygenase 2 (COX 2), on

radiosensitivity enhancement of human cervical cancer HeLa

cells and its mechanism. Methods MTT assay was used to measure

the proliferation inhibition of celecoxib on HeLa cells and

determine the concentration IC50 of celecoxib. The cells were

randomized to three groups: drug group (10, 20, 40, 80 mmol/L),

control group and blank group. The cells were treated in vitro

with different doses of radiation alone （0, 2, 4, 6, 8 Gy）,

celecoxib (20% IC50) alone and radiation combined with celecoxib

administrated. The clonogenic assay was performed to determine

the radiosensitivity effect of celecoxib on HeLa cells with the

concentration of 20% IC50. The cell cycle distribution was

analyzed by flow cytometry (FCM) to compare control group with

drug group. Results Inhibition of celecoxib on HeLa cell

proliferation was dose and time dependent. Values of SF2, D0,

Dq, SER displayed the group of radiation combined with celecoxib

were significantly lower than those of radiation alone group.

Cell population in G0/G1 phase increased and in S phase decreased.

Conclusion Celecoxib can increase the radiosensitivity of HeLa

cells in cancer of the cervix, which is probably associated with

2

promotion of apoptosis, inhibition of sublethal damage of tumor

cells and facilitation of redistribution of tumor cell cycle.

［KEY WORDS］ celexcoxib; cervix neoplasm; radiation

sensitization agents

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，其发病率在妇女恶性肿

瘤中居第二位[1]。放射治疗是宫颈癌的主要治疗手段，Ⅱa 期以上多

采用放疗。但是肿瘤细胞内在的敏感性、乏氧程度等，使肿瘤对放疗

的敏感性存在着差异，而增加肿瘤的放射敏感性成为肿瘤放射治疗领

域一直关注的问题。选择性环氧合酶 2（COX 2）是花生四烯酸代谢

合成前列腺素过程中的限速酶，参与了许多重要的生理病理过程。已

有研究显示，COX 2 在多种恶性肿瘤组织中呈高表达。某些刺激因

子如癌基因产物、某些生长因子和辐射等都可诱导 COX 2 的表达，

而高表达的 COX 2 会促进细胞增殖，抑制细胞凋亡[2 3]。最近研

究显示，COX 2 抑制剂在体内外都有放射增敏作用，其确切机制尚

不明确[4 5]。 本实验以 COX 2 抑制剂塞来昔布配合放疗作用于体

外培养的宫颈癌 HeLa 细胞， 其对细胞的增殖抑制作用以及放疗的 观察

增敏作用，并探讨其可能机制，以期提高宫颈癌的放疗效果。现将结

果报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

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