胆总管结石合并胆管细胞癌患者手术前后HER2、Claudin18表达差异性及其与胆管疾病相关性和对预后的影响.pdf

21 摇Hodges PW,Stafford RE,Hall L,et al郾 Reconsideration of pelvicfloor muscle training to prevent and treat incontinence after radicalprostatectomy也J页.Urol Oncol,2020;38(5):354鄄71郾22摇 陈韶展,李晓东,林婷婷,等 郾 膀胱内前列腺突出程度对根治性前列腺切除术后尿控恢复的影响也J页.中华男科学杂志,2019;25(2):110鄄7郾23摇 王硕,杜鹏,曹煜东,等 郾 根治性前列腺切除术后前列腺尖端、基底切缘阳性的危险因素分析也J页.中华泌尿外科杂志,2021;42(4):283鄄8郾24摇Kajiwara S,Ishii K,Sasaki T,et al郾 Castration鄄induced stromal re鄄modeling disrupts the reconstituted prostate epithelial structure也J页.Lab Invest,2020;100(5):670鄄81郾25摇Alder R,Zetner D,Rosenberg J郾 Incidence of inguinal hernia afterradical prostatectomy:a systematic review and meta鄄analysis也J页.JUrol,2020;203(2):265鄄74郾也2022鄄09鄄12 修回页(编辑摇 高畅)胆总管结石合并胆管细胞癌患者手术前后 HER2、Claudin18 表达差异性及其与胆管疾病相关性和对预后的影响马大伟1摇 鲍鸿斌1摇 王亚琳2摇 李宁1摇 徐浩奕1(1 衡水市人民医院肝胆胰外科,河北摇 衡水摇 053000;2 衡水市第四人民医院急诊科)摇 摇 也摘摇 要页摇 目的摇 探索人表皮生长因子受体(HER)2 和闭合蛋白(Claudin)鄄18 在胆总管结石合并胆管细胞癌患者手术前后表达差异性及其与胆管疾病相关性和对预后的影响。方法摇 选取接受肿瘤手术治疗的胆总管结石合并胆管细胞癌患者50 例为胆管癌组,单纯胆总管结石患者 50 例为胆总管结石组,同期体检健康者 50 例为健康组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测术前和术后 1 w 外周血 HER2 和 Claudin鄄18 的水平。收集胆总管结石合并胆管细胞癌患者术中癌组织和癌旁组织样本及胆总管结石患者的胆管组织,采用免疫组化法检测组织中 HER2 和 Claudin鄄18 的表达。将胆管细胞癌患者组织中 HER2、Claudin鄄18 表达与临床病理进行相关性分析,治疗后随访 3 年,记录生存时间,进行生存分析。结果摇 术前及术后胆管细胞癌患者血 HER2 和 Claudin鄄18 表达水平显著高于胆总管结石患者和健康者,术后胆管细胞癌患者血清 HER2 和 Clau鄄din鄄18 表达显著低于术前表达(P0郾 05)。胆管细胞癌患者癌组织中 HER2 和 Claudin鄄18 阳性率显著高于癌旁组织及胆管组织(P0郾 05)。HER2、Claudin18 在胆管细胞癌患者中表达水平与组织性分级、血管亲润程度、转移程度呈正相关,与细胞分化程度负相关(均 P0郾 05);高表达HER2、Claudin18 在胆管细胞癌患者的生存时间明显低于低表达患者(P0郾 05)。不同分化程度的胆管细胞癌组织中 HER2、Claudin鄄18 低、中、高分化表达依次降低,且有统计学差异(P0郾 05)。Logistic 回归分析显示,HER2、Claudin鄄18 是胆管细胞癌发病的危险因素(P0郾 05);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,HER2、Claudin鄄18 曲线下面积分别为 0郾 874(0郾 794 0郾 954)、0郾 977(0郾 970 0郾 984),具有很高的检测灵敏度(P75%。总分为阳性细胞比率与染色强度评分之积:阴性0 分,标记为(-);弱阳性 1 4 分,标记为(+);中等阳性 5 8 分,标记为(荻),强阳性 9 12 分,标记为(莘);低表达0 8 分,高表达9 12 分。1郾 4摇 Western 印迹检测 HER2 和 Claudin鄄18 蛋白表达摇 提取蛋白,二喹啉甲酸(BCA)法测定蛋白量,电泳转膜后,5%脱脂奶粉室温封闭2 h,加入羊抗人Claudin鄄18、HER2(1 颐500)多克隆抗体(美国 SantaCruz 公司),稀释 1 颐1 000 的 茁鄄actin 单克隆抗体,4 益孵育过夜,PBST 洗涤后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗羊 IgG(北京博尔西科技有限公司),二抗室温孵育 2 h,PBST 洗涤后显色、曝光、显影、定影。实验重复 2 次。1郾 5摇 术后随访摇 术后每 3 个月对患者随访 1 次,随访最长时间为 3 年,记录患者生存时间,有无转移等,统计存活率并进行生存分析。1郾 6摇统计学方法摇采用 SPSS19郾 0 软件进行 t 检验、字2检验、Pearson 相关性分析。2摇 结摇 果2郾 1摇各组血清中 HER2 和 Claudin鄄18 水平(P0郾 05)摇 术前及术后观察组血清 HER2 和 Claudin鄄18 水平显著高于术前及术后对照组和健康组(P0郾 05)。术后观察组血清 HER2和 Claudin鄄18 水平显著低于术前(P 0郾 05),见表 1。表 1摇 各组手术前后血清 HER2 和Claudin鄄18 水平比较(n=50,滋g/L)组别时间HER2Claudin鄄18观察组术前73郾 22依12郾 811)2)38郾 84依5郾 821)2)术后26郾 35依5郾 061)2)3)18郾 42依3郾 541)2)3)对照组术前14郾 28依3郾 348郾 13依2郾 19术后13郾 52依3郾 828郾 92依2郾 27健康组13郾 17依2郾 917郾 34依4郾 29摇 与健康组比较:1)P0郾 05;与对照组同时期比较:2)P0郾 05,与同组术前比较:3)P0郾 052郾 2摇 两组组织中 HER2 和 Claudin鄄18 阳性率比较摇 癌组织中 HER2 和 Claudin鄄18 阳性率(94郾 0%、92郾 0%)显著高于胆管组织(8郾 0%、6郾 0%)及癌旁组织(10郾 0%、8郾 0%;均 P0郾 05)。见图 1。2郾 3摇 胆管细胞癌患者 HER2、Claudin鄄18 与临床病理的相关性摇HER2、Claudin鄄18 表达水平与性别、年龄无显著相关性(P0郾 05),与组织学分级、血管浸润程度、淋巴结转移程度呈正相关(r=0郾 621、0郾 322、0郾 628,均 P0郾 05),与细胞分化程度呈负相关(r=-0郾 372,P0郾 05)。HER2 与 Claudin鄄18 具有6214中国老年学杂志 2023 年 9 月第 43 卷正相关关系(r=0郾 723,P0郾 05),在组织学分级、分化程度、血管浸润程度、淋巴结转移方面差异明显(P0郾 05)。见表 2。图 1摇 各组织中 HER2 和 Claudin鄄18 表达(免疫组化,伊200)表 2摇 胆管细胞癌患者 HER2、Claudin鄄18 高表达与临床病理的相关性(n)临床特征nHER2(n=34)字2/P 值Claudin鄄18(n=37)字2/P 值性别摇 男26180郾 038/0郾 846200郾 241/0郾 624摇 摇 摇 女241617年龄(岁)摇 47 60150郾 001/0郾 981160郾 033/0郾 856摇 摇 摇 摇 摇 61 671921组织学分级摇 玉 域89郾 443/0郾 002721郾 992/0郾 000摇 摇 摇 摇 摇 摇 芋 郁2630分化程度摇 高513郾 600/0郾 001614郾 333/0郾 001摇 摇 摇 摇 摇 中910摇 摇 摇 摇 摇 低2021血管浸润摇 无618郾 681/0郾 000816郾 206/0郾 000摇 摇 摇 摇 摇 有2829淋巴结转移摇 无427郾 086/0郾 000624郾 175/0郾 000摇 摇 摇 摇 摇 摇 有3031摇2郾 4摇 Western 印迹检测不同分化程度胆管细胞癌组织中 HER2、Claudin鄄18 蛋白表达摇 不同分化程度的胆管细胞癌组织 HER2、Claudin鄄18 表达显示,低分化表达显著高于中分化,中分化显著高于高分化(P0郾 05)。见表 3。2郾 5摇 胆管细胞癌患者 HER2、Claudin鄄18 与预后关系摇 术后随访 3 年,HER2 高表达 34 例,死亡13 例,低表达 16 例,死亡 1 例。Claudin鄄18 高表达37 例,死亡 13 例,低表达 13 例,死亡 1 例。与低表达患者相比,高表达 HER2、Claudin鄄18 患者生存时间显著较短(P0郾 05)。见图 2。2郾 6摇 影响肝内胆管细胞癌患者预后的危险因素摇针对胆管细胞癌患者相关临床指标:HER2、Claudin鄄18、胆总管结石、胆囊结石、肝硬化、脂肪性肝炎进行Logistic 回归分析显示,HER2、Claudin鄄18、肝硬化、胆总管结石是肝内胆管癌发病的危险因素(P 0郾 05)。见表 4。2郾 7摇灵敏度、特异性曲线摇HER2、Claudin鄄18 的受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,HER2、Claudin鄄18 曲线下面积分别为 0郾 874(0郾 794 0郾 954)、0郾 977(0郾 970 0郾 984),具有很高的检测灵敏度(P 0郾 05)。见图 3。表 3摇 不同分化程度胆管细胞癌组织中 HER2、Claudin鄄18 蛋白表达(x依s)分化程度nHER2Claudin鄄18低分化2214郾 82依4郾 2725郾 34依7郾 82中分化139郾 48依3郾 051)15郾 17依5郾 291)高分化155郾 65依2郾 811)2)7郾 14依2郾 721)2)F/P 值32郾 004/0郾 00051郾 754/0郾 000摇 与低分化比较:1)P0郾 05;中分化比较:2)P96%,且随分化程度升高表达显著升高,在上皮病变中可达 98%也20页。本研究结果提示,HER2、Claudin鄄18 与胆管细胞癌的发生发展存在密切的关系、也有其他研究报道8214中国老年学杂志 2023 年 9 月第 43 卷HER2 的过表达与病理分期、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤大小有关也21,22页,有关 Claudin鄄18 蛋白的研究显示,其可参与肿瘤细胞的转移,并在增殖和分化凋亡过程中发挥了重要作用也23页,这与本研究结果相似。但有报道发现,Claudin鄄18 在肺腺癌中的表达与年龄、淋巴结转移均无关也24页,这与本研究结论存在一定差异,可能原因为 Claudin鄄18 在不同癌症中的异质性差异所致,需要进一步研究。研究表明,HER2 与多种肿瘤的预后不良因素有关,其是胃癌、乳腺癌、肠癌等恶性肿瘤的独立危险因素也25,26页,而 Claudin鄄18 在进展期胃印戒细胞癌(SRCC)患者中高表达,其在原发性胃癌和进展期胃 SRCC 中 的 表 达 差 异 有 显 著 性(77%vs95郾 24%),提示以 Claudin鄄18 为基础的靶向治疗在进展期胃 SRCC 的治疗中具有很大的潜力也27页。本研究结果提示,HER2、Claudin鄄18 表达可影响患者预后生存时间,二者可能在胆管细胞癌患者的预后中发挥作用。这为胆管细胞癌的预防提供重要参考价值,另外通过灵敏度曲线分析显示,检测 HER2、Claudin鄄18 具有很高的敏感度,对胆管细胞癌早期检测有指导意义。综上,HER2 和 Claudin鄄18 与肝外胆管细胞癌的发生发展有关,其可能成为其临床预后的预测指标。4摇 参考文献1摇 Zou W,Wang Z,Wang F,et al.A metabolism鄄related 4鄄lncRNA prog鄄nostic signature and corresponding mechanisms in intrahepatic cholan鄄giocarcinoma也J页.BMC Cancer,2021;21(1):608.2摇 Hwang JP,Moon JH,Kim HK,et al.Prognostic value of metabolic pa鄄rameters measured by pretreatment dual鄄time鄄point18F鄄fluorodeox鄄yglucose positron emission tomography/computed tomography in pa鄄tients with intrahepatic or perihilar cholangiocrcinoma:a STROBEstudy也J页.Medicine(Baltimore),2021;100(21):e26015.3摇 董志涛,沈伟峰 郾 肝内胆管细胞癌治疗进展也J页.中华肝脏外科手术学电子杂志,2020;9(1):6鄄10.4摇 enson AB,D忆Angelica MI,Abbott DE,et al.Hepatobiliary cancers,version 2郾 2021,NCCN clinical practice guidelines in oncology也J页.JNatl Compr Canc Netw,2021;19(5):541鄄65.5摇 Offin M,Feldman D,Ni A,et al.Frequency and outcomes of brain me鄄tastases in patients with HER2鄄mutant lung cancers 也 J页.Cancer,2019;125(24):4380鄄7.6摇 Dottermusch M,Kr俟ger S,Behrens HM,et al.Expression of the poten鄄tial therapeutic target claudin鄄18郾 2 is frequently decreased in gastriccancer:results from a large caucasian cohort study 也 J页.VirchowsArch,2019;475(5):563鄄71.7摇 邸亮,曾道炳 郾 精准医学时代肝内胆管细胞癌诊治进展也J页.中华肝脏外科手术学电子杂志,2020;9(1):11鄄6.8摇 Wang K,Zhang Y,Yang X,et al.Analysis of differentially expressedmRNAs and the prognosis of cholangiocrcinoma based on TCGA data鄄base也J页.Transl Cancer Res,2020;9(8):4739鄄49.9摇Shabunin AV,Lebedev SS,Tavobilov MM,et al.Preoperative biliarydrainage for malignant biliary obstruction:to drain or not to drain?And if drain,in what way也J页?Khirurgiia(Mosk),2021;20(6):101鄄5.10摇 詹琦,周晟,娄丽萍 郾 EGFR,HER2 和 HER3 在胆管细胞癌中的表达及预后价值也J页.实用肿瘤学杂志,2019;33(6):491鄄6.11摇 左忠林,陈鹏,陈小龙,等 郾 Claudin鄄18 在胃癌中的临床表达关系与治疗也J页.中华临床医师杂志(电子版),2018;12(3):50鄄3.12摇 Ji B,Bai J,Mur LAJ,et al.Mathematical modelling of Her2(ErbB2)PI3K/AKT signalling pathways during breast carcinogenesis to in鄄clude PTPD2也J页.AIMS Mathematics,2020;5(5):4946鄄58.13摇 Chiang SK,Chang WC,Chen SE.Dock1 regulates growth and motili鄄ty through the RRP1B鄄claudin鄄1 pathway in claudin鄄low breast canc鄄er cells也J页.Cancers,2019;11(11):1762鄄5.14摇 Kim SR,Shin K,Park JM,et al.Clinical significance of CLDN18郾 2expression in metastatic diffuse鄄type gastric cancer 也 J页.J GastricCancer,2020;20(4):408鄄20.15摇 Caron TJ,Scott KE,Sinha N,et al.Claudin鄄18 loss alters transcellu鄄lar chloride flux but not tight junction ion selectivity in gastric epi鄄thelial cells 也 J页.Cell Mol Gastroenterol Hepatol,2021;11(3):783鄄801.16摇 Coati I,Lotz G,Fanelli GN,et al.Claudin鄄18 expression in oesopha鄄gogastric adenocarcinomas:a tissue microarray study of 523 molecu鄄larly profiled cases也J页.Br J Cancer,2019;121(3):257鄄63.17摇 Li HX,Liang XY,Wu JH,et al.Simvastatin attenuates acute lung in鄄jury by activation of A2B adenosine receptor也J页.Toxicol Appl Phar鄄macol,2021;422:115460.18摇Shen CH,Lin JY,Lu CY,et al.SPAK鄄p38 MAPK signal pathwaymodulates claudin鄄18 and barrier function of alveolar epithelium afterhyperoxic exposure也J页.BMC Pulm Med,2021;21(1):58.19摇 VranicS,Bes姚lija S,Gatalica Z,et al.Targeting HER2 expression incancer:new drugs and new indications也J页.Bosn J Basic Med Sci,2021;21(1):1鄄4.20摇Baek JH,Park DJ,Kim GY,et al.Clinical implications of clau鄄din18郾 2 expression in patients with gastric cancer也J页.AnticancerRes,2019;39(12):6973鄄9.21摇 Liang JW,Zhang JJ,Zhang T,et al.Clinicopathological and prognos鄄tic significance of HER2 overexpression in gastric cancer:a meta鄄a鄄nalysis of the literature也J页.Tumor Biol,2014;35(5):4849鄄58.22摇 Ahn S,Woo JW,Lee K,et al.HER2 status in breast cancer:changesin guidelines and complicating factors for interpretation也J页.J PatholTransl Med,2020;54(1):34鄄44.23摇Tokumitsu T,Sato Y,Yamashita A,et al.Immunocytochemistry forclaudin鄄18 and maspin in biliary brushing cytology increases the ac鄄curacy of diagnosing pancreatobiliary malignancies也J页.Cytopatholo鄄gy,2017;28(2):116鄄21.24摇 刘英杰,桂淑玉,周青,等 郾 Claudin鄄18 蛋白在肺腺癌所致恶性胸腔积液中的表达及临床意义也J页.安徽医科大学学报,2014;49(12):1788鄄92.25摇 Mezni E,Vicier C,Guerin M,et al.New therapeutics in HER2鄄posi鄄9214马大伟等摇胆总管结石合并胆管细胞癌患者手术前后 HER2、Claudin18 表达差异性及其与胆管疾病相关性和对预后的影响摇 第 17 期tive advanced breast cancer:towards a change in clinical practices也J页?Cancers(Basel),2020;12(6):1573.26摇Klocker EV,Suppan C郾 Biomarkers in Her2鄄positive disease也J页.Breast Care(Basel),2020;15(6):586鄄93.27摇Suzuki K,Sentani K,Tanaka H,et al.Deficiency of stomach鄄typeclaudin鄄18 in mice induces gastric tumor formation independent of Hpylori infection也J页.Cell Mol Gastroenterol Hepatol,2019;8(1):119鄄42.也2022鄄08鄄18 修回页(编辑摇 张艳利)CYP19A1 基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及临床病理特征的相关性张柯媛摇 陈基强摇 黄艳摇 卢庭婷摇(广西卫生职业技术学院,广西摇 南宁摇 530021)摇 摇 也摘摇 要页摇 目的摇 观察老年乳腺癌患者细胞色素氧化代谢酶系 19A1 亚族(CYP19A1)基因多态性,并分析其与患者遗传易感性、临床病理特征的关系。方法摇 选取广西医科大学附属肿瘤医院 112 例老年乳腺癌患者作为观察组,另选取 112 例老年乳腺良性病变患者作为对照组;比较两组基线资料、临床病理特征、乳腺癌相关肿瘤标志物及 CYP19A1 基因多态性,分析CYP19A1 基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及临床病理特征的关系。结果摇 观察组体质量指数(BMI)明显高于对照组,大量饮酒占比、CYP19A1 r4646 位点基因 C/C 突变占比明显高于对照组(P1,P0郾 05);不同肿瘤淋巴结转移(TNM)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体(HER)鄄2、增殖细胞相关抗原(Ki67)表达的乳腺癌患者CYP19A1 基因多态性比较,差异有统计学意义(P0郾 05);CYP19A1 基因多态性与乳腺癌患者 TNM 分期、ER 阳性、PR 阳性、HER鄄2 阳性、Ki67 阳性具有相关性(P0郾 05)。结论摇 CYP19A1 基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及肿瘤分期、ER 表达、PR 表达、HER鄄2 表达、Ki67 表达有关。也关键词页摇 乳腺癌;细胞色素氧化代谢酶系 2D6 亚族;基因多态性;遗传易感性也中图分类号页摇 R737郾 9摇 也文献标识码页摇 A摇 也文章编号页摇 1005鄄9202(2023)17鄄4130鄄04;doi:10郾 3969/j郾 issn郾 1005鄄9202郾 2023郾 17郾 010基金 项 目:广 西 高 校 中 青 年 教 师 科 研 基 础 能 力 提 升 项 目(2019KY1542)通信作者:卢庭婷(1979鄄),女,硕士,副教授,主要从事分子生物学、分子遗传学研究。第一作者:张柯媛(1981鄄),女,医学硕士,副教授,主要从事药理学、医学微生物学研究。摇 摇 乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤,一项流行病学调查发现,2009 2018 年女性乳腺癌患病率逐年升高,患病年龄以 45 49 岁为高发也1页。目前乳腺癌常见治疗方法包括手术治疗、内分泌治疗及化疗等,虽然具有一定疗效,但仍有部分患者治疗后发生肿瘤进展,预后不佳。研究证实,乳腺癌的发病与遗传因素密切相关也2页。细胞色素氧化代谢酶系 19A1 亚族(CYP19A1)蛋白质可催化雌激素生物合成,且有研究表明,女性乳腺癌患者外周血 CYP19A1 基因表达在疾 病 复 发 中 起 到 重 要 作 用也3页。初 步 推 测CYP19A1 基因多态性与乳腺癌发生、进展有关。本研究就 CYP19A1 基因上 rs4646 基因多态性与乳腺癌患者遗传易感性、临床病理特征的关系。1摇 资料与方法1郾 1摇 一般资料摇选取 2020 年 3 月至 2022 年 3 月广西医科大学附属肿瘤医院收治的 112 例老年乳腺癌患者作为观察组。纳入标准:淤乳腺癌符合中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2015 版)也4页内相关诊断标准;于接受手术治疗,并经病理性检查明确诊断;盂乳腺癌肿瘤淋巴结转移(TNM)分期也5页玉 芋期。排除标准:淤合并其他乳腺疾病;于合并其他恶性肿瘤;盂接受过乳腺癌相关放化疗治疗;榆合并内分泌系统疾病或代谢性疾病;虞合并高血压、糖尿病等慢性疾病;愚合并严重心脑、肝肾功能异常;舆近期内接受过激素类药物治疗。另选取 112 例老年乳腺良性病变患者作为对照组,其中包括乳房纤维腺瘤57 例,乳腺内乳头状瘤21 例,乳腺脂肪瘤34 例,均符合相关诊断也6页。全部患者签署知情同意书。1郾 2摇 基线资料、临床病理特征收集摇 于两组入院当日收集其年龄、体质量指数(BMI)、绝经情况、大量饮酒(每日饮酒量超过 20 g 或 2 w 内每日饮酒超过80 g)。经手术及术后病理检查评估乳腺癌患者临床病理特征,包括病理类型(浸润性导管癌、非浸润性导管癌)、TNM 分期(玉期、域期、芋期)、淋巴结转移(阳性、阴性);行免疫组化检验,包括雌激素受体(ER)、孕激素(PR)、人表皮生长因子受体(HER)鄄2、增殖细胞相关抗原(Ki67),各项指标阳性判定依0314中国老年学杂志 2023 年 9 月第 43 卷