CL-BIII农残测定仪(八通道型)说明书.doc

上海博纳新技术研究所

CL-BIII八通道残留农药测定仪

使用手册

CL-BIII INTELLIGENT APPARS 沪制 00000281
FOR REMAINING PESTICIDE 标准号Q/NGBD1-2005

前 言

我国是农药使用大国（年使用量80--100万吨，居世界首位），由农药残留引起的食物中毒事故屡有发生，这主要分为在蔬菜、瓜果上使用高毒农药后，短时间内采摘和食用所引起的急性中毒事故和农药残留量超过最高允许限量（MRL值），长期食用引起的慢性中毒两种。由于农药品种结构不合理，加上一些人为的不合理使用农药，以及农药残留监管力度不够，致使我国农药残留问题比较突出。随着我国人民物质生活水平的不断提高，随着市场经济和世界经济贸易一体化的不断推进，农产品的质量安全性问题日益突出，尤其是农产品中的农药残留量超标问题，直接影响人民身体健康和农产品在国际市场的竞争力，并已经成为国家领导和社会公众高度重视和广泛关注的问题。因此，做好农药残留检测和监控工作，是保护人民生命安全，提高农产品质量和品牌效应，增强农产品市场竞争力，增加农民收入的大事。
由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂产量的70％以上，并造成70％以上的中毒事故（由有机磷农药引起）。为了把农药残留检测和控制工作落实到实处，上海博纳新技术研究所与农业部农产品质量监督和检测中心（北京）、中国农业大学农药残留与环境毒理教研室、上海交大农学院、上海市蔬菜办公室、上海市蔬菜技术推广站和上海浦东蔬菜办公室等多家单位共同合作，在生产源头监控和管理、市场流通的监测和追溯等及检测检验标准、仪器系列开发和消除检测假阳性等方面都取得了长足发展，并为国家质量监督局提供了GB/T 5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》的草案；为降低检测中出现的假阳性问题开发了针对葱蒜类、香菜、韭菜等15种蔬菜《果蔬农药残留比对数据库》的研究和建立；为监管部门实现地区实时网络化监控等作出了巨大的努力，并为提高检测人员的检测知识初步编写了该实用检测使用教材。
本检测教材的主要内容包括：农药的基础知识、农药残留检测概述、农药残留检测样本采集、农药残留快速检测流程及方法、农药残留快速检测标准及限量标准、农残快速检测法的“检测盲区”、CL-BIII残留农药测定仪检测软件设置等内容，都是在检测操作中实际碰到的具体问题。
最后，我们特别感谢中国农业大学农药残留与环境毒理教研室负责人钱传范教授（博士生导师，主要代表性著作有： 《化学农药》、《农药分析》、《农药与应用》(主编), 中国农业百科全书《农药卷》（副主编），《杀虫药剂环境毒理学》等，共发表论文100余篇。主持编写中华人民共和国农业行业标准《 绿色食品标准-生产绿色食品的农药使用准则》）、农业部农产品质量监督和检测中心（北京）副主任：潘灿平（博士，副教授，主持的项目有：FAO/IAEA项目CRP11479"农药分析方法验证"、国家教委留学启动基金"作用于章鱼胺受体农药开发"、北京市农业局"蔬菜中农药残留快速监测技术"项目、京海集团"蔬果中农药残留去除机理研究"等）和刘丰茂老师（博士，北京市农药学会会员，中国植物保护学会会员）和杨维华老师，感谢北京市工商行政管理局陈建平处长、上海蔬菜办和上海浦东蔬菜科技推广站的大力支持。

上海博纳新技术研究所

一、农药的基础知识概述
1、农药
用于预防、消灭或控制危害农业、林业的虫、草及其它有害生物以及有目的调节植物、昆虫生长的化学合成物或者来源于生物、其它天然物质或者几种物质的混合物及其制剂。
2、农药残留（pesticide residue）
农药使用后残存在生物体和环境中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。其含量以mg/kg（ ppm ）表示。
3、农药分类
按来源分类:矿物源农药、化学合成农药、生物源农药。
按化合物类型分类：无机化合物、有机合成化合物、天然有机物、抗生素、生物农药。
其中有机合成化合物又分为：有机氯化合物、有机磷化合物、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯、杂环类化合物等。
按作用方式分类：胃毒性农药 （敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）触杀性农药 （对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）；内吸性农药 （乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷）；薰蒸性农药 （溴甲烷、磷化铝、敌敌畏）；特异性农药 （乙烯利、赤霉素、灭幼脲）。
按主要防治对象分类：杀虫剂（杀螨剂）、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂等。

4、酶抑制率法。
酶抑制法指根据有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用，通过计算待测样品对乙酰胆碱酯酶活性的抑制率，定性判断其中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药及其存在总量的一种快速初筛方法。当检测出的抑制率小于或等于50%时属于阴性（总量不超标），当检测出的抑制率大于50%时属于阳性（总量超标）。

二、农药残留快速检测限量标准及标准
1、农药最大残留限量
无公害蔬菜的农药最大残留限量应符合下表规定，其中未列项目的农药残留限量标准各地区根据本地实际情况按有关规定执行：

有机磷（最高残留限量mg/kg）
马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷、 氧化乐果不得检出；
六六六0．2、 滴滴涕0．1、 敌敌畏0．2、乐果1．0、杀螟硫磷0．5、倍硫磷0．05、辛硫磷0.05、乙酰甲胺磷 0.2、   二嗪磷0.5、 喹硫磷0.2、 敌百虫0.1、亚胺硫磷0.5、杀螟硫磷0.5、草甘膦0.1
氨基甲酸酯
呋喃丹、 涕灭威不得检出
2、定性分析
目前已被列为国家推荐标准（GB/T 5009.199-2003）的酶抑制率法由于该方法具有快速、灵敏、操作简便、成本低廉等特点，已成为对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留进行现场快速定性初筛检测的主流技术之一，得到了越来越广泛的应用。由于酶抑制率法是对有机磷和氨基甲酸酯类农药的综合含量检测，真实的检出限是非常低的。

蔬菜样品的抑制率
蔬菜品质
评价和建议
0％ < 检测抑制率 <15 ％
无污染蔬菜
基本上可以放心出口
15％ < 检测抑制率 <30 ％
绿色蔬菜
处理和检验后可以出口
30％ < 检测抑制率 <50 ％
无公害蔬菜
可以安全食用
50％ < 检测抑制率 <100 ％
有农药污染蔬菜
不能安全食用
3、定量检测
随着检测技术的不断完善,检测方法的不断提高, 新的CL-BIII农残快速测定仪的“食品安全检测平台”软件将在V8.0以上版增加了定性定量的气相、液相检测功能，并在快速检测平台软件上也增加了“农药标定”功能，并实现对单一农药的定量检测。

三、农残快速检测法的“检测盲区”
假阳性的产生：
一方面，由于各蔬菜品种间（如：葱蒜类、香菜、韭菜等15种容易出现假阳性的蔬菜）对检测抑制率有不同干扰和影响，使一般的快速检测方法难以区分与农残抑制作用的比例关系容易造成误判（假阳性）；另一方面，因色素的干扰可能影响检测结果的准确性。当待测样品的色素（如：叶绿素、胡萝卜素等）含量较高时，会使测得的透过率非常低，从而造成对吸光度随时间变化值计算的错误，影响检测结果的可靠性。
《果蔬农药残留比对数据库》：
2004年，上海博纳新技术研究所与农业部农产品质量监督和检测中心（北京）及中国农业大学农药残留与环境毒理教研室共同合作，依据GB/T5009.199-2003的标准，在CL-BIII农残快速测定仪的基础上成功研发了《果蔬农药残留比对数据库》，初步解决了应用“酶抑制率法+分光光度法”检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留时存在的部分“检测盲区”，在一定程度上避免了检测结果的假阳性，并实现了检测过程中对吸收光谱的自动校准。利用这一科研成果，可使非专业人员能较快掌握相应的操作技能，从而达到复杂原理与简易操作的有机统一。

四、仪器相关参数
仪器主要用途和原理
CL-BIII残留农药测定仪八通道型是我公司根据市场需求而研发的新产品，仪器主要用于测定果蔬中有机磷类与氨基甲酸酯类农药的残留量。
CL-BIII残留农药测定仪和所配套的试剂依据的是中华人民共和国国家标准《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》（标准号：GB/T 5009.199－2003）。
该国家标准是根据酶的活性变化程度，定性和半定量地测定果蔬中农药的残留量，并用“抑制率”来表示残留农药量的多少。其判别标准为：
若被测样本的酶抑制率＜50%为安全果蔬。
若被测样本的酶抑制率≥50%为农药残留的毒性超标，建议重复一次，如再超标可送有关部门作进一步的定衡量检测。
仪器主要技术指标
l 波长： 410nm
l 波长准确度: ±3nm
l 波长重复性：1.5 nm
l 透射比准确度: ±1.0% ( τ )
l 透射比重复性: 0.3% ( τ )
l 光路/通道间干扰：< 0.2％ ( τ )
l 抑制率示值范围：0～100％
l 抑制率测量范围：10～100％
l 重量: < 4kg
l 外形尺寸：八通道：265mm × 195mm × 68mm （L×b×h）
仪器正常工作条件
l 室温5℃ - 35℃（如果室温低于5 ℃，建议使用恒温水浴）
l 室内相对湿度不大于85%
l 仪器应放置在平稳的工作台上，不得有阳光直射及强烈的电磁场干扰
l 电源电压：直流适配器供电交流200-240V，50HZ
五、基本操作步骤
（一） 试剂配置
l 提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加入510ml蒸馏水或纯净水溶解。
l 酶试剂：用移液枪取3.1ml提取液，加入酶试剂瓶中。
l 显色剂：往显色剂瓶中加入2.5ml提取液，倒入棕色瓶中，重复2次，再往棕色瓶中直接加入15ml提取液，总容积为20ml。
l 底物： 用移液枪取3.1ml蒸馏水或纯净水，加入底物瓶中。

试剂的保存及注意事项
l

本试剂适用的国家标准为：GB/T5009.199-2003。
请在冻干状态时用冷冻的方式保存，而溶液状态时用冷藏的方式保存。具体保存期限如下：
试剂保存期
限及方式
冻 干 剂
溶 液 剂
常温放置
冷冻保存（-4～5℃）
常温放置
冷藏 （4℃）
酶液
1～2周
一年
2～4天
7～10天
底物
1～2周
一年
2～4天
7～10天
显色剂
避光保存 一年
避光保存 半年
提取液
无期限
无期限

（二） 联机操作
1.硬件连接
1. 将仪器的电源接头接好。
2. 将数据串口线一端连到电脑的RS232接口上，另一端与八通道串口相连。

2.软件安装
检测软件的升级与安装。
1. 启动电脑，将残留农药检测软件光盘装入光驱中；
2. 等待光盘自动运行或双击setup.exe安装文件后进入安装程序；
3. 根据提示按“下一步”或“是”，最后按“完成“即可。
注：如果是升级安装，不用卸载原来的检测软件，直接运行新版本检测软件的安装程序，然后选择“修复或升级“项，再按照提示按“下一步”完成。

3.仪器设置
首先开机，按两次“确定”键，然后按“设置”键，再按“确定”把光标选到“受控”，按“确定”，此时仪器会出现“正处于受控工作模式”字样。
打开检测软件，检测软件的用户名默认为“管理员”，密码是“111111”。

4.检测步骤
第1步设置
“设置”菜单中，有“设备设置”和“系统选项”两项设置；“设备设置”是对于检测仪器与检测软件之间的匹配进行设置，“系统选项”可以对检测软件的系统参数机联网时的ID进行设置。

（设 备 设 置）

将18位ID号和ID密码（默认为：111111）填写在相对应的地方，并勾选相关的选项，最后按“确定”键保存。

（系 统 选 项）
第2步、调0调100
按“开始对照分析”键 等待3-5秒 按“100”键 按“结束分析”键, 按“开始对照分析”键 放入黑块 等待3-5秒 按“0”键 按“结束分析”键 拿出黑块。

注：以上是一个检测窗口的步骤，其他七个窗口都是如此。
注释：调0/100时，当我们按“100”键，并“确定”后，当前透射比值不会马上变为100，此时，软件内部100值已调好，但并未表现出来。只有按“结束分析“键后，再重新按”开始对照分析“键，透射比值才会表现为100。

第3步、空白对照
A. 用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中， 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 准备出比色皿 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开始对照分析”键 等待结束。
注：三分钟检测停止后，差值大于8则证明酶的活性正常。
B. 装入对照：按“操作” “装入对照分析”键，在本地对照库中选择所需对照（如果需要使用特殊蔬菜的修正标准，则要在标准对照库中选择菜样的修正曲线和所需要对照） 然后选择需要装入对照的通道号（在通道号码前打√的就是选择好的） 按“读取”键完成装入工作。
注：必须确保读取对照的通道已经做过调0调100。

（抽取2.5ml提取液） （加入0.1ml试剂）
第4步、样品检测
用天平称取1克果蔬 剪成1-2cm见方 放入烧杯中 用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 静置15分钟 拿出比色皿 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开始样品分析”键 等待结束。

（称取1克蔬菜） （蔬菜剪切） （倒入比色皿）
第5步、检测结果保存
样品结束后，系统自动弹出“检测结果”对话框 选择该通道所测蔬菜名 填写（选择）被检单位和生产单位 填写（选择）检测单位 按“保存”键将结果保存到数据库中 按“退出”键退出。

（“检测结果”菜单）
第6步、数据上传
打开“统计汇总”中“农残检测数据查询统计”，可以看到所有保存过的检测数据，通过对“开始日期“、“结束日期”、“果蔬品种”、“被检单位”等九项选项的选择，再按“查询”键，就可以将您需要的信息筛选出来，此时按“发送”键，并点选“发送所有查询的数据”。或者直接选择“发送所有未发送的数据“就可以把所有未发送的数据上传到网上。当出现“上传成功”字样，代表您已经成功上传了数据。

（“统计汇总”菜单） （农残检测数据查询统计）
数据上传成功后，可以选择“帮助”里面的“访问检测点网站”，查询自己上传的数据。

第7步、数据库备份与恢复

（系统菜单） （数据库备份）
注：数据库备份要备份在非系统盘（一般不要保存在C盘）里，防止重装系统数据丢失。建议一周或者两周备份一次。重装系统之后，把软件安装好，点“数据库恢复”选择以前备份的数据，就可以把数据恢复。
5.基础数据维护
在“基础资料维护”菜单中，可以对“食品大类”、“果蔬品种”、“被检单位”等基础资料进行添加、修改和删除等操作。

（“基础数据维护”菜单） （果蔬品种编辑）
（三）单机操作
1. 设置仪器
1）连接电源
将仪器电源连接好，（如需打印，则要将专用打印机连接到仪器的打印接口上。）如图：

2）仪器设置
打开仪器开关后，按提示进入仪器操作主界面。按“设置”键然后按“确定”键，把光标选在“独立”，再按“确定”进入仪器单机操作，在“设置”里可以对“通道选择”、“日期”、“打印方式”、“对照查询”等进行设置。设置完成后再按“设置”键退回到主界面。（如图）。

(工作模式选择) （日期设置）

3）调100值
在主界面状态下，按0/100键，根据屏幕提示逐一调整1-8通道的100值。（按0/100 键 按0/100键 按“确定”键 按0/100键 按“确定”键，如此反复直到最后按“确定”键结束）

（按确定键） （按0/100键）
2. 空白对照
用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 准备出比色皿 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“对照”键 等待结束。注：三分钟检测停止后，差值大于八则证明酶的活性正常。

3. 样品分析
用天平称取1克果蔬 剪成1-2cm见方 放入烧杯中 用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 静置15分钟 准备出比色皿 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“样品”键 等待结束。
注：按下“样品”键后，仪器首先会询问您“第一通道是否准备完毕”，如果准备好了，就选择“准备好了” ，否则选择“不用”，按“确定”后，进入第二通道的准备，以此类推直至八个通道都询问完毕。检测结束后，跳出“检测结果”的顺序是从第一通道开始到第八通道结束。
4. 数据打印
按“打印”键 按“确定 ”键 用△/▽键选择检测数据的编号
按“打印”键打印(或者按“确定”键退出打印状态)。

六、注意事项
1.检测中需要注意哪些事项？
A.蔬菜不能剪切的太小，一般以2cm见方为好；
B.对于颜色深的蔬菜尽量取茎、叶各一半为好；
C.对于果品，可以顺皮削下一块或取皮下部分；
D.对于有味蔬菜可以使用检测软件的对照标样库来检测；
E.对于有杂质或沉淀物及较浑浊的检液可以采用双倍取样，过滤后再检测；
F.移液枪的枪头不能互相污染；
G.在移液枪将试剂加入检液时，一定要保证枪头垂直于液面，不能将试剂加到试管壁上。
H．按F4可出现计时工具，按F5可从一个窗口还原到原始窗口数。
2.仪器联机操作的情况下，在检测过程中或者开始检测时，电脑出现“没有检测到指定的设备……”，是怎么回事？
一般来说出现这种提示说明您的检测仪与电脑硬件连接出现问题，检查的步骤如下：
第一步、确定检测软件的设备设置中相关设置与硬件连接相匹配；
第二步、电脑串口通讯故障，检测方法：重新启动电脑，确认是否故障依然存在，如果故障依然存在，检查下一步；
第三步、更换一下电脑串口，并在检测软件的设备设置中进行相应的改动，或者换一台电脑，确认故障是否存在，如果故障解决，则表明是电脑本身的问题，否则可进行下一步检查；
第四步、更换RS232485转换器，确认问题是否存在,如果故障解决，则表明为RS232485转换器连接不通。
3.仪器联机操作的情况下，调100时看不到红线是怎么回事？
首先我们要学会看图谱，图谱的横坐标为时间，纵坐标为投射比，我们所所的调100准确的所是指将投射比值调整为100％。
图谱在没有拖拉的情况下，最高只能显示到100，如果在调100的过程中，其投射比值大于100，那样就看不到红线了，但图谱右边的小白框中有数字显示，你只要正常的调0/100就可以了。
另外，对于小白框内数字，显示的是当前的投射比值。在做对照或调0/100时，小白框内的数字前有一短红线，在做样品时则为短绿线。大家不要把这个短线认为是负号。
4.如何检测仪器的重现性？
做一空白对照后，做一个双倍量的样品，然后一分为二，先后或同时做检测，即：取2克样品，加10ml提取液浸泡，然后取5ml检液，分别加0.2ml的酶、显色剂，15分钟后，如果直接加0.2ml底物，然后一分为二在两个通道中同时做检测，则是检查不同通道的重现性；如果15分钟后先将溶液一分为二，先后加入0.1ml底物做检测，则是检查同一通道的重现性。
5.如何添加品种名称？
一般来说有两种添加方法：
A.可以在基础数据维护中进行添加。
B.在检测结果弹出是，通过“…”进行添加。
另外，在添加时一定要按“增加”键，填好相关信息后按“保存”完成。

6.如何升级检测软件？
对于检测软件的升级有两种方法：
A.在线升级：打开检测软件并连接因特网，然后在帮助中选择在线升级。
B.本地升级：执行新版检测软件的安装程序，选择“修复或升级”项，然后按照提示完成安装即可。
7.如何上传数据？
上传数据有三个步骤：
1）打开“设备”菜单中的“系统选项”，并将注册ID号和ID密码填写好；
2）打开“统计汇总”菜单中的“农残检测数据查询统计”，通过查询项将需要上传的数据查询出来；
3）按“上传”键完成上传数据的操作。

GB/T

中华人民共和国国家标准
GB/T5009.199-2003

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量
快速检测方法

Rapid method for organophosphate and
carbamate pesticide residues in vegetables

2003-08-11发布 2004--01--01 实 施
发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
GB/T5009.199-2003
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准

1 范围
本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。

测试方法 酶抑制率法
2 原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3试剂
3.1 pH8.0缓冲溶液：分别取43.5g无水磷酸氢二钾与2.2g磷酸二氢钾，用510mL蒸馏水溶解。
3.2 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4°C冰箱中保存。
3.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.1mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。保存期不超过十天。
3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min的吸光度变化D A0值应控制在0. 3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超十天。
3.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0. 3以上。
4 仪器
4.1 分光光度计或相应测定仪。
4.2常量天平。
4.3 恒温水浴或恒温箱
5 分析步骤
5.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，静制十五分钟，之间需振荡几次，待用。
5.2 对照溶液测试： 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，依次加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂、0.lmL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3 min的吸光度变化值ΔA0。
5.3 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，但在加底物之前必须放置15分钟，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt。
6 结果的表述计算
6.1 结果计算
检测结果按公式计算：抑制率(%)=[ (ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100
式中：ΔA0 －对照溶液反应3min吸光度的变化值；
ΔAt －样品溶液反应3min吸光度的变化值；
6.2 结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
7 附则
7.1酶抑制率法技术指标
7.1.1 灵敏度指标：酶抑制率法对部分农药的检出限见表2酶抑制率法对部分农药的检出限
表2 酶抑制率法对部分农药的检出限
农药名称
检出限mg/kg
农药名称
检出限mg/kg
敌敌畏
0.1
氧化乐果
0.8
对硫磷
1.0
甲基异柳磷
5.0
辛硫磷
0.3
灭多威
0.1
甲胺磷
2.0
丁硫克百威
0.05
马拉硫磷
4.0
敌百虫
0.2
乐果
3.0
呋南丹
0.05

7.1.2 符合率：在检出的抑制率≥50％的30份以上样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应该在80％以上。
8说明
8.1葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整棵蔬菜萃取或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜萃取的方法，减少色素的干扰。
8.2 当温度条件低于37度，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相应延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度变化差值在0.3以上，即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度变化差值在0.3以下的原因：一是酶的活性不够，二是温度太低。

CL_BIII八通道残留农药测定仪配置清单

序号
名称
规格
数量
备注
1
CL-BIII残留农药检测终端
——
1台

2
残留农药检测软件光盘
——
1张

3
比色皿一盒4只
1cm/只
2盒

4
塑料瓶
带塞 510ml
1个

5
小黑块
——
1个

6
微量移液器（国产）
0.1ml
1把

7
微量移液器（附枪头5个）
0-5ml
1把（枪头5个）

8
玻璃瓶（棕色）
带塞 50ml
1个

9
塑料小烧杯
40ml
10个

10
量筒
100ml
1个

11
试管
20ml
15支

12
试管架
——
1个

13
冲洗瓶 、试管刷
——
各1个

14
稳压电源
9V
1个

15
信号线
——
1根

16
剪刀、玻璃棒
——
各1个

17
仪器安装使用说明书
——
1份

18
合格证
——
1张

19
保险丝
——
1只

20
客户须知与服务卡
——
2张

21
铝合金外包装箱
——
1只