外植体的继代培养.doc

潍坊职业学院项目课程
项目名称：菊花的继代培养
项目进行时间：2010年11月23日
项目进行地点：该校组培中心
项目小组成员：薛金金 王珏 刘秋霞 杨朝军 提晓东 索鹏飞
项目指导教师：丁雪珍
本项目书由《植物组织培养》精品课程组制
填写说明
1、本合同书用于潍坊职业学院《植物组织培养》项目教学。
2、表格格式由《植物组织培养》任课教师提供，学生填写完成。
3、本项目实训报告书，每一部分都由项目小组成员讨论完成，最后由小组内某位成员负责整理填写各个相关部分，并在整理填写人处签名。
3、本项目实训报告书作为该项目考核之用，每个小组上交电子稿和打印稿各一份。
4．该项目书底稿请自行保存，以备不时之需。
二、该项目的进行需要的物品材料
该项目的进行需要的物品材料：
1、仪器
酒精灯；超净工作台；三角瓶；玻璃棒；烧杯；量筒；铝锅；电炉；吸耳球；引流器；弯口剪刀；镊子；
2、药品
蒸馏水；大量元素；微量元素；铁盐；维生素；酒精；琼脂22g;
3、其他工具
纱布；秒表；喷壶；封口膜；麻线；剪刀；
4接种对象 菊花

填表人：王珏
2010年11月23日

三、该项目工艺路线
该项目工艺路线：
1、配制3000ml的MS培养基：
1）从MS基础液中分别取300ml的大量元素、3ml的微量元素、30ml的铁盐、12ml的维生素于烧杯中；
2）加热26000ml的蒸馏水至60度再加入90g，继续加热至约70度左右加放琼脂22.5g;此溶解药剂过程中不断用玻璃棒搅拌；
2、86瓶三角瓶的洗涤与晾干
3、分装三角瓶：利用虹吸法用引流器分装三角瓶，每三角瓶盛装40ml的培养基；
4、灭菌：分装后的培养基封口并与搁置架、纱布一起包扎灭菌（121摄氏度，25min）；
5、超净台的准备
接通超净工作台的电源，把酒精灯；铁架台；打火机；记号笔；干、湿抹布（如有不慎发生火灾等紧急情况时用于扑火）；次氯酸钠；盛有浓度为75%酒精的喷壶；无菌水；培养基；镊子放进超净工作台的台面上，在准备一个空箱（用来盛放包扎器皿的牛皮纸和麻绳）；随后关上门窗和灯、打开紫外灯照射消毒30分钟；然后关掉紫外灯打开风机，约二十分钟后用肥皂洗手，再打开照明灯进行无菌操作。
6、接种前的准备：用75%的酒精给手、台面培养基瓶壁灭菌后进行菊花的转接；
7、转接：
1）点燃酒精灯，打开灭过菌的搁置架并放到台面的右前方；将弯刀剪、镊子灼烧后放到搁置架上；
2）拆开所有封口的麻线，左手拿着外植体启动培养基瓶和MS培养基瓶，右手拿着灭过菌的弯刀剪；将幼茎剪断，呈0.5-1cm；再用镊子转接至MS培养基中；
注（转接的茎段不能带老叶和根）

填表人：王珏
2010年11月23日

五、该项目的实训结果分析
该项目的实训结果分析

填表人：
年 月 日