茶叶中茶多酚的提取和测定.doc

茶叶中茶多酚的提取和测定

一，主要仪器、药品及材料
仪器: 722 - E可见分光光度计,干燥箱, 电子天平, pH计, 容量瓶, 真空泵, 布氏漏斗。
化学试剂:无水硫酸钠,硫酸亚铁( FeSO4 ·7H2O) ,酒石酸钾(KNaC4H4O6 ·4H2O) ,磷酸氢二钠(Na2HPO4 ·12H2O)，磷酸二氢钾(KH2 PO4 ) ,乙酸乙酯。
材料:茶叶
二，茶多酚的提取工艺。
采集茶叶→去灰尘,洗干净→晾干→干茶叶→粉碎→90℃接近沸水中搅拌浸提→过滤→乙酸乙酯萃取→得有机相→无水硫酸钠干燥→减压蒸馏→得黄色粉末状茶多酚→称量。
1 预处理。粉碎干茶叶:将采集来的茶叶洗净、晾干,烘干,最后粉碎。粉碎的目的是与液体的接触面增大,使提取率增高。由于试验条件的限制,用剪刀代替粉碎机,将干茶叶剪碎,并且用研钵研细。干茶叶量为50. 00g。
2 提取。在众多的提取方法中,选用了溶剂提取法,具体过程是称取经过预处理的干茶叶末30. 00g,加250mL 90℃接近沸水中搅拌浸提,过滤,先后用250mL 的乙酸乙酯萃取两次。合并两次有机相,再用无水硫酸钠干燥,减压蒸馏除去乙酸乙酯溶剂得黄色粉末状茶多酚。称量为0. 2945g,提取率为0. 98%。
三，测定
1 定性测定。从外观上看,为黄色粉末状。物理性能为,易溶于水及乙醇,味苦涩。
2 定量测定方法。光度法———酒石酸亚铁比色法。其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。
3 茶多酚标准溶液的配制。称取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg纯品的标准溶液(mg/mL) 。
4 茶多酚的含量。茶多酚标准曲线的绘制。分别吸取茶多酚标准溶1.0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线
表1　茶多酚标准曲线
茶多酚标准溶液体积(mL)
1.0
2.0
3.0
4.0
A
0.115
0.223
0.362
0.475
茶叶中茶多酚含量(mg/g)
37.51
72.74
118.07
154.93

y = 321. 16x + 0. 003　R2 = 1