跟腱切断法诱导大鼠异位骨化动物模型的建立.doc

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跟腱切断法诱导大鼠异位骨化动物模型的建
立

作者：徐俊昌 ，吴涛，吴桂华，钟招明，汤勇智，赵成毅， 陈

建庭

【 摘 要 】 ［ 目 的 ］ 探 讨 建 立 一 种 异 位 骨 化 （ heterotopie

ossification,HO） 动物模型，并初步研究其形成机制。 ［方法］36

只雄性 Sprague Dawley (SD)大鼠随机分为三组（n=12） ：单纯切开

皮肤组 （sham） 跟腱半切组 （partial Achilles' tenotomy,PAT)、 、

跟腱全切断组（Achilles' tenotomy,AT） 于术后 6、10 周分别行跟 ，

腱 X 线和组织学检查， 观察异位骨形成情况。结果］(1) sham 和 PAT ［

组 6、10 周均未发生 HO；(2) AT 组：术后 6 周，3 只大鼠 X 线片可

见异位骨，3 只组织学检查发现有软骨形成；术后 10 周，6 只大鼠均

出现 HO。这种异位骨具有骨小梁和骨髓结构，是通过软骨化骨形成。

［结论］跟腱切断术能有效诱导大鼠 HO，该方法简单、有效、易行，

结果稳定。

【关键词】 跟腱； 异位骨化； 模型； 大鼠

Abstract ： Objective ］To establish an animal model of ［

heterotopie ossification (HO) induced by Achilles' tenotomy in

Sprague Dawley (SD) rat and to investigate its possible

mechanism.［Method］Thirty six male SD rats were divided into

3 groups (n=12).In sham group,incision and suturation were

performed only in the left leg.Partial tenotomy was performed

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in the left Achilles tendons in PAT group.In AT group,tenotomy

was performed in the left Achilles tendons to establish animal

model of HO.X ray and histological examinations were made at

6 and 10 weeks after operation.［Result］(1)No HO occurred in

the sham and PAT groups.(2)In AT group,3 rats showed cartilage

and bone formation on X rays while the remaining 3 rats showed

chondrification in histological examination at 6 weeks after

operation.At 10 weeks all rats showed bone formation with

trabecular bone.This kind of HO developed through a process of

endochondral ossification. ［ Conclusion ］ Tenotomy is a

simple,effective and feasible method to induce HO.

Key words ： achilles tendon; heterotopic ossification;

animal model; rat

近年来， 随着人工关节的广泛应用及骨折切开复位内固定术的普

及，HO 的发病率显著增高。由于其发病机制不明，缺乏理想的预防和

治疗方法，致残率很高，其病因和发病机制受到广泛关注。因缺乏与

临床密切相关的动物模型，目前对 HO 的研究大多集中在临床预防和

治疗上。动物模型是研究骨的形态结构及生长代谢特点的有利工具，

本研究旨在建立一种有效诱导 HO 动物模型的方法，并初步探讨其形

成机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

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SD 大鼠，雄性，体重 120～150 g，平均 140 g。由广州中

医药大学实验动物中心提供。

1.2 实验设计

36 只大鼠随机分为 3 组：sham、PAT、AT 组。大鼠腹腔注射戊

巴比妥(30 mg/kg) 麻醉后，无菌条件下，取左小腿后外侧入路。sham

组：切开皮肤，显露跟腱后缝合；PAT 组：跟腱中点处横断 1/2，缝

合皮肤；AT 组：跟腱中点处完全横断,在断裂跟腱两端，用血管钳反

复钳夹 5 次，造成一定的创伤，跟腱不予缝合，缝合皮肤切口。术后

常规饲养、观察。

1.3 观测指标

1.3.1 X 线检查 分别于术后第 6、10 周大鼠麻醉后行手术部位

跟腱 X 线检查，观察有无异位骨形成。

1.3.2 跟腱的肉眼观察与组织学检查 大鼠进行 X 线检查完毕

后，断颈法处死，跟腱部位取材。观察大鼠跟腱的颜色、厚度、弹性、

坚硬度及异位骨位置。然后用 10％的中性甲醛固定 24 h，15%的 EDTA

脱钙 1 周，脱钙完全后梯度乙醇脱水，透明石蜡包埋，制成 5 mm 厚

切片，HE、Masson 染色，光镜观察。

2结果

2.1 大鼠一般情况

术后第 1d AT 组死亡 2 只、PAT 组死亡 1 只，及时予以补充。

余大鼠情况良好，切口无感染，愈合良好。

2.2 跟腱肉眼观察结果

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