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杜仲叶水提醇沉工艺对氯原酸含量的影响

作者：吴红 李稳宏 吴道澄 李晓晔

【关键词】氯原酸

关键词:杜仲叶;氯原酸;提取;醇沉

0 引言

氯原酸（chlorogenicacid，CHA）是名贵补益中药杜仲的主

要活性成分之一，对多种致病菌和病毒有较强的抑制和杀灭作用，是

众多药材和中成药抗菌解毒、补中益气、镇痛强志、消炎利胆的主要

有效成份.杜仲传统仅以皮入药， 近来研究证实杜仲叶和皮成分基本相

同，且叶中 CHA 含量明显高于皮.若以叶为原料提取 CHA，不但可变废

为宝， 而且为杜仲叶的综合利用开辟了一个新途径.目前国内外对氯原

酸的提取分离多以咖啡豆及金银花为原料，甲醇、乙醇等有机溶剂提

取，用柱层析、沉淀萃取及 HPLC 分离纯化，这些方法不但成本高而且

工序复杂.CHA 分子中有五个羟基，有一定的水溶性.因此我们尝试了

水提醇沉工艺，着重研究了一次醇沉及以梯度递增方式醇沉（分次醇

沉）对水提液中 CHA 含量的影响，为后续 CHA 分离纯化打下基础.

1 材料和方法

1.1 材料杜仲叶由陕西省城固县科委提供.氯原酸标准品由

美国进口.日本岛津 UV-265 自动记录分光光度计.ZF-2 型三用紫外仪.

1

展开剂:正丁醇-乙酸-水（4∶1∶5）上清液.新华 1 号层析纸.所用试

剂均为分析纯.

1.2 方法杜仲叶 60℃干燥后搓成粗粉，过 20 目筛，称取杜仲

叶粗粉 4 份各 100g，分别加水 600mL，50℃下浸提 40min，趁热过滤，

滤渣加水 600mL，重复操作，第三次加水 400mL，50℃下浸提 30min，

合并滤液，减压浓缩至 60mL，紫外分光光度法测定含量［1］.滤液分

别进行一次醇沉和分次醇沉，除去蛋白质多糖等杂质，测定含量.滤液

加饱和醋酸铅至不再生成沉淀为止，滤取沉淀，水洗，10%H2SO4 脱铅，

活性炭脱色，调节 pH 值，减压干燥得粗品氯原酸，纸层析法分析其纯

度. 2 结果

用 6 倍于杜仲叶重量的水，50℃下 40min，浸提 3 次，平均

浸出率 93.82%，加 90mL 无水乙醇醇沉至 60%（溶液中乙醇浓度）时，

CHA 损失率为 6.5%;若用 240mL 无水乙醇醇沉至 80%时，CHA 损失率

9.8%;540mL 无水乙醇醇沉至 90%时，CHA 损失率为 16.4%.若采用梯度

递增方式醇沉即 60%～80%～90%，依次加入 95%的乙醇 103mL，216mL，

760mL，CHA 损失率仅为 11.7%.由纸层析图谱可知，紫外灯下 Rf0.70

处为 CHA 斑点 蓝色荧光） 随着醇沉浓度的增加，
（ ， 杂质含量逐渐减少，

当醇沉浓度达 90%时，几乎未检出杂质，且分次醇沉比一次醇沉至 90%

时所得 CHA 斑点大，显色深.粗品氯原酸纯度仅为 22.14%.

3 讨论

2

氯原酸水提工艺简单经济，但与一般中草药提取不同的是

CHA 的邻苯二酚结构不稳定，高温及长时间加热易氧化分解.为此我们

对水提液温度作了正交实验，发现 50℃以后随着温度增加，浸提液中

氯原酸含量反而下降.醇沉除杂时醇沉浓度越高越有利于除去杂质， 但

损失率随之增大， 氯原酸含量反而下降.这主要是因为醇沉时夹带着析

出部分 CHA 造成的.一次醇沉至溶液中乙醇浓度为 90%时损失较大，损

失率达 16.4%，而分次醇沉仅为 11.7%.一次醇沉至 60%时，损失率虽

然较低， 但其中的杂质在纸层析上显而易见.因此选择合适的醇沉浓度

及醇沉方式非常重要.分次醇沉（60%～80%～90%）不但除杂效果好，

且减少了杂质对药液的包裹， 效果明显优于一次醇沉.对杜仲叶中氯原

酸提取物的分离，我们尝试了铅沉、脱铅脱色工艺，但损失较大，分

别为 8.4%，9.3%.根据氯原酸的结构特点及杂质性质，拟采用离子交

换树脂和吸附树脂对水提醇沉后的滤液进一步分离，以期得到纯度较

高的氯原酸提取物.

参考文献:

［1］WuH，LiWH，WuDC，LiuW，LiDW.Determinativeway'

scomparisonofchlorogenicacidfromtheleafofEucommiaul-moidesOl

iv J］ ［ .Di-siJunyiDaxueXuebao JFourthMilMedUniv） preprinting.
（ ，

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