NY∕T 2891-2016 禾本科草种子生产技术规程 老芒麦和披碱草(农业).pdf

ICS 65.100.30 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/ T 2890一2016稻米中-氨基丁酸的测定高效液相色谱法Determination of -aminobutyric acid in rice一HPLC 2016-05-23发布2016-10-01实施中华人民共和国农业部发布目。吕本标准按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。NY/T 2890-2016 本标准起草单位:云南省农业科学院且画面矗由单且l技术研究所、农业部农产品质量监督检验测试中心(昆明)。本标准主要起草人:I 范围稻米中-氨基丁酸的测定高效液相色谱法本标准规定了稻米中-氨基丁酸含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于稻米中-氨基丁酸含量的测定。本方法检出限为0.10mg/峙，定量限为0.20mg/kg。2 规范性引用文件NY/ T 2890-2016 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理试样经乙醇一水溶液提取，经4-二甲基胶基偶氮苯-4-磺酌氯(DABS-Cl)衍生，用高效液相色谱法测定，以保留时间定性，外标法定量。4 试剂与材料除非另有规定，使用试剂均为分析纯。水为GB/T6682中规定的一级水。4. 1 元水乙醇(H50H):优级纯。4. 2 乙睛(CH3CN):色谱纯。4. 3 提取榕液:无水乙醇十水=4十lCV+V)，取400mL无水乙醇和100mL7.K混匀。4. 4 碳酸氢铀榕液:称取0.40g碳酸氢铀，用水、溶解并稀释至10mL，现配现用。4.5 4-二甲基胶基偶氮苯-4-磺酷氯溶液:称取4-二甲基胶基偶氮苯-4-磺酌氯20.0mg，用乙睛溶解并稀释至10mL，现配现用。4. 6 三水合乙酸纳溶液:称取3.40g三水合乙酸铀，用水溶解并稀释至500mL，经微孔滤膜(4.10)过滤。4. 7 氨基丁酸(-aminobutyric acid, GABA): CAS号56-12 -2.纯度二三99.9%。4. 8标准储备榕液:精确称取-氨基丁酸标准品10.0mg，用乙睛榕液榕解并定容至10mL.即为1000 mg/L的标准储备液，于一180C下，贮存于密闭的棕色玻璃瓶中，保存有效期为3个月。4. 9 标准使用液:在使用中将标准储备溶液逐级稀释成2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、50.0mg/ L 和100.0mg/L或其他浓度的-氨基丁酸标准使用液，现配现用。4. 10 洁、膜:0.45m，7.K相滤膜。5 仪器与设备5. 1 高效液相色谱仪带紫外检测器或二极管阵列检测器。5. 2 组织捣碎机:转速1000r/min。5. 3 分析天平:感量为0.01mg.O. 01 g。5. 4 振荡水浴锅。NY/ T 2890-2016 5. 5 超声波清洗器。5. 6 旋涡混匀器。5. 7 离心机:最大转速10000r/ mino 6 分析步骤6. 1 试样制备样品经混匀后，缩分至约50g，经研磨至全部通过孔径0.25mm(60目)筛的试样.混匀，装入密闭容器中，室温下保存。6. 2 提取称取1.0g样品于50mL上振荡2min，静置5mm, 10mL提取榕液(4.3) 6. 3 衍生化准确吸取1mL 0.40 mL 4-二甲孔滤膜(4.10) 6. 4 测定6.4. 1 色谱参色谱柱:检测波长:柱温:30oC进样量:10流动相:乙流速:1. 0 6. 4. 2 色谱分分别将标准峰面积比较定量。7 结果计算试样中-氨基丁式中:一一试样中氨基丁酸含量，单位为军儿/.-:】51且gJ; 样液中-氨基丁酸测定质量浓度，单位为毫克每升(mg/L); V二二定容体积，单位为毫升(mL); m一-i式样质量，单位为克(g);测定结果取两次测定的算术平均值，计算结果保留三位有效数字。8 精密度30min后，在旋涡混匀器瓶中，样品残渣再用，待衍生化。(1) 在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。在再现性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。2 NY/T 2890-2016 附录A(资料性附录)-氨基丁酸标准溶液色谱图10 mg/Ly-氨基丁酸标准、溶液色谱图见图A.1。民0.030 0.025 0.020 运0.015国4是主室。010句通R0.005 0.000 -0.005 0.00 2.00 -氨基丁酸4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 aJ间(min)图.1 10 mg/L-氨基丁酸标准溶液色谱图3