药物分析.doc

药品：是指用于预防，治疗，诊断人的疾病，有目的的调节人的生理功能并规定有适应证和用法用量的物质，是一种关系人民生命健康的特殊商品。
中华人民共和国药典：简称为中国药典，其内容分为凡例，正文，附录和索引四部分。
凡例：是解释和使用《中国药典》正确进行质量检定的基本原则，并把正文品种，附录及质量检定有关的共性问题加以规定。
正文：为所收载药品或制剂的质量标准。正文每一品种项下按顺序可以分别列有：1，品名（包括中文名，汉语拼音与英文名）；2，有机药物的结构式；3，分子式和分子量；4,来源或有机药物的化学名称；5，含量或效价规定,；6，制法；7，性状；8，鉴别；9，检查；10.含量或效价测定；11，类别；12，规格；13，贮藏；14，制剂等。
附录：药典附录包括制剂通则，通用检测方法和指导原则，按分类编码。
常用的外国药典为：1，美国药典（缩写为USP）与美国国家处方集（NF）；2，英国药典（BP）；3，日本药局方（JP）4，欧洲药典（Ph.Eur.）。
药品检验工作的基本程序：1，分析药品的取样：取样时应遵循均匀，合理的原则；2，药物的鉴别；3，药物的检查；4，药物的含量测定；5，检验报告书的书写：实验数据必须真实，不得涂改。
药品质量管理规范：1《药品非临床研究质量管理规范》即GLP；2《药品临床研究质量管理规范》即GCP；3《药品生产质量管理规范》 即GMP；4，《药品经营质量管理规范》即GSP。
准确度：指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般以回收率（%）表示。
精密度：指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。常用偏差，标准偏差或相对偏差来表示。
重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度。
检测限（LOD）：是指试样中被测物能被检测出的最低量。
定量限（LOQ）：是指样品中被测物能被定量检测的最低量。与检测限相对定量限的测定结果应具有一定准确度和精密度。
线性：是指在一定的浓度范围内，测试结果与试样中被测物浓度呈正比关系的程度。
线性范围：指能达到一定地精密度，准确度和线性的前提下，测试方法所适用的高，低限浓度或量的区间。
耐用性：系指在测定条件有小的变动时，分析相同样品所测得试验结果的重现程度，目的是为常规检验提供依据。
药物的杂质：是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。
杂质的来源为：1，药物生产过程中引入的；2，药物贮藏过程产生的。
药物生产过程中引入的药物杂质包括：1，未反应完全的原料；2，反应的中间体和副产物；3，植物原料中难分离完全的药物；4，不能完全除去的试剂，溶剂。
贮藏过程中引入的杂质为：由于贮藏过程中因外界条件如温度，湿度，日光，空气或微生物的影响下发生的水解，氧化，分解，异构化，晶型转变，聚合，潮解和发霉变化。
杂质按来源可以分为：一般杂质和特殊杂质。
一般杂质：是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中异引入的杂质。
特殊杂质：是指在特定药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。
杂质还可以分为：按结构分为无机杂质和有机杂质；按性质分为信号杂质和有害杂质。
限量检查的方法包括:对照法，灵敏度法，含量测定法；比较法。
对照法：应该注意平行原则，即供试品和对照品应在完全相同的条件下反应，所加入的试剂，反应是温度，放置的时间等均应相同。
灵敏度法：是指在供试品溶液中加入试剂，在一定的反应条件下，不得有正反应出现，来判断供试品中所含杂质是否符合限量规定。即以检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量。
含量测定法：是指取供试品一定量，以一指定的方法测定杂质中与含量相关的物理量，与规定的限量相比较的方法，它可以准确的测定杂质的含量，不需要对照品。
比较法:是指取供试品一定量依法检查测得待检查杂质的吸收度或旋光度与规定的限量比较不得更大。
一般杂质包括：酸，碱，水分，氯化物，硫酸盐，铁盐，重金属，砷盐，铵盐等。
一般杂质的检查规则：1,仪器平行原则：⑴仪器的配对原则；⑵供试品和对照品同步操作：①放入试剂的先后顺序；②放置时间，加完试剂后放置的时间；③置于相同（黑白）背景，观察方向；2，正确的取样及供试品的称量范围≦1g，不超过±2%，﹥1g不超过±1%；3，正确的比色比浊方法；4，检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试量和对照管各复查两份。
一般杂质检查应注意：1，酸碱度；2，一定剂量的供试品液；3，最佳T；4，时间；5，加入试剂的顺序；6，振摇：快，慢，时间；7，排除干扰因素（先进行）。
氯化物的检查：
原理：药物中微量的氯离子在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液。
注意事项及讨论：1，药典中标准氯化钠溶液每1ml相当于1ug的氯离子；2，宜在硝酸酸性溶液中进行，可以避免一些弱酸银盐的沉淀干扰检查，还可以加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊；3，避免单质银的析出，在观察前在暗处放置5min，比较时放在黑色背景上，从上向下观察，比较；4，供试品若不澄清，用含硝酸的水洗净滤纸中的氯化物后滤过；5，供试品若带颜色应用内消色法处理；,6，检查碘化物和溴化物中的氯化物时，应该先采取措施排除干扰，在依法检查；7，不溶于水的有机药物，应加水振摇，使所含氯化物溶解后，滤去不溶物，取滤液加以检查；8，检查有机氯杂质，将有机氯转变为离子状态，在依法检查。
硫酸盐检查法：
原理：药物中微量的硫酸盐在盐酸酸性介质中与氯化钡反应，生成硫酸钡浑浊。
注意事项及讨论：1，药典中标准硫酸钾每1ml相当于0.1mg的硫酸根；2，加入盐酸可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀的生成；3，供试品加入盐酸后若不澄清，可用含盐酸的水洗净滤纸中的硫酸后滤过；4，供试品如有颜色，可采用内消色法处理；5中国药典采用25%氯化钡溶液，呈现的混浊度较稳定，使用时不必新配。
铁盐检查法：存在的铁盐可加速药物的氧化和降解，因此需控制其含量。
㈠，硫氰酸盐法：
原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子。
注意事项及讨论：配制时加入硫酸防止铁盐水解，易于保存；2，标准铁溶液每1ml相当于10ug的三价铁离子；3，加入盐酸可防止铁离子的水解，并避免弱酸盐的干扰；4，加入氧化剂过硫酸铵既可氧化供试品中二价铁离子为三价铁离子，又防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色，若某些应加入硝酸时应加入煮沸除去氧化氮；5，若供试品与对照品管的色调不一致，可用有机试剂提取后，分取醇层比色；6，某些有机药物，需经炽灼破坏，使铁盐转变成三氧化二铁留于残渣中，处理后在依法检查。
重金属检查：其存在影响药物的稳定性和安全性。
重金属：是指在实验条件下能与硫代乙酰胺作用显色的金属物质。
重金属检查是为什么以铅为代表：1，在药品生产过程中遇到铅的机会较多；2，铅在体内易积累中毒。
重金属检查的四种方法及其应用：1，硫代乙酰胺法：适用于溶于水，稀酸和乙醇的药物；2，适用于检查含芳环，杂环以及在水，稀酸以及乙醇中难溶的有机药物，其在炽灼时应控制温度在500-600；3，适用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物，因硫化钠对玻璃具有腐蚀作用，应该临用新制；4，又称微孔滤膜法，适用于含2-5ug重金属及有色供试液的检查。
原理：硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物均匀混合液。
注意事项及讨论：1，标准铅溶液为每1ml相当于10ug的铅离子；2，当PH为3.0-3.5时，硫化铅沉淀较完全；3，配制标准铅溶液时应加入硝酸防止铅盐水解，使贮备液易于保存；4，供试液有色时，可采用外消色法消除干扰，若含有少量的高铁盐存在是，应先加抗坏血酸使三价铁离子还原成二价铁离子，在依法检查；5，药物本身也能生成不溶性硫化物，干扰重金属检查时，应做特殊处理。
砷盐的检查法：常用古蔡法检查。
古蔡法的原理为：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量的砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑。
注意事项及讨论：1，标准三氧化二砷贮备液每1ml相当于1ug的As；2，氢气发生速度过快或过缓均影响砷化氢的逸出速度，以致影响砷斑的色泽和清晰程度受影响，且使用的锌粒应无砷；3，反应液中加入碘化钾及氯化亚锡将五价砷还原为三价砷，可加快反应速度；4，为什么在导气管中加入醋酸铅棉花：锌粒及供试品中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中能产生硫化氢气体，与溴化汞作用生成硫化汞的色斑，干扰实验结果；5，因砷斑不稳定，故反应中应保持干燥及避光，比应立即与标准砷斑比较；6，供试品若为硫化物，亚硫酸盐，硫代硫酸盐，应先加硝酸处理；7，多数环状结构的有机药物，应先进行有机破坏（用酸或碱），否则检测结果偏低或难以检出。
溶液颜色检查法：是控制药品在生产过程或贮藏过程产生有色杂质限量的方法。
观察方式的选择原则：1，溶液色泽较浅时，于白色背景上自上而下透视；2，溶液色泽较深时，于白色背景前平视观察；无论如何观察，操作时均应遵循平行原则。
干燥失重测定法：常用为常压恒温干燥法；干燥剂干燥法：硅胶：使用方便，价廉，无腐蚀性；五氧化二磷：价格昂贵，不能反复使用，弃用后应埋于土中，但其吸水速率，吸水容量和吸水速度均较好。
常压恒温干燥时应注意：1，干燥温度一般为105℃；2，供试品应平铺于扁形称量瓶中，其厚度不超过5mm；3，干燥时应取下瓶盖，取出时应将瓶盖盖好，置干燥器中放冷至室温，然后称定重量；4，药物含较多结晶水时可提高干燥温度；5，供试品易融化时，应先低温干燥，使大部分水除去后在于规定温度烘干；5，为膏状物时，在干燥过程中应数次搅拌。
应用热分析法检查药物纯度时应注意的前提：1，杂质量要小；2，杂质与药物能形成低共熔混合物，并能溶解于熔化的药物中；3，供试品无固体溶液形成。
特殊杂质的检查方法：
利用物理性质差异检查方法为：1，药物中存在具有特殊气味的杂质；2，挥发性药物中所含不挥发性杂质的检查；3，药物本身无色，生产过程中引入有色杂质，或其分解产物有颜色；4，利用药物和其杂质溶解行为的差异。
利用化学性质差异检查方法为：1，利用药物与杂质在酸碱性上的差异；2，利用药物与杂质氧化还原性的差异；3，利用药物中存在的杂质能与一定试剂发生沉淀反应的性质；4，利用药物中杂质与一定试剂发生显色反应的性质；5，利用药物中杂质与一定试剂产生气体的特性。
利用光学性质差异检查方法为：1，利用药物与杂质的光学活性不同，通过测定药物比旋度的数值检查杂质；2，利用药物和杂质对光吸收性质的差异；3，红外分光光度法主要用于药物中无效或低效晶型的检查。
不经有机破坏的分析方法：1，直接测定法；2，经水解后测定法：(1)用碱水解后测定，（2）用酸水解后测定；3，经氧化还原后测定。
经有机破坏的分析方法：（一）湿法破坏：1，硝酸-高氯酸法：破坏能力强，反应比较剧烈，适用于血，尿，组织等生物样品的测定；2。，硝酸-硫酸法：其分解无机金属离子均为高价态，适用于大多数有机物质的破坏，不适用含碱土金属有机药物的破坏；3，硫酸-硫酸盐法：常用于含砷或锑有机药物的破坏，使用时可加适量淀粉，有利于金属离子全部转为低价态；4，其他湿热破坏法。（二）干法破坏：应注意1，加热或灼烧时，应控制温度在420℃以下；2，灰化要完全；3，干法破坏后，灰分不宜溶解，切勿弃去。（三）氧瓶燃烧法。
硫酸-硫酸盐法加入硫酸盐的目的目的是什么：1，为提高硫酸的沸点，以使样品破坏完全；2，可以防止硫酸在加热过程中过早地分解为三氧化硫而损失。
临床用的苯巴比妥类药物多为巴比妥酸的5,5-二取代衍生物。
巴比妥类药物分为为母核巴比妥酸环状和取代基，一部分其母核决定巴比妥类药物的基本性质，母核环状结构中因含有1,3-二酰亚胺基团而使其具有弱酸性且能发生水解反应；而另一部分取代基则决定了不同巴比妥药物的理化性质，可以用于巴比妥类药物的鉴别和含量测定。
巴比妥类药物的性质：1，弱酸性；2，水解反应；3，与重金属离子反应：（1），与银盐反应先生成可溶性的一银盐，加入过量的硝酸银后生成不溶性的二银盐；（2）,含硫元素的巴比妥类药物与铜盐反应生成绿色沉淀，而其他的巴比妥类药物生成紫色沉淀，可用于区别含硫巴比妥类药物；（3），与钴盐反应生成紫堇色配位化合物，用于本类药物的鉴别和含量测定；(4)，与汞盐的反应生成可溶于氨试液的白色汞盐沉淀；4，巴比妥类药物中的丙二酰脲基团发生缩合反应生成棕红色产物，用于鉴别戊巴比妥；5，因巴比妥类药物在碱性溶液中能电离为具有共轭体系的结构，根据吸收波长的不同鉴别硫代巴比妥。
巴比妥类药物特殊取代基或元素的鉴别反应：1，芳香环取代基与硫酸-亚硝酸钠反应生成橙黄色产物，用于区别含芳香环巴比妥与其他的巴比妥类药物；2，苯巴比妥与甲醛-硫酸反应生成玫瑰红色产物，用于鉴别苯巴比妥与其他巴比妥类药物；3，司可巴比妥因5位上具有不饱和烃基取代可与碘，溴或高锰酸钾发生加成或氧化反应而使其褪色，用于鉴别司可巴比妥和其他巴比妥类药物；4，硫代巴比妥中的硫元素可转变为无机硫离子，而显硫化物反应，用于区别硫代巴比妥与其他巴比妥类药物。
芳酸类药物分子结构特点：既具有苯环 ，又具有羧基。
芳酸类药物的主要性质：1，水杨酸和阿司匹林的结构中具有游离的羧基，显酸性；2，水杨酸和对氨基水杨酸钠具有酚羟基可与三氯化铁作用显色；3，阿司匹林和贝诺酯具有酯键，碱性条件下易水解；4，对氨基水杨酸钠在酸性溶液中与亚硝酸钠发生重氮化反应产生橙红色沉淀；5，紫外和红外吸收性质。
苯甲酸类药物的的性质：1，苯甲酸盐的中性溶液，与三氯化铁试剂反应生成赭色沉淀可用于鉴别；2，有紫外和红外特征吸收光谱；3，苯甲酸，丙磺舒和甲芬那酸均具有游离羧基，可用氢氧化钠直接滴定。
阿司匹林杂质来源:1,为反应完全的原料，中间体及副产物；2，贮藏过程中水解产物。
检查方法为：1，溶液澄清度；2，游离水杨酸；3，易炭化物。
对氨基水杨酸钠的来源：1，为反应完全的氨基酸；2，贮藏过程中氧化，水解生成二苯醌型化合物。
芳胺类类药物按结构可以分为：1，对氨基苯甲酸酯类药物；2，酰胺类药物。
对氨基苯甲酸脂类的代表药物为：苯佐卡因，盐酸普鲁卡因，盐酸丁卡因。
酰胺基类药物的代表药为：对乙酰氨基酚，盐酸利多卡因，盐酸布比卡因。
鉴别试验：1，重氮化-偶合反应：可用于将盐酸丁卡因和其他具有芳伯氨基的同类分开；2
因为盐酸普鲁卡因发生水解反应后产物为白色而苯佐卡因为黄色，并发生碘仿的臭气，可以用于鉴别这两个药物；3，对乙酰氨基酚可以与三氯化铁反应显紫色，用于鉴别；4，，盐酸利多卡因与铜离子反应时加的氯仿层显黄色，与钴离子反应生成亮绿色小钴盐沉淀，与汞反应显黄色，而对乙酰氨基酚则为红色或橙黄色，用于与之区别。
苯乙胺类药物有名肾上腺素受体激动药，具有苯乙胺的基本结构。
鉴别试验：1，可与高铁离子反应显紫色或紫红色；2，氧化反应可根据所呈颜色的不同区别去甲肾上腺素，肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素，但PH为6.5时无法区分这三种药物。
磺胺类药物的鉴别试验：1，与铜盐反应可以区别不同的磺胺药物；2，具有芳伯氨基结构发生偶合反应生成橙黄色至猩红色沉淀。
生物碱类的分类：1，苯烃胺类药物；2，莨菪烷类；3，喹啉类；4，异喹啉类；5，吲哚类。
生物碱类药物的特殊鉴别反应：1，双缩脲反应是芳环侧链具有氨基醇结构生物碱药物的特征反应，如盐酸麻黄碱的鉴别，乙醚层显紫红色，水层变成蓝色；2，Vitaili反应是阿托品，东莨菪碱，山莨菪碱等托烷类生物碱的特征反应，遇醇制氢氧化钾即显深紫色；3，绿奎宁反应；4，紫缩脲胺反应是咖啡因，茶碱等黄嘌呤生物碱的特征反应；5，Marquis反应是吗啡，乙基吗啡，可待因结构中含苯环的异喹啉生物碱的特征反应，加甲醛硫酸试液显紫堇色；6，Frohed反应是吗啡生物碱的特征反应，先显紫色，在呈蓝色，最后变为棕绿色；7，功能团反应：（1），利血平与香草醛生成玫瑰红色；（2），利血平与对-二甲氨基甲醛反应，显绿色，加冰醋酸后显红色；8，还原反应可以区分吗啡和磷酸可待因。
抗菌药物：是指对细菌具有抑制和杀灭作用的药物，包括抗生素和合成抗菌药。
抗生素：是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。
抗生素按结构可以分为：1，内酰胺类；2，四环素类；3，大环内酯类；4，氨基糖苷类；5，多烯大环类；6，多肽类；7，苯烃胺类；7，蒽环类。
抗生素的特点:1,化学纯度较低：同系物多，异构体多，降解物多；2，活性组分发生变异；3，稳定性差。
内酰胺类抗生素均均含有一个游离羟基和酰胺侧链，其性质为：1，具有较强的酸性，碱金属盐易溶于水，有机盐易溶于有机溶剂；2，具有旋光性；3，具有紫外吸收特性；4，内酰胺环的不稳定性。
链霉素的鉴别试验：1，麦芽酚反应：可与铁离子反应在微酸性溶液中形成紫红色配位化合物，此反应为链霉素特有反应；2，坂口反应是链霉素水解产物链霉胍的特有反应，反应呈橙红色；3，N-甲基葡萄糖胺反应生成红色缩合物。
四环素类药物的鉴别试验：1，与浓硫酸反应产生不同颜色，以此鉴别各种不同的四环类抗生素；2，氯化物；3，紫外-可见分光光度法；4，高效液相色谱法；5，薄层色谱法。
喹诺酮类药物的鉴别反应：1，与丙二酸反应，有棕色，红色，紫色或蓝色呈现；2，与香草醛反应析出黄色沉淀。
维生素：是维持人体正常代谢功能所必需的一类生物活性物质，大多数人体不能自行合成，需要从食物中摄取，主要用于机体的能量转移和代谢调节。
维生素A:是一种不饱和脂肪酸，其天然产物主要来源于鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油。
维生素A的性质：1，为淡黄色溶液或结晶与油的混合物；2，易溶于有机溶剂中；3，易氧化变质；4，与三氧化锑呈色；5，紫外吸收特性。
维生素C的鉴别试验：1，可以被氧化银氧化为去氢维生素C，同时产生黑色银沉淀；2，2,6-二氯靛酚钠反应：与维生素C作用后被还原成无色的酚亚胺；3，碱性酒石硫酸铜反应：可生成红色氧化铜沉淀；4，糖类反应。