1、 农业与技术 农业科学暗培养时间对汕农幸运女神和汕农福星蝴蝶兰丛生芽增殖率的影响初探王春丹 张秀珊 王健蓉 林天友 苏镇祥 陈桂玲 曾宝珰(汕头市农业科学研究所 广东 汕头)摘 要:为了探索暗培养时间对新品种“汕农幸运女神”和“汕农福星”蝴蝶兰丛生芽继代增殖的影响 设置不同暗培养天数 结果表明 经过 暗培养供试 个品种丛生芽增殖倍数最高 考虑蝴蝶兰组培快繁一般继代周期为 暗培养天数在 范围内 增殖系数已达到 倍的较高水平 所以选择暗培养天数为 较适宜关键词:蝴蝶兰 组织培养 暗培养 丛生芽 增殖率中图分类号:文献标识码:/收稿日期:作者简介:王春丹()女 硕士 助理农艺师 研究方向:园艺植物组
2、织培养及蝴蝶兰等热带兰新品种选育及标准化栽培等 通讯作者曾宝珰()女 本科 高级农艺师 研究方向:园艺植物组织培养及蝴蝶兰、文心兰等热带兰新品种选育标准化栽培种苗推广等研发 蝴蝶兰()别名蝶兰 蝴蝶兰属热带或亚热带的单茎性气生兰 其花形似蝴蝶飞舞 色彩艳丽且颜色多样 有纯色的红、黄、白、绿、紫红、深红、粉红、橙红 也有白花黄心、黄花红心、紫花白边等 花朵的品种不同 花的大小也有差异 大花品种花朵甚至超过 大小接近人的手掌 小花品种有的小于 小巧玲珑 唇瓣的花色及形状变化也是十分丰富 极具观赏价值 有些花种不仅颜色美 花型好 更是带着淡淡的香味 让人喜爱 蝴蝶兰花期可长达数月 植株外型美观 素有
3、“洋兰皇后”之称 与卡特兰、万代兰、石斛兰并称为 大观赏兰 蝴蝶兰常野生于热带高温、多湿的中低海拔山林中 喜高温、多湿、散射光及通风良好的环境 忌闷热及强光 适宜的生长温度白天为 晚间为 温度高于 或低于 时 蝴蝶兰停止生长 昼夜温差最好达到 有利于蝴蝶兰的生长 蝴蝶兰被视为“爱情、纯洁、美丽”的象征 一直以来在花卉市场备受欢迎 每年春节都能看到其身影 颜色美、株形好的蝴蝶兰备受宠爱 走入了千家万户 质量高、品质好的蝴蝶兰更是市场所需求的 这就对蝴蝶兰种苗的大规模生产起到推动作用 提高蝴蝶兰优良品种的繁殖速度 对培育大批量优质种苗意义重大 有利于进一步扩大生产规模 加强和完善蝴蝶兰离体培植技术
4、体系的研究 可更好为其提供有力条件蝴蝶兰种子如灰尘 小而轻 没有胚乳 在自然条件下 种子的萌发率极低 无法利用播种方式有效繁殖 植株也很少发育侧芽 很难采用常规分株方式进行无性繁殖 蝴蝶兰组培选取带休眠芽的幼嫩花梗作为外植体诱导出不定芽 进而产生丛生芽 丛生芽经过增殖可直接成苗 蝴蝶兰丛生芽途径的优点 不仅仅是诱导率高 所用时间短 增殖率高 而且性状稳定 变异率低 可全年生产等 且所繁育的种苗能较好保持亲本的优良性状 能满足蝴蝶兰规模化生产的需求 因此已成为蝴蝶兰种苗生产最有效的手段植物组织培养是以植物生理学为基础发展起来的一项技术 经过各国科学家多年探索 当前几乎所有的植物器官、组织或细胞都
5、能离体培养成功 目前 与蝴蝶兰组织培养技术研究方面相关的文献较多 蝴蝶兰组培技术比较成熟 但不同品种之间的组培条件差异较大 这就要求对于组织培养技术方面研究要更为细化 有关暗培养对增殖率影响的研究少有报道 本文以汕头市农业科学研究所自主选育的蝴蝶兰优良新品种“汕农幸运女神”(粤评花)、“汕农福星”(粤评花)在继代阶段的丛生芽为材料 初步探索暗培养时间对“汕农幸运女神”“汕农福星”蝴蝶兰丛生芽继代增殖的影响 为现有的蝴蝶兰快速繁殖体系添砖加瓦 降低组培成本 为 农业科学 农业与技术 蝴蝶兰相关生产企业提供参考材料与方法 供试材料试验材料为汕头市农业科学研究所自主选育的“汕农幸运女神”“汕农福星”
6、蝴蝶兰经丛生芽途径的继代材料 方法选取芽体生长基本一致的单芽 每瓶接种 个芽培养基为/加 加 加白糖加椰汁加琼脂 将接种后的材料进行暗培养 设 个处理 暗培养天数分别为 (处理)、(处理)、(处理)、(处理)、(处理)、(处理)、(处理)每个处理设置 次重复 每个重复 瓶 共 瓶 在达到暗培养天数后转入培养温度为、光照强度为 的培养室中培养 继代培养周期为 转瓶时记录每瓶芽数 计算每个处理每瓶平均芽数 计算平均增殖系数 增殖系数计算计算公式:增殖系数每瓶平均芽数/每瓶接种芽数 结果与分析“汕农幸运女神”暗培养处理 丛生芽增殖情况注:图片编码 分别对应不同暗培养天数图 暗培养各个处理丛生芽增殖情
7、况 从图 可知 处理 单芽基部长出新的丛生芽新芽叶色浓绿 芽体较粗壮 但新芽数量较少 处理 萌发的新芽呈翠绿色 芽数比处理 明显增加处理 萌发的新芽呈嫩绿色 芽数比其它处理明显增加 光照时间长短不同 各个处理的蝴蝶兰苗颜色也略有差别 其中 处理 经过 的暗培养 新芽的颜色偏白 虽有 光照 颜色尚未恢复为绿色处理 在无光照的条件下 叶片得不到足够的光照不能形成叶绿素 使得新芽生长缓慢 芽体弱小 颜色偏白色 有的新芽更是略透明 但新芽数量最多见图 之前所接的单芽和新生芽形成一簇 紧密相挨图 处理 (暗培养)农业与技术 农业科学“汕农幸运女神”“汕农福星”经过不同暗培养天数后丛生芽的增殖情况表 不同
8、暗培养天数“汕农幸运女神”丛生芽增殖情况处理暗培养天数/光照天数/每瓶接种芽数每瓶平均芽数增殖系数 表 不同暗培养天数“汕农福星”丛生芽增殖情况处理暗培养天数/光照天数/每瓶接种芽数每瓶平均芽数增殖系数 图“汕农幸运女神”和“汕农福星”增殖系数折线图从表、表 可知 随着暗培养天数的增加 个品种的增殖系数随着增大 见图 当材料暗培养至 时 增殖系数最高“汕农幸运女神”增殖系数达到 而“汕农福星”的增殖系数达到 讨论与结论目前 蝴蝶兰组织培养研究大多采用原球茎途径 相比原球茎途径 丛生芽的报道较少 丛生芽的组织培养途径诱导率高 性状稳定 同时所用时间短 节约了时间成本 蝴蝶兰丛生芽的组织培养途径的
9、增殖率高 可达 倍 相比其他 技术难度低 性状稳定 这就避免了变异的产生 对大规模的生产意义重大组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的主要途径 在合理高效利用有限外植体的前提下 提高蝴蝶兰不定芽的增殖率就可以提高蝴蝶兰的繁殖速度 从试验结果来看 通过增加暗培养时间明显提高“汕农幸运女神”“汕农福星”不定芽的增殖率 在单一个继代周期内随着暗培养天数的增加增殖率逐渐提高 见图 经过 暗培养供试 个品种的丛生芽增殖率最高 达到 和 从供试的 个品种试验结果来看暗培养天数在 增殖系数已达到 倍的较高水平 所以选择暗培养天数为 是较合适的 考虑到蝴蝶兰组培苗的继代周期一般为 如果暗培养的天数达到 和 时 新萌发的芽
10、体较为嫩绿 虽然增殖的新芽多 但没有经过光照培养 芽体较小 相对较弱 有的甚至出现玻璃化 在下一次继代转瓶初期又再一次进行暗培养 长时间处于暗培养至第 次继代转瓶时不排除会出现黄化或死芽情况 不利于正常增殖生长 所以 在本试验中不将增殖率较高的暗培养天数 和 列为合适处理方法 在 个继代周期内 适当增加暗培养的天数 明显有利于提高丛生芽增殖率影响蝴蝶兰组织快速繁殖的因素有很多 包括蝴蝶兰品种的不同、基础培养基的选择、外植体不同、消毒方式不同、调节物质及添加量的不同、还有光照条件、温度、湿度等培养条件的不同等 本文为暗培养时间对蝴蝶兰丛生芽增殖影响的初步探索 旨在为蝴蝶兰品种扩繁增殖阶段科学暗培
11、养提供参考 具体应用指导生产还有待进一步深入探索 此次试验仅针对特定品种“汕农幸运女神”“汕农福星”所得出的结论 而不同蝴蝶兰之间存在品种差异 对培养基和培养条件的要求也不同 具体品种的合适暗培养时间有待进一步探索 在设置暗培养时间上 本文以 为间距 如缩短为 间距 进一步观察暗培养时间对蝴蝶兰丛生芽的影响 更有利于准确掌握不同品种的适宜暗培养时间 此次试验仅在单一个继代周期内进行 对其后续多代转瓶情况仍未了解 连续几个继代周期(代以上)进行试验 并观察对其以后生长如促根或移栽阶段的影响 才能科学总结具体品种的暗培养需求 暗培养与褐变的关系 褐变现象是指在组织培养过程中 培养材料向培养基中释放
12、褐色物质 致使培养基逐渐变成褐色 培养材料也慢慢变褐而死亡的现象培养 外植体褐变是植物组织培养中遇到的重要问题 与褐变的相关研究表明 光照强度与褐变程度之间存在一定关系 如 许传俊等通过培养 农业科学 农业与技术 基及光照对蝴蝶兰叶片外植体褐变的影响试验结果表明 光照强度增加 外植体褐变也严重 赵伶俐等研究了不同光照强度培养下 蝴蝶兰初代培养过程中外体内多酚氧化酶()活性、总酚含量以及褐化百分率的变化规律 也表明了光照强度与褐化程度之间的关系 那么 如何通过科学的暗培养减轻褐化程度有待于进一步深入探讨研究 科学总结研究结果暗培养时间与蝴蝶兰丛生芽增殖关系 此次试验仅为初探 受品种、培养基、培养
13、条件等相关条件所限制 未能进一步全面探究 对于暗培养时间对蝴蝶兰丛生芽的影响将有待进一步探索研究 为现有的蝴蝶兰快速繁殖体系添砖加瓦 降低组培成本 以提高经济效益参考文献 尹广远 牛三义 储博彦 等.蝴蝶兰的栽培管理技术.河北林业科技 ():.肖丽红 黄鑫文 陈创国.蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究进展.广东农业科学 ():.刘静 杨丽英.植物组织培养操作规程初探.杂粮作物 ():.陈春 陈孝丑.蝴蝶兰新品种 花梗离体培养技术研究.福建热作科技 ():.顾伟民 曹春英 丁世民 等.蝴蝶兰组织快繁技术的研究.山东林业科技 ():.李春雨 洪丽萍.蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养技术.热带作物学报 ():.王怀宇.蝴蝶兰的快速无性繁殖.园艺学报 ():.刘荣维 梅庆超.丛生芽 蝴蝶兰无性快速繁殖的新途径.热带作物学报 ():.周俊辉 叶超宏 陈旭高.蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究.仲恺农业科技学院学报 ():.王静 娄玉霞 郝再彬 等.大量元素、有机添加物、激素对蝴蝶兰原球茎增殖的影响.上海农业科技 ():.邹金环 赵大勇 刘艳梅 等.蝴蝶兰组织培养快繁技术研究.北方园艺 ():.许传俊 李玲.几种培养基及光照对蝴蝶兰叶片外植体褐变的影响.亚热带植物科学 ():.赵伶俐 葛红 范崇辉 等.不同光照强度对蝴蝶兰组织中外植体褐变的影响.北方园艺 ():.(责任编辑 贾灿)