解密17-发酵工程(分层训练)(原版卷).docx

解密17 发酵工程（分层训练）
A组 基础练
第I卷（选择题）
一、单选题
1．（2022秋·江苏徐州·高三统考期末）某研究小组探究存放不同时间的氨苄青霉素 ( 1 、2、3、4) 对细菌生长、繁殖的抑制能力， 设计完成了抑菌实验， 得到如图所示的实验结果。相关叙述错误的是（    ）

A．配制的培养基需用高压蒸汽灭菌锅灭菌
B．滤纸片 5应该蘸取无菌水作为对照
C．细菌数量、抗生素浓度都会影响抑菌圈的大小
D．1 抗生素的存放时间最长、 2抗生素的存放时间最短
2．（2022·浙江·模拟预测）某同学利用如图所示装置，用葡萄制作酒精含量约为8%的葡萄酒。下列叙述正确的是（    ）

A．用高锰酸钾溶液浸泡葡萄的原因是高锰酸钾能选择性地杀灭细菌，对酵母菌等真菌无影响
B．发酵瓶连接的玻璃管具有调节发酵瓶内压力的作用，装水时需要装满①②两个玻璃泡
C．发酵过程产生的气泡主要是由酵母菌厌氧呼吸产生的引起的
D．发酵自然停止的原因是高浓度酒精造成酵母菌死亡
3．（2023秋·湖北十堰·高三统考期末）黑茶是一种后发酵茶，通常用采摘的鲜茶经过数道工序制成，富含多肽、氨基酸、维生素等营养物质。黑茶刚制成时有酒香气，滑润甘甜。黑茶制成后常用牛皮纸，皮纸等包装材料进行包装储存，保存时间越久的老茶，茶香味越浓厚。下列相关叙述正确的是（    ）
A．发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收
B．黑茶发酵需要在开放装置中进行，有利于微生物的快速繁殖
C．黑茶的制作需利用包括酵母菌在内的多种细菌进行发酵
D．新茶发酵完成后要进行灭菌并密封，有利于茶的长期保存
4．（2022秋·浙江宁波·高三统考阶段练习）黄酒是世界上最古老的酒类之一。源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒。以糯米、黍米、粟为原料。一般酒精含量为14%~20%，酒的品质取决于菌种。下图表示酿制黄酒的一种工艺流程。下列有关叙述正确的是（    ）

A．菌种a能产生淀粉酶，淀粉可作为菌种a的碳源和氮源
B．菌种b在增殖过程中，应保证发酵装置内严格的无氧环境
C．发酵后通过压榨过滤可以提高酒精产量
D．工艺c表示灭菌，目的与“蒸煮”相同
5．（2023秋·北京西城·高三统考期末）目前市场上的果蔬汁发酵产品所利用的菌种主要为乳酸菌，而利用酵母菌、醋酸菌、乳酸菌等多种益生菌混合发酵果蔬汁风味更协调、营养更丰富。相关叙述正确的是（    ）
A．乳酸菌、醋酸菌和酵母菌均属于原核生物
B．果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源和氮源
C．果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染
D．混菌发酵是把所有益生菌混合并在相同条件下发酵
6．（2022秋·安徽·高三校联考阶段练习）下面是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，相关叙述正确的是（    ）
挑选葡萄→冲洗→榨汁→Ⅰ→醋酸发酵→果醋
A．制作葡萄果酒时，先用清水冲洗掉葡萄皮表面的白色杂菌
B．红葡萄酒中的红色是红葡萄皮中的色素进入发酵液形成的
C．Ⅰ过程葡萄汁要装满发酵瓶，醋酸发酵过程需要通入氧气
D．变酸的葡萄果酒表面形成的菌膜可能是乳酸菌繁殖形成的
7．（2022·广东广州·统考一模）下列关于制作果酒以及腌制泡菜的叙述，正确的是（    ）
A．使葡萄糖转化为乙醇所需的各种酶都存在于细胞质基质和线粒体中
B．制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长繁殖
C．腌制泡菜时，每间隔一段时间就应将坛盖打开以放出所产生的CO2
D．腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高的酸是亚硝酸
8．（2022秋·河北唐山·高三校联考阶段练习）《书经》中的“若作酒醴，尔惟曲蘖”提到酿酒必须要用酒曲。酒曲是以谷物为原料，破碎加水压制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物，经水浸泡活化后投入蒸熟的米即可用于酿酒。下列相关说法错误的是（    ）
A．谷物为酒曲中的微生物提供了多种营养物质
B．酿酒过程中，米蒸熟后要冷却后才能加入酒曲
C．酿酒过程中，发酵液中的pH保持稳定不变
D．酒曲中的酵母菌通过无氧呼吸将原料中的糖转化为酒精
9．（2022秋·江苏南京·高三南京师大附中校联考阶段练习）精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图。下列相关叙述错误的是（    ）

A．野生型菌液的培养皿中不会出现菌落
B．乙培养基与甲相比可能缺少了精氨酸
C．紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生可遗传变异
D．乙中的菌落是通过影印法接种获得的，菌落A为鸟氨酸发酵的优良菌种
10．（2022秋·广东·高三校联考阶段练习）桔青霉发酵生产的核酸酶P1广泛应用于食品等行业，对人体无毒害。研究人员选择较佳发酵培养基成分的基础上、在温度为28°C和培养转速为150转/min的条件下进行发酵培养，监测发酵液中的桔青霉代谢变化，包括菌体干重、核酸酶P1酶活、培养液残氮量和pH，结果如下图所示。下列分析错误的是（    ）

A．匀速搅拌发酵液可提高溶氧量和营养物质的利用率，提高发酵效率
B．培养40h后的桔青霉菌体数量达到最大值，种群增长速率最小
C．培养60h后取发酵液过滤与离心，离心上清液可提取到较多的核酸酶P1
D．氮源缺乏、培养液pH降低是发酵后期限制菌体产酶的主要因素
11．（2022秋·广东广州·高三增城中学校联考期中）“纸片扩散法”测定病原菌对抗生素敏感性的实验是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为某测定实验的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列叙述错误的是（　　）

A．图示平板采用的是稀释涂布划线法接种病原菌
B．形成的抑菌圈较大的原因可能是微生物对药物较敏感
C．未出现抑菌圈可能是病原菌与含抗生素的纸片接触后发生抗性变异
D．“纸片扩散法”实验中的自变量是不同种的抗生素
12．（2022秋·湖北·高三武汉二中校联考阶段练习）酵母的蛋白含量高，可用作饲料蛋白，且有些酵母能利用工业废甲醇作为碳源进行繁殖，既可减少污染，又可降低成本。研究人员拟从土壤中分离该类酵母并大量培养，操作流程如下图。下列相关叙述正确的是（    ）（注：25×16型血细胞计数板，表示计数室中有25个中格，每个中格又分成16个小格。）

A．实验前需对玻璃器皿、金属用具和培养基进行干热灭菌
B．只有③过程中使用的培养基需以甲醇作为唯一的碳源
C．为了保证结果准确，对每一个平板的菌落都要进行计数并取平均值
D．将发酵液稀释1000倍后，用25×16 （ 1mm×1mm×0．1mm）型血细胞计数板计数10个中格中的细胞数为60个，则发酵液中每毫升有1．5×10⁹个细胞
13．（2022秋·福建泉州·高三校联考阶段练习）如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的示意图，下列有关叙述错误的是（    ）

A．在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌
B．步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C．步骤④挑取③中不同的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D．步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单菌落
14．（2022·浙江·校联考模拟预测）下列关于斜面培养基的叙述，错误的是（    ）
A．灭菌过的固体培养基注入试管，将试管斜放在台面上凝固后制成
B．常用于菌种的筛选
C．可以用接种环进行划线接种
D．优点是能增大接种面积、厚度增大、营养丰富等
15．（2022秋·河北邯郸·高三邯郸一中校考阶段练习）酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法正确的是（    ）

A．在传统葡萄酒发酵过程中，为避免污染发酵装置需严格灭菌
B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×106个/L，此数值可能低于实际的活菌数
C．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等无需再灼烧灭菌
D．由图Ⅱ可知，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，丁组酵母菌产酒精能力比乙强

二、多选题
16．（2022秋·湖北·高三华中师大一附中校考阶段练习）某研究小组欲采用小型发酵罐（如图）进行果酒的主发酵中试研究。中试是指产品正式投产前的试验，是产品在大规模量产前的较小规模试验。下列相关叙述合理的是（    ）

A．若要在夏季发酵果酒，常需要对罐体进行相应升温处理
B．乙醇为挥发性物质，因此在发酵过程中的空气进气量不宜太大
C．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度，决定何时终止发酵
D．为了缩短发酵时间，确保品质稳定，工业上大规模生产时，通常会先通过微生物培养技术获得单一菌种，再将它们接种到物料中进行发酵
17．（2022秋·江苏淮安·高三校联考期中）酱油起源于我国，至今已有数千年历史。参与酱油酿造过程的微生物主要有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，下图是制作过程的部分流程。相关叙述正确的是（    ）

A．酿造过程中多种酶系可将原料中的蛋白质、脂肪等分解为小分子
B．发酵池中的食盐、料酒、香料、乳酸等均可以抑制杂菌的生长
C．参与酿造过程的米曲霉、酵母菌和乳酸菌具有相同的代谢类型
D．代谢产物积累和酿造环境的变化导致后期窖池微生物数量下降
18．（2022秋·山东临沂·高三校考开学考试）啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（    ）
A．用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶
B．焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌
C．糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵
D．通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期
19．（2022秋·江苏南通·高三校考阶段练习）双层平板法是一种利用底层和上层均为牛肉膏蛋白胨培养基对噬菌体进行检测的常用方法。具体操作如下：先在无菌培养皿中倒入琼脂含量是2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量是1%的培养基融化并冷却至45～48℃，然后加入宿主细菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。培养一段时间后，在上层平板上看见由于噬菌体侵染周围细菌而使宿主细胞裂解死亡形成的空斑即噬菌斑。通常一个噬菌斑来自原液中的一个噬菌体。根据噬菌斑的数目计算原液中噬菌体的数量，如图所示。下列相关叙述正确的是（    ）

A．牛肉膏蛋白胨培养基可作为选择培养基选择出噬菌体的宿主细胞
B．加入混合液后，使用灭菌后的涂布器将混合液均匀地涂布在培养基表面
C．双层平板法中加了底层培养基后弥补了培养皿底面不平的缺陷
D．上层培养基中琼脂浓度较低，因此形成的噬菌斑较大，更有利于计数
20．（2022秋·江苏镇江·高三校联考阶段练习）下列关于微生物的纯培养实验的叙述，错误的是（    ）
A．微生物的培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
B．为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白陈培养基进行灭菌
C．平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线
D．完成平板划线后，应将平板立刻倒置培养以免污染培养基
第II卷（非选择题）
三、综合题
21．（2022秋·北京·高三北大附中校考阶段练习）酿酒酵母大量应用于酿酒、人重组蛋白合成等领域，研究人员通过基因改造制备生产效率高、可适应工业发酵条件的酵母。
(1)酿酒酵母被接种至______________培养基中用于酿酒和人重组蛋白的大量生产。
(2)在酿酒酵母的基因组内插入若干具有特定碱基排列顺序的识别序列。C酶识别该序列并切割识别序列间的DNA分子，从而造成酵母菌基因突变，并从中______________包含有利变异的酵母菌株。
(3)研究人员经上述过程得到A菌株。
①将等量的野生型酵母菌和A菌株接种于等量的培养基中。经过一段时间的有氧发酵后，调整发酵条件至厌氧发酵，该过程需要调整发酵罐中的______________（填写选项前字母）。
a．温度   b．pH   c．溶解氧     d．搅拌速度
②将野生型酵母菌和 A菌株分别接种于发酵条件相同的两个发酵罐中。发酵一段时间后，检测发酵罐中酵母菌的数量（图1）。结果表明，与野生型酵母菌相比，A菌株______________。
③木糖广泛分布于植物中，野生型酵母菌不能有效利用。将两种菌株分别接种在以木糖或葡萄糖为唯一碳源的培养基中，检测两种酵母菌数目，结果如图2所示。综合以上实验结果，在以植物源性营养物质为发酵底物的条件下，发酵后期（图1中阴影所示部分）野生型酵母菌数量显著下降而A菌株能够维持相对稳定的原因是______________。

(4)A菌株是否可用于酿酒的工业化生产？请说明理由________。
22．（2022·河南开封·统考一模）物质m是一种有机物（仅含有C、H两种元素），会污染土壤。m在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲用三种培养基筛选土壤中能高效降解m的细菌（目标菌）。①号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入m（5g/L）；②号培养基；氯化钠（5g/L），硝酸铵（   3g/L），其他无机盐（适量），m（15 g/L）；③号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（   3g/L），其他无机盐（适量），m（45g/L）。
(1)在①号培养基中，为微生物提供氮源的是____________。②③号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_______________。
(2)用①号培养基从土壤悬浮液中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择_________菌落进一步纯化，选择的依据是__________

(3)若将土壤悬浮液接种在②号液体培养基中，培养一段时间后，甲、乙菌的比例会_______________，其原因是_______________。
(4)假设从③号培养基中得到了高效降解m并能转变为丙酮酸的细菌，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_______________。
23．（2022·全国·模拟预测）酿酒酵母菌性能的优劣会影响所酿葡萄酒的口感、风味和产量。筛选优质酿酒酵母菌、提高葡萄酒的质量，是葡萄酒工业发展的重点。回答下列问题：
(1)参与苹果酒发酵的酶主要位于酵母菌细胞的__________中。传统发酵中，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖，这是由于___________________。
(2)葡萄汁装入发酵瓶要留________，这种做法的目的是_____________________（出两点即可）。
(3)实验用的培养皿常用的灭菌方法是___________；为了避免灭菌后器皿被污染，灭菌前应该___________，为了从土壤中筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，目的是___________。
(4)研究发现，经葡萄里面的糖分自然发酵而成的酒精，含量一般在10%~13%为最佳，发酵时的温度和时间会影响果酒发酵产生的酒精的含量。为了找到适合生产的最佳发酵温度和时间。请设计出探究的思路：___________________________。
24．（2022秋·安徽六安·高三校考阶段练习）太湖流域是著名的旅游胜地。近年来，由于周边工农业的迅速发展，氮、磷元素大量输入水体，太湖开始频繁爆发水华，水体富营养化日趋严重。最近科研人员成功地筛选到能高效降解磷元素的细菌（解磷菌）。请分析回答下列问题：
(1)筛选解磷菌的培养基只允许解磷菌生长，从功能上讲，这种培养基称为________培养基，该培养基在接种前应该用________灭菌。
(2)对初步筛选得到的解磷菌进行纯化计数时，常采用的接种方法是________。在接种前，为检测培养基平板灭菌是否合格，通常的做法是______________。
(3)涂布平板时用移液管取0.1 mL菌液用涂布器进行涂布，每个稀释度应涂三个平板，可通过计数培养成的菌落数来推测稀释液中的菌落数。下表为三个稀释度下解磷菌的菌落数，计算湖水中解磷菌的浓度约为________个/mL。实际上每毫升溶液中的活菌数比统计所得的这一数值要大，因为___________。
稀释度
菌落数（个）
平板1
平板2
平板3
10-5
392
418
410
10-6
88
82
100
10-7
11
22
27

(4)若用固定化酶技术固定解磷菌中的酶，和一般酶制剂相比，其优点是________，且利于产物的纯化，固定化解磷菌细胞常用________法固定。
25．（2022秋·吉林长春·高三长春市第六中学校考阶段练习）谷氨酸棒状杆菌是一种好氧菌，它是谷氨酸发酵的常用菌种。细菌内合成的生物素参与细胞膜的合成，不能合成生物素的细菌细胞膜不完整。图为通过发酵工程生产谷氨酸的生产流程，请回答下列问题：

(1)从自然界分离的菌种往往达不到生产要求，从改变微生物遗传特性的角度出发，培育出优良菌种的育种方法主要有___________（至少答出一点）。
(2)扩大培养时所用的培养基，从物理性质来看是___________（填“固体”或“液体”）培养基，从用途来看是___________（填“鉴别”或“选择”）培养基，扩大培养的目的是___________。
(3)对谷氨酸代谢的控制，除了改变微生物的遗传特性外，还需要控制生产过程中的发酵条件，比如_________（至少答出两点）。
(4)谷氨酸棒状杆菌在合成谷氨酸的过程中，当细胞中谷氨酸积累过多时会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，从而降低谷氨酸的合成，这是一种___________调节机制。在生产上一般选用___________缺陷型菌作为菌种可以解除谷氨酸合成过量对谷氨酸脱氢酶活性的抑制，从而大量生产谷氨酸。

解密17 发酵工程（分层训练）
B组 提高练
第I卷（选择题）
一、单选题
1．（2022秋·江苏南通·高三海门中学校考期中）传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他结合“甘一日”和“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，下列有关叙述正确的是（    ）
A．酿酒过程中发酵液出现的气体都是在酵母菌细胞的细胞质基质中产生的
B．酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，由pH上升和酒精含量增多导致
C．墨塔酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的，若适当升温则醋味更浓
D．统计活酵母菌数量时，可用显微镜直接计数法，统计的结果比实际数目低
2．（2022·浙江·模拟预测）下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（    ）
A．制作葡萄酒的过程中，将葡萄浆放入发酵瓶中时，应尽可能装满
B．制作果酒的过程中，添加适量蔗糖可获得酒精含量和甜度均较高的果酒
C．制作果醋的过程中，发挥作用的优势菌种是醋酸菌
D．泡菜腌制过程中，可加入已腌制过的泡菜汁来加快发酵进程
3．（2022秋·安徽安庆·高三校考阶段练习）苹果醋是以苹果为原料经甲、乙两个阶段发酵而成的，下列说法错误的是（　　）

A．甲阶段的发酵温度低于乙阶段的发酵温度
B．根据醋酸菌的呼吸作用类型，乙过程需要在无氧条件下完成
C．过程①②在酵母菌细胞的细胞质基质进行，③在线粒体进行
D．甲乙两阶段完成后溶液pH均降低
4．（2022秋·江苏苏州·高三统考期中）在《诗经·邶风·谷风》中有“我有旨蓄，亦以御冬”的记载“旨蓄”就是储藏的美味食品， 也就是今天腌制的酸菜、泡菜。下列叙述正确的是（    ）
A．制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖
B．条件适宜时蔬菜中的糖转化成醋酸降低溶液pH
C．发酵坛表面可能出现一层由乳酸菌繁殖形成的白膜
D．通过向泡菜坛沿边水槽注水可保持发酵所需的环境
5．（2022秋·北京大兴·高三统考期末）下图为研究者从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述不正确的是（       ）

A．配制步骤②、③的培养基都需要严格灭菌
B．步骤③采用涂布平板法接种，需要在完全培养基中加入尿素
C．步骤③的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落
D．步骤④挑取③中不同的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
6．（2022·浙江·校联考模拟预测）下列关于斜面培养基的叙述，错误的是（    ）
A．灭菌过的固体培养基注入试管，将试管斜放在台面上凝固后制成
B．常用于菌种的筛选
C．可以用接种环进行划线接种
D．优点是能增大接种面积、厚度增大、营养丰富等
7．（2022秋·浙江·高三校联考期中）图中的已驯化菌群是从某肉制品加工厂污水处理池中初步筛选的可水解油脂并利用的菌群，为进一步筛选高效水解油脂的菌群进行了如图所示的操作。下列相关叙述正确的是（    ）

A．培养基中除了油脂提供的成分还需加入氮源和碳源
B．随着培养基中油脂浓度变大导致菌群朝着高效水解油脂的变异方向发展
C．在菌种分解油脂的过程中培养基的pH会呈现先下降再上升的变化趋势
D．若要研究优秀菌的生长规律，可在液体培养的不同时间段采用稀释涂布平板法短时间内测定其数量
8．（2022秋·安徽·高三阶段练习）在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践中，要规范地进行无菌操作。下列与无菌操作相关的说法，正确的是（　　）
A．为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌
B．将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释
C．将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作
D．待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数
9．（2022秋·江苏南通·高三济南市历城第二中学统考阶段练习）药物敏感试验旨在了解某病原微生物对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。纸片扩散法是试验的常用方法，在纸片周围会形成透明的抑菌圈。下列叙述正确的是（    ）

A．抑菌圈越大，说明该病原微生物对该种抗生素敏感性越差
B．图1中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落可能是该病原微生物发生了基因突变
C．进行药敏试验，需使用接种环将平板上布满测试菌
D．接种后的平板在培养时的放置应如图2中②所示，可以防止污染
10．（2022·浙江·模拟预测）刚果红能与纤维素形成红色复合物，但对纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖无作用。某同学利用刚果红配制选择培养基，分离土壤中能水解纤维素的微生物并观察菌落数。下列叙述正确的是（    ）
A．划线接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数高
B．选择培养基中应以刚果红作为唯一碳源，并加入琼脂糖作凝固剂
C．培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从电源插上开始计时
D．可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选目的菌
11．（2022·浙江·模拟预测）稀释涂布平板法和平板划线法是分离和纯化微生物的两种重要方法，关于二者的比较，下列说法错误的是（    ）
A．稀释涂布平板法易形成单菌落并可对微生物进行计数
B．利用稀释涂布平板法进行统计数据时应选择相同稀释度下的培养基
C．平板划线中用蘸有菌液的接种环划一条线后，再次蘸取菌液继续划线
D．二者接种菌液时分别需要用到的工具是涂布器和接种环
12．（2023秋·湖北十堰·高三统考期末）多氟烷基物质（PFAS）是添加在可以长时间不脱落的液体唇膏和粉底，以及防水睫毛膏中的化学物质，PFAS极难被分解。研究人员利用图示方法成功筛选到能高效降解PFAS的细菌（目的菌），下列关于该方法的叙述，错误的是（    ）

A．培养基要加入的物质还应该有PFAS，其属于选择培养基
B．配制好的培养基可采用高压蒸汽灭菌法灭菌
C．多次筛选后，含有目的菌的培养瓶中PFAS的含量高
D．重复多次的目的是纯化高效降解PFAS的细菌
13．（2023·浙江·统考一模）2022年由于环境的污染导致化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某莫比阳科学家通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。下列说法错误的是（    ）
碳源
细胞干重（g/L）
S产量（g/L）
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0.00
制糖废液
2.30
0.18

A．通常在实验室培养微生物时，需要对所用的玻璃器皿进行灭菌通常有三种方法
B．由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是制糖废液
C．由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是缺少淀粉酶
D．利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是减少污染、节省原料、降低生产成本
14．（2022秋·浙江湖州·高三安吉县高级中学校考阶段练习）如图为谷氨酸发酵过程中谷氨酸棒杆菌进行的生化代谢途径，下列叙述错误的是（　　）

A．发酵过程中需及时分离谷氨酸以提高谷氨酸产量
B．发酵过程需要严格控制发酵罐的温度、pH、溶解氧等条件
C．可以通过X射线照射的手段定向获得高产的谷氨酸棒杆菌
D．发酵生产过程中，要尽可能减少菌种的传代次数
15．（2022·湖北武汉·高三武汉市第一中学校考阶段练习）三华李中含有丰富的矿质元素和维生素，有机酸含量和种类丰富。某同学按照“三华李果实→清洗破碎→酶解→过滤→硫处理→成分调整→接种→主发酵→倒灌过滤→后发酵→陈酿→澄清→配兑→灌装→杀菌→成品”的流程研究三华李果酒酿造工艺。下列叙述错误的是（　　）
A．在酶解环节，需要向果浆中添加果胶酶和纤维素酶并控制酶解温度
B．在成分调整环节，按比例添加蔗糖可以提高果酒的酒精含量
C．主发酵时进行密闭，后发酵时需要通气，应保持前后温度在28℃左右
D．可通过研究发酵时间、接种量、初始糖度等因素优化三华李果酒的发酵工艺

二、多选题
16．（2022秋·山东临沂·高三统考开学考试）北京冬奥会食堂让各国运动健儿爱上中国味道，其餐余垃圾在垃圾集中点采用“生化+雾化+膜过滤”技术处理后，可以达到无二次污染的标准。为筛选对抗生素有抗性，高效降解淀粉的微生物，提高生化处理效率，研究人员将餐余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备餐余垃圾浸出液，然后进行如图所示的操作。下列说法正确的是（    ）

A．用平板划线法将稀释的餐余垃圾浸出液接种在X培养基上
B．餐余垃圾浸出液在接种前需要添加淀粉、抗生素和进行高压蒸汽灭菌
C．X培养基是含有琼脂的固体选择培养基，Y是不含琼脂的液体培养基
D．图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征判断微生物类型
17．（2022秋·江苏南京·高三统考阶段练习）为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（　　）

A．检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌
B．完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察
C．为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测
D．可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量
18．（2022秋·江苏宿迁·高三校考阶段练习）丙草胺（）是一种广泛应用的除草剂。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数，如下图所示，以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述正确的是（    ）

A．实验过程中应避免已灭菌处理的土壤与周围物品接触
B．以丙草胺为唯一氮源配置的培养基属于选择培养基
C．依据实验结果计算出每克土壤中的菌株数约为1.5×1010个
D．利用稀释涂布平板法得到的结果往往比实际活菌数要低
19．（2022·辽宁·统考高考真题）β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是（    ）
A．所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌
B．通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌
C．还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力
D．该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发
20．（2021·山东·校联考模拟预测）高浓度的铵盐对海水养殖中的对虾有一定的毒害作用，是制约其大规模养殖的环境因素之一，具有高降解能力的硝化细菌可有效净化水体中铵盐，降低对虾的死亡率，科研人员拟从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，操作流程如下图1。将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入铵盐浓度为40mg·L﹣1的模拟养殖污水中，在适宜条件下培养一段时间后，结果如图2。下列叙述错误的是（    ）

A．纯化菌种时，只能采用图1中所示的接种方法接种，接种环需要灼烧6次
B．已知硝化细菌是好氧性细菌，扩大培养时需要振荡的目的是增加硝化细菌与营养物质、溶解氧的充分接触
C．据图2分析，应选择候选菌甲作为菌种进行后续培养
D．为了筛选出硝化细菌，在配制选择培养基时，需要以铵盐为唯一氮源
第II卷（非选择题）
三、综合题
21．（2022秋·江西·高三校联考阶段练习）回答下列有关微生物的相关知识：
(1)很多胃病患者是由于感染了幽门螺旋杆菌（Hp），医务工作者在胃病患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有_____，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_____色环带。
(2)某同学采用稀释涂布平板法对高效分解苯酚的菌株进行计数，在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为103的稀释液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的菌落数分别为：108、114、117、11和120，因此可得出10mL初始菌液中的活菌数为_____个。
(3)梨采摘后在常温下容易腐烂，分离主要致腐菌可采用稀释涂布平板法或_____。
(4)酒精发酵通常利用含葡萄糖、淀粉或纤维素等的农林产品为原料，在进行酒精发酵时，纤维素酶的添加可以提高___含量，并使酒的品质有所提升；酿制果酒过程中，常因封口不严，导致酒中带有明显的酸味，使果酒变酸的微生物主要是_____。
22．（2022秋·全国·高三开学考试）土壤中的磷大部分以难被植物吸收利用的无效态（如磷酸钙等难溶态，在水中呈白色沉淀）存在，溶磷菌能够把无效态的磷转化为可被直接利用的可溶性磷。
(1)磷是植物生长发育的必需元素，可组成______等化合物。（填出2种即可）
(2)从土壤中筛选溶磷菌的一般步骤如下：
溶磷菌的分离：依次配备浓度为10-3、10-4、10-5的土壤稀释液，分别取0.1mL均匀涂布于含难溶磷的固体培养基上培养2d。待菌落长出后挑取______的菌落，于基础培养基上采用______法进行多次纯化。溶磷菌的筛选：将分高获得的溶磷菌分别配制成菌悬液，接入已灭菌的含难溶磷液体培养基中做实验组，则对照组的培养基加入______，5d后测定培养液中可溶性磷含量。若接菌培养液可溶性磷含量为a，对照组可溶性磷含量为b，则菌株溶磷量为______。选择溶磷量最大的菌种为目的菌。
(3)将适量目的菌接入己灭菌的含难溶磷的液体培养基中培养，每天取样测定溶磷量和pH变化情况，结果见下图。

①结果表明目的菌分解难溶磷的能力呈现______的趋势。
②根据培养液的pH变化情况，可对目的菌的解磷原理作出的推测是________________________。
(4)请预期该溶磷菌在农业生产方面可能的应用________________________。
23．（2022·四川雅安·统考模拟预测）莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一，在土壤中不易被降解。为修复被莠去津污染的土壤，研究人员按下面程序筛选能降解莠去津的细菌（莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明）。回答下列问题：

(1)为选取能降解莠去津的细菌，应从______的土壤中选取样品，然后加入______（填“清水”、“生理盐水”或“无菌水”）制备成土壤浸出液。
(2)本实验中在固体培养基接种菌种的方法是______，接种后的培养皿应该倒置后置于恒温培养箱中培养一段时间后，观察______（答出两点）等菌落特征。
(3)实验测得A~C瓶中三类细菌的密度如下图所示：

由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是______。实验结果显示，甲类细菌密度迅速降低，可能原因是______。
(4)从图示固体培养基上的菌落中，就能筛选出目的菌，原理是______。
24．（2022·重庆·高三重庆巴蜀中学校考阶段练习）发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图所示。回答相关问题：

(1)对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了_______________法，其可以用来计数的原理为_______________。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至_______________性。
(2)接种之前的过程①、②都属于_______________。整个发酵过程的中心环节是________________。
(3)过程③需要严格的灭菌，否则由于_______________，可能会导致青霉素产量下降。过程④可采用_______________方法将菌体分离干燥。
25．（2021秋·重庆涪陵·高三重庆市涪陵高级中学校校考周测）《LiveScience》曾撰文指出手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，央视报道了某科研单位对手机屏幕单位面积上的细菌进行的实验调查，下图为实验调查结果。请分析回答下列相关问题：

(1)经研究发现手机屏上分布有大量微生物，其中有大家所熟知的大肠杆菌、酵母菌等。区别二者的主要依据是________________________。一般来说，微生物生长过程中需要的营养物质包括__________ 源、__________源、水、无机盐等。
(2)为了防止杂菌污染，在实验前需要对用于培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌，常用的灭菌方法有____________。图中电视台所采用的接种方法为___________法。
(3)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为104 的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为88、90、92，则该手机屏幕的细菌数为______________个/cm2。
(4)已知金黄色葡萄球菌的最适生长温度为37°C，并且有高度的耐盐性，可以在10%~15%NaCl肉汤培养基中生长，某同学想快速培养大量的金黄色葡萄球菌，应该如何操作？______________。培养结果是否可靠，还应该设置____________的对照实验，该对照组无任何微生物说明实验成功。