GPC凝胶净化系统基础知识.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,GPC,凝胶净化系统,现状,食品安全、环境保护日益受到关注。,要求仪器更快、更准、更有效。,样品前处理对于保证结果的一致与准确至关重要。,主要内容,凝胶色谱的原理,Lab,Tech,GPC Cleanup,系统,GPC,法规,GPC,的应用,凝胶色谱的原理,凝胶色谱：,Gel Permeation Chromatography,Size Exclusion Chromatography,是根据溶质分子大小进行分离的色谱技术。,柱填料凝胶具有不同尺寸的孔穴，凝胶孔径与分离组分分,子大小相应，当大小不同的组分分子随流动相进入凝胶，,他们进入微孔的程度不同，大分子不能进入孔穴，而分子,越小进入微孔越深。因而保留时间不同。试样中各组分按,分子大小进行洗脱。,凝胶色谱的固定相,凝胶色谱柱的固定相种类很多，,化学组成分为三类,有溶胀性的交联高聚物类的疏水性有机凝胶。代表：交联聚苯乙烯。,水做溶剂的亲水性凝胶，如：交联葡聚糖凝胶、琼脂。,非溶胀性的无机凝胶，如多空硅胶、多孔玻璃,GPC,凝胶净化净化柱固定相,EPA,推荐：,多空乙烯苯二乙烯苯聚合物,Bio-Breads S-X3 200-400,目,排阻极限：,2000,凝胶色谱的流动相,原则：,在选择溶剂时，应该选择与仪器、净化柱兼容的溶剂及样品,溶解性相符的溶剂。,原因：,选择性仅与分子大小的差异有关。要改进分离度只能靠凝胶,的孔径大小和孔径分布的最佳化来实现。试样的分离并不依,赖于溶剂与试样间的相互作用力（与一般色谱的不同）,.,什么是“凝胶净化系统”,输液泵将流动相与样品带入净化柱，试样中各组分按照分子大小顺序洗脱，大分子油脂、色素、生物碱、聚合物先淋洗出来农药等较小分子后淋洗出来，检测器检测出信号，组分收集器收集含有目标组分的洗脱液。,输液泵,进样阀,（自动进样器）,GPC,净化柱,馏分收集器,检测器,Lab,Tech,GPC,凝胶净化系统,GPC Cleanup 600,GPC Cleanup 800,仪器特点,高性能输液泵,多波长紫外检测器,可供选择多种收集管架的馏分收集器,集进样与收集于一体的自动液体处理器,多种收集模式,GPC,净化柱,填料：,Bio-Beads SX-3 200-400,目（,EPA 3640,）,30g,50g,60g,、,70g,净化柱：不锈钢柱、玻璃柱,尺寸：,25*300,，,25*400,，,25*500,，,25*700mm,（可定制）,灵活多变的,GPC,工作站,GPC,工作示意图,L,S,M,溶剂,废液,馏分,GPC,净化适用法规及推荐方法,US EPA SW-846,方法,3640A,FDA,杀虫剂分析方法,AOAC,分析方法,DFG S19,GPC,净化适用法规及推荐方法,方法,目标物质,样品基质,流动相,填料,USEPA 3640A,USEPA 625-S,半挥发有机物、,BNAs(Bases,Neutral Acid),多氯联苯、有机氯杀虫剂,环境样品、土壤、底泥等,100%,二氯甲烷,S-X3,Gel,FDA Pesticide Analytical Methods,有机氯杀虫剂、有机磷杀虫剂、多氯联苯、各种杀真菌剂等,脂肪、谷物、植物材料,50/50,乙酸乙酯,/,环己烷,S-X3,Gel,FDA Pesticide Analytical Methods,各种杀虫剂和除草剂,脂肪食品 羊毛脂,50/50,正己烷,/,二氯甲烷,S-X3,Gel,AOAC Methods of Analysis,有机氯农药,动物、鱼、家禽、植物油品,50/50,环己烷,/,二氯甲烷,AOAC Methods of Analysis,有机氯和有机磷杀虫剂、,三嗪化合物、氨基甲酸盐化合物,动物、鱼、家禽、植物油品,15/85,二氯甲烷,/,环己烷,S-X3,Gel,FDA Pesticide Analytical Methods,有机氯 有机磷杀虫剂、多环芳烃,脂肪、谷物、植物材料,70/30,乙酸乙酯,/,环戊烷,S-X3,Gel,GB/T 19650-2005,动物组织中农药多残留分析,农药,动物组织,50/50,乙酸乙酯,/,环己烷,S-X3,EPA 3640,：,GPC,净化系统测试,EPA SW-846 3640,方法进行校正,校准物：,玉米油（,Corn oil,）,双（,2-,乙基己基）邻苯二甲酸酯（,bis-(2-ethylhexyl)phthalate,）,甲氧滴滴涕（,methoxychlor,）,二萘嵌苯（,Perylene,）,硫,LabTech,GPC Cleanup600,净化柱,20*300mm,Bio-Breads SX,3,不锈钢柱,应用,Why“GPC”?,减少对仪器的损害和待机时间,提高准确率，确保平行性。,提高效率，并且回收率稳定,提高回收率,提高仪器的检出限,节约溶剂,节约人力,凝胶渗透色谱净化在土样有机氯测定中的应用（环境科学与技术，,vol29,，,3,）,应用领域,农产品及食品（农残、药残）,农残：蔬菜、水果、谷物、饲料、肉类、水产品、,茶叶、蜂蜜,二氧杂环：奶类,黄曲霉素：奶类、食油,应用,1,饲料中有机氯测定（农科院饲料所）,称取,5.000g,配合饲料若干份,分别加提取液,25ml,，超声提取,15min,，用加有,5g,无水硫酸钠漏斗过滤,GPC,条件：,Lab,Tech,Cleanup 600,二氯甲烷环己烷,=11,，,流速：,5.0 ml/min,波长：,258nm,标准,DDT+,六六六的,GPC,的流出图,检测样品提取液的,GPC,图,检测样品溶液,GC,色谱图,组分名称,样品溶液,(n=5),峰面积均值,回收率均值,RSD,-BHC,3111154.6,87.054.04,5.0,-BHC,147761,106.55.8,4.1,-BHC,2796123,94.164.1,4.4,-BHC,3085146,97.744.7,4.8,p,p,-DDE,2401112,99.664.6,4.7,o,p,-DDT,2848133,101.14.5,4.7,p,p,-DDD,1540107,105.97.4,7.0,p,p,-DDT,176777,102.64.5,4.4,应用,2,：,仪器系统：,LabTech,GPC Cleanup800,GPC,条件：,流动相：二氯甲烷；,检测波长：,254nm,；,流速：,3ml/min,；,进样量,5ml,。,图,1,食用油（含邻苯二甲酸二辛酯）,图,2,食用油（空白）,食用油中增塑剂,HPLC,谱图,浓度,添加值,/u,gml,-1,测定值,/u,gml,-1,平均回收率,/%,5,5,5.378,83.96,10,10,9.532,81.754,20,20,25.46,120.71,回收率结果,(n=3),环保,多环芳烃（,PHAs,）：污水、土壤,多氯联苯（,PCBs,）：废水,应用实例：,在土壤样品中加入,16,种多环芳烃混合标准品，萃取浓缩后以,LabTech,GPC Cleanup,进行净化，对收集部分进行分析。,A:mixture of 16,PAHs,B:Soil extraction,mixture of 16,PAHs,and Soil extraction,HPLC,谱图,经,GPC,净化后,16,种多环芳烃的回收率,Compound,Recovery,(%),Naphthalene,89.6,Acenaphthylene,93.4,Acenaphthene,90.4,Fluorene,96.4,Phenanthrene,92.1,Anthracene,91.2,Fluoranthene,97.6,Pyrene,94.2,Benzo,(,a)anthracene,92.1,Chrysene,97.5,Benzo(b)fluoranthene,95.1,Benzo(k)fluoranthene,90.1,Benzo(a)pyrene,98.6,Dibenzo(a,h)anthracene,86.4,Benzo(g,h,i)perylene,90.6,Indeno(1.2.3-.cd)pyrene,95.2,土壤中应用,2,土壤中有机氯,GPC,净化图片,“过程”典型的,GPC,净化残留农药制备过程,有机样品净化、浓缩全套解决方案,Thank You,Your,Lab,Our Tech,！,北京莱伯泰科仪器有限公司（,Lab,Tech,Ltd.,）,电话：,010-80486450,传真：,010-80486354,电子邮件：,lli,