山东省泰安市肥城市第三中学高中生物12基因工程的基本操作程序（二）学案新人教版选修3.doc

山东省泰安市肥城市第三中学高中生物 1.2 基因工程的基本操作程序（二）学案 新人教版选修3
学习指导
即时感悟
一、学习目标
1、简述将目的基因导入受体细胞的方法。
2、说出对目的基因进行检测和鉴定的方法
二、学习重点及难点
1、农杆菌转化法的基本过程
2、DNA分子杂交的原理
【自主预习】
1、将目的基因导入受体细胞
转化是指 。
将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______________，除此之外，还有________和______________等方法。 ______________是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_______处理细胞，使细胞处于一种___________________________________的生理状态，这种细胞称为__________。
2、目的基因的检测与鉴定
要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，非常关键，检测方法是 。以__________________________________________作为探针。要检测目的基因是否转录出了mRNA，检测方法是___________。检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是______________。除了上述分子检测外，有的还需要进行____________________的鉴定。
疑惑点
疑惑内容

三、同学们，通过自主预习，还有哪些疑惑呢？
【合作探究】
探究一：将目的基因导入受体细胞
（想一想，为什么要导入受体细胞？在外界能不能维持稳定和表达？）
思考并回答：
（1）什么是转化？

（2）将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？最常用的方法是？哪些细胞可以作为受体细胞？（结合示意图，了解农杆菌转化法的基本过程）

（3）将目的基因导入动物细胞的基本操作程序是？要用到什么技术？哪些细胞可以作为受体细胞？
（4）早期的基因工程为什么选择原核生物作为受体细胞？

（5）大肠杆菌细胞最常用的转化方法是？

探究二：目的基因的检测与鉴定（为什么要检测和鉴定？）
思考并回答：
（1）目的基因的检测与鉴定可以从什么水平来做？
（2）核酸杂交技术基本过程是？ 什么是探针？

（3）如何检测目的基因是否翻译出蛋白质？

（4）如何从个体生物学水平鉴定转基因抗虫棉？

反思总结
基因工程的基本操作步骤
主要方法、技术或组成
步骤一：

步骤二：

步骤三：
导入植物细胞：
导入动物细胞：
导入微生物细胞：
步骤四：

[当堂达标]
1、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 （ ）
A．大肠杆菌 B．酵母菌 C．T4噬菌体 D．质粒DNA
2、下列关于基因工程的叙述，正确的是： （ ）
A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因
B．细菌质粒是基因工程常用的运载体
C．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA
D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体

（1） 能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？为什么？
。
（2）过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。
（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和 。
（4）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 个。
（5）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生 ，再加入 ，才可形成C。
（6）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。

(1)不能     皮肤细胞中的胰岛素基因未表达(或未转录)，不能形成胰岛素mRNA 
(2)逆转录    4种脱氧核苷酸
(3)CaCl2
(4)同一种限制性内切酶     相同的黏性末端     DNA连接酶
【拓展延伸】
《学案导学》本节内容

【课前预习参考答案】1、目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 2、自然界中已有的物种中分离出来 人工的方法合成 编码蛋白质的结构基因 具有调控作用的因子 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成 3、基因表达载体的构建 目的基因 启动子 终止子 标记基因 4、目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注射技术 Ca2+ 能吸收周围环境中DNA分子 感受态细胞 5、DNA分子杂交 用放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段 分子杂交技术 抗原-抗体杂交 个体生物学水平

【课内探究参考答案】1 C 2 C 3 B 4 B
5、（1）不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA
（2）逆转录 解旋 （3）内含子 （4）15（a－b）
（5）同一种限制性内切酶 相同的黏性末端 DNA连接酶 （6）CaCl2