微生物测试一.doc

西交大附中闫计春、吴县中学程丽拟稿 苏州教科院马建兴审稿
微生物的实验室培养
2013年1月
一、选择题：本大题共35小题，每小题只有一个选项符合题意，每题2分，共70分。）
1.关于微生物的营养，说法正确的是（ ）
A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量
C．除水以外的无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量
2.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ）
A．接种针、手、培养基 B．高压锅、手、接种针
C．培养基、手、接种针 D．接种针、手、高压锅
3.下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（ ）
A．含碳有机物 B．蛋白胨
C．含碳无机物 D．花生粉饼等天然物质
4.发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括（ ）
A．根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基
B．根据微生物中缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子
C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸
D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素
5．要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分离开来，应将它们接种在（ ）
A．含五大类营养物质的培养基上 B．加入某种指示剂的鉴别培养基上
C．含蛋白胨等营养物质的培养基上 D．无氮的选择培养基上
6. 接种微生物的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是___________。

A.操作前不用做任何处理
B.划线操作须在火焰上进行
C.在5区域中才可以得到所需菌落
D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
7．（2011重庆卷）下列有关细菌培养的叙述，正确的是
  A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
  B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
  C.向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长
D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
8.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（ ）
A．比实际值高 B．比实际值低
C．和实际值一致 D．比实际值可能高也可能低
9.测定土壤中细菌数量一般选104、105、106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量，一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（ ）
A．细菌个体小，真菌个体大
B．细菌易稀释真菌不易稀释
C．细菌在土壤中含量比真菌高
D．随机的，没有原因
10.突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现在用两种氨基酸依赖型红色面包霉突变株a和b，分别接种到下面的6种培养基上，两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长，a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长。培养基成分如下表，关于突变株a和b分别对于A-J中氨基酸需求的说法正确的是 （ ）
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A．两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B．两种突变株都需要G氨基酸才能生长
C．两种突变株必须同时供应4种氨基酸才能生长
D．两种突变株都能在由4、5号两种培养基组成的混合培养基中生长
11.科学家在被称为“九北”(东太平洋赤道附近的北纬)的漆黑的海底深处的火山口附近发现了“人丁兴旺”的生物村落。这里的细菌能把有毒的废料当“早餐”，能利用硫化氢、铁、氢和其他一些化学物质来产生葡萄糖，从而维持自己的生命活动。这些细菌的新陈代谢类型是（ ）
A．光能自养型 B．化能自养型
C．光能自养和化能自养的混合型 D．异养型
12．高压蒸汽灭菌的原理是（ ）
A．高压使细菌DNA变性 B．高压使细菌蛋白质凝固变性
C．高温烫死细菌 D．高温使细菌DNA变性
13．关于灭菌和消毒的不正确的理解是
A．消毒和灭菌实质上是相同的
B．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
C．接种环用烧灼的方法灭菌
D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法
14．下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ）
A．将接种环放在火焰上灼烧
B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液
C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
15．有关倒平板的操作错误的是（ ）
A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上
D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置
16.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ）
A．先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C．适宜条件下培养
D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落
17.涂布平板操作需要用到（ ）
A.接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯
C.涂布器、移液管、酒精灯 D.涂布器、接种环、酒精灯
18．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )
A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
19．下列叙述错误的是（ ）
A．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素
Ｂ．培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性
C．培养细菌时需将PH调至中性或微碱性
D．培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件
20．下列有关碳源的叙述不正确的是（ ）
A．碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物
B．某些碳源可以作为微生物的主要能源物质
C．蛋白质一定不能做碳源
D．不同种类的微生物的碳源可能不同
21．关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是（ ）
A.称量 B.灭菌 C.溶化 D.倒平板
22．以下操作用到接种环的是（ ）
A．平板划线操作 B．系列稀释操作
C．涂布平板操作 D．倒平板操作
23．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ）
A.将未接种的培养基放在实验桌上培养
B.将未接种的培养基放在窗台上培养
C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养
D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养
24．甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）

粉状硫
10g
K2HPO4
4g
FeS04
0.5g
蔗糖
10g
(NH4)2SO4
0.4g
H20
100ml
MgS04
9.25g
CaCl2
0.5g
I
+
+
+
+

+
+
+
Ⅱ
+
十
+

+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
A、甲、乙、丙都是异养微生物
B、甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物
C、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物
D、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
25．在培养基中加入伊红和美蓝可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，这种培养基称为（ ）
A．选择培养基 B．鉴别培养基
C．液体培养基 D．固体培养基
26．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( )
A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质
27.有关平板划线操作正确的是（ ）
A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞
C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养
28．某一种细菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。根据实验目的，选用的培养基类型是（　　）
注：Ｌ—亮氨酸　　Ｓ—链霉素　　“＋”—加入　　“—”—不加入B
如：Ｌ—：不加亮氨酸　　Ｓ＋：加入链霉素
选项
筛选出不需要亮氨酸的菌株
筛选出抗链霉素的菌株
筛选出不需要亮氨酸的抗链霉素的菌株
A
Ｌ＋　　Ｓ＋
Ｌ—　　Ｓ—
Ｌ＋　　Ｓ－
Ｂ
Ｌ－　　Ｓ—
Ｌ＋　　Ｓ＋
Ｌ—　　Ｓ＋
C
Ｌ—　　Ｓ＋
Ｌ＋　　Ｓ＋
Ｌ—　　Ｓ—
D
Ｌ＋　　Ｓ—
ｌ—　　Ｓ—
Ｌ＋　　Ｓ＋
29．将圆褐固氮菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间培养，就能够得到（ ）
A．菌丝 B．无一定形态的群体
C．单个细菌 D．菌落
30．在接种操作的过程中，不正确的是（ ）
A．要将接种环灼烧灭菌 B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌
C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位 D．接种后还要将管口灭菌加塞
31.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（ ）
A.对比观察培养基有没有被微生物利用 B.对比分析培养基上是否生有杂菌
C.没必要放入未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用
32．在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为（ ）
①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量
A．①②⑥⑤③④ B．⑥①②⑤③④　　　C．⑥①②⑤④③ D．①②⑤④⑥③
33．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照 ，对于对照组的要求不包括哪项（ ）
A、对照组培养基也严格灭菌，且不接触任何生物
B、对照组和实验组培养基放在相同的条件下培养
C、所用培养基成分及PH大小完全与实验组一致
D、培养基的量的大小与实验组必须绝对相同
34．(2012宿州模拟)下面的资料表明在各种培养基中细菌的生长（S、C、M为 简单培养基，U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质），问细菌不能合成哪一种物质？（“+”表示生长良好，“－”表示生长不好）（ ）
培养基
生长状态
S、C、M
－
S、C、M+V+Z
－
S、C、M+U+Y
＋
S、C、M+Z+X
－
S、C、M+V+Y
＋
S、C、M+U+X
－
S、C、M+Y+Z
＋
A、U B、V C、Y D、Z
35.金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是（ ）
A．对接种环进行灼烧处理
B．带菌培养基须经高压蒸汽锅灭菌后才能倒掉
C．带菌培养基须经加热后才能倒掉
D．接种后双手须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试
二、非选择题：（每空1分，共30分）
36.（2010全国1）（10分）下列是与微生物培养有关的问题，请回答：
某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于＿＿＿＿。
琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型

37. （2011全国）（8分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和____________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____________和______________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_______________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
（1）原油 选择
（2）平板划线法 稀释涂布平板法
（3）强
（4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰

38.（3分）利用灭菌技术，将某种细菌接种到培养皿内，以不同的方式处理培养皿并加盖（表内阴影部分表示有细菌，白色清晰区表示无细菌）。

⑴描述表中1和2结果的不同__________________________________ 。
⑵根据3、4的结果判断，抗生素P和Q同时用于治疗由这种细菌引起的疾病，疗效如何？
________________________________________________
⑶说明滥用抗生素治疗细菌感染的疾病的危险性：_________________________ _。
39.（09上海）．(9分)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。

(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1％的______________。
(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是______________________。
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________________培养基和______________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____________________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_______________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如下图所示。从图中可知，SP1菌在______________培养条件下最早停止生长，其原因是_____________________________。

40. （2011四川卷5）有人通过实验探究某海藻的最佳培养条件，以获得最大生物量（注：生物量指单位体积的藻体干重）。
（1）在有光条件下培养海藻时，培养液中必须含有 ，还需定时向培养液中通入空气，目的是提供 。海藻光合速率随不同光照强度的变化曲线如下图，图中B点表示最佳的 培养条件。

（3） 向培养液中添加葡萄糖配成不同浓度的培养液，在一定光照条件下培养该海藻，测定海藻的生物量如下表：
葡萄糖浓度（g/L）
0
0.1
0.2
0.4
0.6
1.0
海藻生物量（g/L）
0.84
0.93
1.00
1.03
0.79
0.67
要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度，还需设计_____________的实验。
（4）综合上述实验，获得该海藻最大生物量的培养条件是____________。

参考答案：
一、选择题
1-5：DCCCD; 6-10：DDBCD; 11-15：BBADC; 16-20：DCCBC;
21-25：DACDB; 26-30：ADBDC; 31-35：BBDCC
二、非选择题
36. （10分）
琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型
37. （8分）
（1）原油 选择
（2）平板划线法 稀释涂布平板法
（3）强
（4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
38. （3分）
（1）P、Q两者都能抑制细菌生长，但抗生素Q比P杀菌能力强
（2）同时使用P和Q，疗效会降低
（3）由于药物的选择作用，滥用抗生素，导致细菌感染性增强，使原来的抗生素失去抗菌效果
39. (9分)
(1)琼脂
(2)先调pH，后灭菌
(3)通用 选择 硝酸铵
(4)芽孢
(5)20mg/L氯苯 碳源最早耗尽
40.