食品中淀粉的测定.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,喜旺制作组,成员,:,食品中淀粉的测定,第一法 酶水解法第二法 酸水解法,第一法 酶水解法,一、目的与要求：,1,、了解食品中淀粉含量的分析原理及分析方法。,2,、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。,二、实验原理,样品经除去脂肪乙醇及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成麦芽糖和低分子糊精，再用酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算成淀粉含量。,适用范围,此法适用于测定富含纤维素 半纤维素等多糖含量高的样品，分析结果准确可靠，但操作烦琐,费时。,三、试剂,1,、乙醚,2,、乙醇,85%,3,、淀粉酶溶液：,5g/L,。称取,0.5g,淀粉酶，加,100ml,水溶解加入数滴甲或三氯甲烷，防止长霉，贮存于冰箱。,4,、碘溶液：称取,3.6g,碘化钾溶于,20mL,水中，加入,1.3,碘，溶解后加水稀释至,100mL,5,、甲基红指示液,:2g/L,乙醇溶液,6,、精密,ph,试纸,7,、碱性酒石酸铜甲液,8,、碱性酒石酸铜乙液,9,、,0.1000N,高锰酸钾标准溶液,10,、硫酸铁溶液,四、操作方法,1,、样品处理,:,称取,2-5,克样品（含淀粉,05,左右），置于放有折叠滤 纸的漏斗内，先用,50,毫升乙醚分,5,次洗除脂肪，再用约,100,毫升,85,乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入,250,毫升烧杯内并用,50,毫升水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内,2,、酶水解：将烧杯置沸水浴上加热,15,分钟，使淀粉糊化，放冷至,60,以下，加,20,毫升淀粉酶溶液，在,55-60,保温,1,小时，并时时搅拌。,然后取,1,滴此液加,1,滴溶液，应不显现蓝色,，若显蓝色，再加热糊化并加,20,毫升淀粉,酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为,止。加热至沸，冷后移入,250,毫升容量瓶中,，并加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。,取,50,毫升滤液，置于,250,毫升锥形瓶中，,并加水至刻度，沸水浴中回流,1,小时，,冷后加,2,滴甲基红指示液，用,20,氢氧化钠溶液中和至中性，溶液,转入,100,毫升容量瓶中，洗涤锥形瓶，,洗液并人,100,毫升容量瓶中，加水至刻度，,混匀备用,。,2,、测定：吸取,50,毫升处理后的样品溶液，于,400,毫升烧杯内，加入,25,毫升碱性酒石酸铜甲液及,25,毫升乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制，在,4,分钟内沸腾，再准确煮沸,2,分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或,c4,垂融坩埚抽滤，并用,60,热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原,400,毫升烧杯中，加,25,毫升硫酸铁溶液及,25,毫升水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以,0.1000N,高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。,同时量取,50,毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白实验。,计算：,X1=(A1-A2)0.9)/(m150/250V1/1001000)100,X1,：样品中淀粉的含量，；,A1,：测定用样品中还原糖的含量，,mg,；,A2,：试剂空白中还原糖的含量，,mg,；,0.9,：还原糖,(,以葡萄糖计,),换算成淀粉的换算系数；,m1,：称取样品质量，,g,；,V1,：测定用样品处理液的体积，毫升,(m1),。,第二法 酸水解法,一、原理：,样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。,二、试剂：,1,、乙醚；,2,、,85,乙醇溶液；,3,、,6N,盐酸溶液；,4,、,40,氢氧化钠溶液；,5,、,10,氢氧化钠溶液；,6,、甲基红指示液：,0.2,乙醇溶液；,7,、精密,PH,试纸；,8,、,20,乙酸铅溶液；,9,、,10,硫酸钠溶液；,10,、乙醚；,11,、碱性酒石酸铜甲液；,12,、碱性酒石酸铜乙液；,13,、硫酸铁；,14,、,0.1000N,高锰酸钾标液,适用范围,此法适用于淀粉含量较高，而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。对富含半纤维素 多缩戊糖及果胶质的样品，因水解时它们也被水解为木糖 阿拉伯糖等还原糖，使测定结果偏高。该法操作简单 应用广泛，但选择性和准确性不及水解法。,三,.,试剂,乙醚,乙醇：,85%,HCI,：,6mol/L,氢氧化钠：,400g/l,氢氧化钠：,100g/l,甲基红指示剂：,2g/l,乙醇溶液,精密,PH,试纸,中性醋酸铅溶液：,200g/L,硫酸钠溶液：,100g/L,其它试剂同还原糖测定,四、仪器：,1,、水浴锅,2,、高速组织捣碎机：,1200r,min,3,、皂化装置并附,250,毫升锥形瓶。,五、操作方法：,1,、样品处理,A,、粮食，豆类、糕点、饼干等较干燥的样品，称取,2.0-5.0,克磨碎过,40,目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用,30,毫升乙醚分三次洗去样品中的脂肪，弃去乙醚。再用,150,毫升,85,乙醇溶液分数次洗涤残渣，除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液，以,100,毫升水洗涤漏斗中残渣并转移至,250,毫升锥形瓶中，加入,30,毫升,6N,盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流,2,小时。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后，加入,2,滴甲基红指示液，先以,40,氢氧化钠溶液调至黄色，再以,6N,盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密,PH,试纸测试，使样品水解液的,PH,约为,7,。然后加,20,毫升,20,乙酸铅溶液，摇匀，放置,10,分钟。再,加,20,毫升,10,硫酸钠溶液，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入,500,毫升容量瓶中，用水洗涤锥形,瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液,20,毫升，滤液供测定用。,B,、蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品：按,1,：,1,加水在组织捣碎机中捣成匀浆,(,蔬菜、水果需先洗净、晾干、取可食部分,),称取,5-10,克匀浆,(,液体样品可直接量取,),，于,250,毫升锥形瓶中，加,30,毫升乙醚振摇提取,(,除去样品中脂肪,),，用滤纸过滤除去乙醚，再用,30,毫升乙醚淋洗两次，弃去乙醚。以下按,A,自“再用,150,毫升,85,乙醇溶液”起依法操作。,2,、测定：,吸取,50,毫升处理后的样品溶液，于,400,毫升烧杯内，加,25,毫升碱性酒石酸铜甲液及,25,毫升乙液。于烧杯上盖一表面皿加热，控制在,4,分钟沸腾再准确煮沸,2,分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或,G4,垂融坩埚抽滤，并用,60,热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原,400,毫升烧杯中，加,25,毫升硫酸铁溶液及,25,毫升水，用玻棒搅拌使氧化铜完全溶解，以,0.1000N,高锰酸钾标液滴定至微红色为终点。,同时吸取,50,毫升水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲乙液、硫酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白试验。,计算：,x2=(A3-A4)0.9)/(M2V2/5001000100,式中：,X2,：样品中淀粉含量，；,A3,：测定用样品中水解液中还原糖含量，,mg,；,A4,：试剂空白中还原糖的含量，,mg,；,m2,：样品质量，,mg,；,V2,：测定用样品水解液体积，,m1,；,500,：样品液总体积，,ml,；,0.9,：还原糖折算成淀粉的换算系数。,Thank you!,