体外抗原抗体反应概述.ppt

第七章第七章 抗原抗体反应抗原抗体反应（20092009级检验）级检验）授课：微生物学与免疫学教研室授课：微生物学与免疫学教研室 沈小波沈小波掌握：掌握：抗原抗体反应的原理及特点抗原抗体反应的原理及特点 前带、后带、亲合性、亲合力的概念前带、后带、亲合性、亲合力的概念熟悉：熟悉：熟悉：熟悉：影响抗原抗体反应的因素影响抗原抗体反应的因素了解：了解：了解：了解：抗原抗体反应的基本类型抗原抗体反应的基本类型目的要求目的要求抗原抗体反应抗原抗体反应-抗原与相应抗体的特异性结抗原与相应抗体的特异性结合反应合反应AgAb抗原（抗原（Antigen）抗体抗体(Antibody)AbAg体外体外体内体内第一节第一节 抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的特异性：抗原抗体反应的特异性：基于抗原抗体两种基于抗原抗体两种分子间的结构互补性和亲和性。分子间的结构互补性和亲和性。第一阶段：第一阶段：Ag-Ab发生特异性结发生特异性结合合第二阶段：第二阶段：出现肉眼可见反应出现肉眼可见反应反应分两个阶段反应分两个阶段AbAg+-范德华力范德华力疏水作用力疏水作用力（最主要）（最主要）氢键结合力氢键结合力H2O静电引力静电引力HH-+-ONNO一、抗原抗体结合力一、抗原抗体结合力 Ag1 Ag1Ab1 Ag1 Ag1Ab1在抗原和抗体分子一方在抗原和抗体分子一方在抗原和抗体分子一方在抗原和抗体分子一方或双方均以或双方均以或双方均以或双方均以单效价单效价单效价单效价存在存在存在存在的情况下，两者之间的的情况下，两者之间的的情况下，两者之间的的情况下，两者之间的结合力结合力结合力结合力亲和性亲和性亲和性亲和性在抗原和抗体分子均以在抗原和抗体分子均以在抗原和抗体分子均以在抗原和抗体分子均以双效双效双效双效价或多效价价或多效价价或多效价价或多效价存在的情况下，存在的情况下，存在的情况下，存在的情况下，两者之间的结合力两者之间的结合力两者之间的结合力两者之间的结合力亲合亲合亲合亲合力（多价优势）力（多价优势）力（多价优势）力（多价优势）二、抗原抗体的亲和性和亲和力二、抗原抗体的亲和性和亲和力Keq=104Affinity106Avidity1010Avidity亲合力亲合力多个抗原决定簇与多价抗体间的总结合力多个抗原决定簇与多价抗体间的总结合力p 可逆性可逆性p 特异性特异性p 比例性比例性第二节第二节 抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点1、高度特异性（、高度特异性（specificity)抗体抗体 CDR抗抗原原抗原决定簇抗原决定簇AbAg 抗原抗体反应的特抗原抗体反应的特异性是指抗原分子上的异性是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性，超变区结合的特异性，由这两个分子间空间结由这两个分子间空间结构的互补性决定。构的互补性决定。交叉反应交叉反应两种不同的抗原具有部分相同或类似结构的抗原决定簇，可与彼此相应的抗血清（抗体）发生反应。2、比例性、比例性(proportionality)抗原与抗体发生可见反应需要一定的量抗原与抗体发生可见反应需要一定的量比关系，只有二者浓度比例适当时，才形成比关系，只有二者浓度比例适当时，才形成较大的抗原抗体结合物。较大的抗原抗体结合物。AbAg沉淀物总量抗原浓度抗原浓度前带前带等价带等价带后带后带等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。Ag+Ab AgAb AgAb结合常数）合常数）AgAb（解离常数）（解离常数）K=3、可逆性、可逆性(reversibility)影响因素：影响因素：1 1、亲和力；、亲和力；2 2、环境因素、环境因素第三节第三节 影响抗原抗体反应的因素影响抗原抗体反应的因素一、反应物自身的因素一、反应物自身的因素1 1、抗原：理化性状、表面抗原决定簇的种类、抗原：理化性状、表面抗原决定簇的种类和数量和数量2 2、抗体：来源、与抗原合适的比例、特异性、抗体：来源、与抗原合适的比例、特异性、亲和力和亲合力亲和力和亲合力第三节第三节 影响抗原抗体反应的因素影响抗原抗体反应的因素二、反应环境条件二、反应环境条件1 1、电解质、电解质:才能形成大块复合物才能形成大块复合物2 2、pHpH值值3 3、温度、温度4 4、适度的震荡、适度的震荡第四节第四节 抗原抗体反应的类型抗原抗体反应的类型p 凝集反应凝集反应p 沉淀反应沉淀反应p 补体参与的抗原抗体反应补体参与的抗原抗体反应p 中和反应中和反应p 免疫标记技术免疫标记技术抗原抗体反应的类型抗原抗体反应的类型u 沉淀反应：沉淀反应：可溶性抗原相应抗体u 凝集反应凝集反应：颗粒性抗原相应的抗体（可溶性抗原吸附于与免疫无关的颗粒性载体上）适量电解质适量电解质肉眼可见的沉淀反应适量电解质适量电解质肉眼可见的凝集块uu 补体参与的反应：补体参与的反应：补体参与的反应：补体参与的反应：抗原抗体复合物可激活、固定补抗原抗体复合物可激活、固定补体，利用补体的溶细胞效应测定抗体或抗原。体，利用补体的溶细胞效应测定抗体或抗原。uu 中和反应：中和反应：中和反应：中和反应：病毒或外毒素。病毒或外毒素。uu 免疫标记技术：免疫标记技术：免疫标记技术：免疫标记技术：用荧光素、放射性物质、酶、胶体用荧光素、放射性物质、酶、胶体金、生物素等标记抗原或抗体金、生物素等标记抗原或抗体,以检测相应的抗体或抗以检测相应的抗体或抗原。原。思 考 题名词解释：名词解释：等价带、带现象、前带、后带、抗体的亲和力与亲合力等价带、带现象、前带、后带、抗体的亲和力与亲合力问答题：问答题：1 1、有哪些因素可以影响抗原抗体反应？、有哪些因素可以影响抗原抗体反应？抗原抗体反应最适合的环境条件是？抗原抗体反应最适合的环境条件是？2 2、抗原抗体反应有什么特点？、抗原抗体反应有什么特点？3 3、抗原抗体的结合反应有哪些分子间作用力参与？、抗原抗体的结合反应有哪些分子间作用力参与？起主要作用的是哪种？起主要作用的是哪种？4 4、前带与后带的区别与意义？、前带与后带的区别与意义？