NY∕T 3858-2021 番茄抗匍柄霉叶斑病鉴定技术规程(农业).pdf

ICS 65.020.01 CCS B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/ T 3858-2021 番茄抗匍柄霉叶斑病鉴定技术规程Technical code of practice for identification of tomato to stemphylium leaf spot 2021-05-07发布2021-11-01实施中华人民共和国农业农村部发布.阿.).，4飞本文件按照GB/T1. 1 起草。本文件1农业农村剖11If1l业管军II司提出并归口。NY / T 3858-2021 本文件起草单位中同农业科学院蔬菜花卉研究所、宁夏大学、浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所。本文件主要起草人，谢学文、李宝聚、石延霞、柴阿丽、张雪艳、武军。i NY /T 3858-2021 番茄抗匍柄毒叶斑病鉴定技术规程1 范围本文件规定了番茄1lJ柄每叶斑病抗病性鉴定术语和l定义、接种体制l备、抗病性鉴定、病悄调查、抗病性鉴定记录表格。本文件适用于各种类型番茄品利12 规范性引用文件下列文件中的仪该日!YI对应的版文件。3 3.1 3.4 3.5 3.6 G/ T 1 NY/ T 1 NY/T 1 番茄匍111 )li1lJ 抗性评价根据采用的技术致病性pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。人工接种artificiaf inoculation 其中，注日期的引用文俐，的修改单)适j刊于本在适宜条件下.通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程。3. 7 病情级别disease rating scale 植物个体或群体发病程度的数字化tNi述。3.8 接种体inoculum 用于接非l 以引起病害的病原体或病原体的一部分。NY /T 3858- 2021 3.9 接种悬浮液illoculum suspension 用于接种的含有定量接种体的液体3. 10 病情指数disease index( DI) 全而评价发病率和严重程度的综合指标数值。4 接种体制备4. 1 接种体分离采用常规组织分离法，从番茄植株发病组织病健交界处分离病原物。4. 2 接种体鉴定菌饼法诱导产抱鉴定.选择感病番茄品种，匍柄霉菌在马铃薯葡萄轨即()J旨培养基(PotatoDextrose Agar，简称POA)上培养3 d后，用5mm 1J孔然打取菌饼，将带有茵丝而贴到番茄叶片上，接种后置于25 C 30 C条件下保湿培养，3d后茵饼背面产抱，可参考附录A进行鉴定.4. 3 接种体保存4. 3. 1 短期保存方法将单于包分离到的匍柄霉菌株接种在POA试管斜而内，在26C28 C下培养，10d后宣4C冰箱内保存，保存期1个月2个月。4 3. 2 长期保存方法采用液体石蜡前11低温保存法，目11在斜面菌种上加一层灭tt的优质液体石蚓(高w斜而顶部1cm)，液体石蜡在使用前需要经过121C高压蒸汽灭幽20min,E(- 4 C4 C-F保存2年。4. 4 接种体繁殖与悬浮液制备将jj飞试耻i株从试管中转入POA平板，25C黑III:i条件下消化两次后，转接到IjPOA平板培养5d7 d, 挑取l丝块转接至PO培养液中，在28C, 120 r/min的恒混摇床上震荡培养7d。将在PO液体培养基中tJf养好的囱丝球用双层纱布过滤，然后剧组织捣碎机将E自丝打碎。再将扪碎后的茵丝HI离心机以4o r/min的速度离心10min，弃上消液，取沉淀物)111入适茧的含1%lttlliiHO的蒸啊11水稀释，用分光光度计(波长60011m)检测，菌丝菌悬液的浓度稀释到l吸光j主值L55L 65。5 鉴定条件和试验设计5. 1 鉴定环境人工接种鉴定室应温度、1显度及光!l条件可控，使植物(番茄)人工接种后具备良好的发病环境。52 鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复至少3次，每一重复10株苗。5. 3 鉴定对照材料选择1个感病对照和1个抗病对!l，lm果生产中无抗性品种，抗性对!I石l不逃。感病对!l要求高度感病，选择标准为规定接利量及适宜环境条件下病情指数达到高感程度，且感病性稳定;抗病对!品种选用在规定接种盘及适宜环境条件下病情指数低于10，且抗病性稳定。6 接种6. 1 鉴定材料育苗鉴定材料种子在1%次氨酸例中浸种10min，无l水冲洗后置于恒泪培养箱中28C催芽，芽i主1 mm3 mm时播种于50孔育苗钵中，在Z土厚度1cm2 cm。育苗;Jili质为革炭、虫f石和i珍珠岩(3 1 )，经商汩t蒸汽灭菌Cl21C,30 min)。在日光讯室内育苗，室内i1ift度为20C25C，每钵一苗，所有幼苗应生l王健壮、一致。6. 2 接种时期幼苗l，=至2/lt 1心时进行接利6. 3 接种方法NY / T 3858- 2021 采用HPt第法接种，取制各好的接手l 悬浮液用小型喷9器均匀l质布于番茄j/l片的正反两面，接手l担;以Iq片不hlH在为:自6 4 接种后的管理6.4. 1 接种后24 h的管理接利:后置于25C30 c接种室内，黑暗保混24h，保湿棚内相对湿Jj(RelativcI-lumidity ，RH)在85%100% 6. 4 2 接种保湿24h后的管理24 h保i在后，每天光!fl12h14 h，似证RH80%90%，梢养liA度25C30C，正常栽培管理。7 病情调查71 病情级别划分苗期病悄级JIJ及其相对应的症状tNii韭见表1, 表1番茄匍柄霉叶斑病病情分级标准病密级刀1)症状tNi述。元1斑捕且ET而积占1拌个l叶I町积的5%以下3 病斑ITI积占整个叫而在105%-25%5 病斑而非占整个时而积的26%-50%7 捕斑ffHH占整个叫IfIi积的51%-75% 9 病斑而积占整个叫I町帜的75%以上7.2 病情调查接种10 d左右，感病对m!充分发病且病情稳定H才进行。7.3 病情记载参!m附录B调查记载每一鉴定植株的病情级别，并计算病情指数。病情指数校公式(Hi窍。;(sX,) 01=二工-一一一X100 . (l) NXS 式中:01一一病情指数;s 一一各病情级另IJ代表数值; 一一各病情级别的叶片数;N 调查总叶片数，5一一最高病情级别的代表数值。8 抗病性鉴定8. 1 抗病性鉴定标准依据鉴定材料3次重复的病情指数(Df)平均值确定其抗性水平，划分标准见表2，3 NY!T 3858-2021 病11指数(DJ)o 。DI1010:二DI3030DI50 50;DI75 1J1;呈758 2 抗病性鉴定有效性判别感病对m有效.表2番茄匍柄霉肘斑病统性评价标准抗性鉴定免疫(i):il亢(HR)lJLI( R) ojojJt(MR) 感的(5)IVi感(I-IS) ) ;:50，该批次抗病性鉴定视为附录A(资料性)NY/ T 3858- 2021 番茄匍柄霉叶斑病菌A.l 学名茄佣柄霉(51em卢hyLiumsoLlli) 番茄匍柄:!tt(5tem户hyLiUJJ1lycoersici ) A 2 形态描述Jii11U柄霉(5lemhyl川11soLani)在POA培养上，25C28C条件下进行匍柄:!tt培养d革ii匍匈生l豆，颜色为淡褐色或褐色。菌丝体表生或部分埋生，密集丛生。菌丝直径2.5m3m.分生于包子梗直立，单生，偶尔有1个分枝，Ill柱形，直或弯JIIJ，顶端产抱细脑袋状膨大，淡褐色至青褐色，产抱孔颜色相对较深，挺状产泡节处具有小事Ij突或呈不规则相l糙状，其他部位一般光滑，具有1个5个隔膜，(90 103)mX (46)m，产泡节褒状膨大部位立径7.5m8m，产抱孔直径6m7m.分生袍子阔卵圆形至近桶形，淡青褐色到深青褐色，具有I个3个横|剧院，1个4纵隔膜，中极隔膜处明显缝缩，其他横隔膜处轻微至明显的维锁，表面具微疵，至IYJ显到L突或小Jt; .(2832. 5)mX (925) vm，平均31m X 21. 3m，长/宽=1. 5 1. 7，平均1.6. 番jji1m柄:rij(5temhyliulIllyco户ersici)在平板计数li;(jJ旨培养基(PlateCount Agar，简称PCA)25C 条件下，培养2则3)词，菌落匍匈生长，初淡祸色，后逐渐中褐色或褐色，绒毛状，菌落直径5cm7 cm, 背面观然中昌色。lj丝体表生或者:till生。菌丝淡褐色至中褐色，光滑，有分阳，叉状分支，直径.7m2.5m.分生袍子梗单生，应|柱状，1Y!llg二于茵丝1.或直接着生于lj丝顶揣，不分枝，分|喝，3个6个隔JJ且，(80 117)mX(4.55)m.分生袍子以内芽生式产生于分生抱子梗顶揣黎状膨大部位的产于包孔处，线状体直径8.9 Vm9. 5m，f:f包孔直径4，m5. 3m，节袋状膨大部位淡祸色，其余部位淡中国包光滑。分生抱子单生，顶生，长方形或棍棒型，分生抱子的顶端jl!1(1激状尖细，自顶部至部到II)J包渐变窄绑，直立或赂弯闹，淡tP.色至深褐色，具2个3个横隔膜，没有纵隔l识，有1个2个明显的生益缩现象，分生袍子表面光滑，成熟分生袍子(5068)，mX(318)m，.j王/宽=2.63. 1 。图1茄匍柄霉在PDA上菌落正面图2茄匍柄霉菌在PCA上菌落背面5 NY /T 3858-2021 图3番茄匍柄霉在PDA上茵落正面图5茄匍柄霉分生殖子A.3 发病症状描述图4番茄匍柄霉在PCA上菌落背面 , 图6番茄匍柄霉分生袍子番茄例柄霉叶斑病主要危害叶片，发病早期J1t而布满暗绿色或Al1褐色圆形小斑点，后沿Iq才脉向四周逐渐扩展为直径2mm5 ml丑的不整齐的病驹，中部褪绿变为灰II至灰梢色。病斑中部凹陷逐渐变薄，后jJ病斑中部破裂、穿孔或者脱落.6 番茄i抗病性鉴定结果记录表格!A!.表巳l。编号l鉴定地43.撞种AJ!lJ，5揣种日且l鉴定技术负表附录B(资料性)鉴定记录表格NY /1 3858-2021 病忻| 平均| 抗性指数| 纳斯| 评价7 NON-盯凹Hhz技术规程NY 1 T 3858-2021 争4民 印ll(o. 75 字数15千字2021 句10月北京郊l次印刷l9峰202 1!.F 10月如l版I号16109.8715 定价26.00元 开本880mmX1230111111 1/ 16 版权专有侵权必究举报电话[phone]- 2021