CIK细胞在肿瘤治疗中的临床应用ppt课件.ppt

CIK细胞在胞在肿瘤治瘤治疗中的中的应用用景源生物主要内容CIKCIK免疫免疫细胞治胞治疗简介介 肿 瘤瘤 免免 疫疫 治治 疗 肿 瘤瘤 治治 疗 现 状状景景 源源 生生 物物 简 介介肿瘤治疗现状研究显示全球恶性肿瘤（癌症）病例呈迅猛增长态势，由2012年的1400万人，将逐年递增至2025年的1900万人。新增病例主要来自发展中国家，其中以中国最多。中国新增肝癌和食道癌患者约占全球一半，死亡分别占全球的51%和49%。2012年全球新增胃癌病例和相关死亡人数中，中国也均超过40%。全球癌症全球癌症报告告20142014为何肿瘤死亡率居高不下？早期诊断困难，易错过最佳治疗时间早期诊断困难，易错过最佳治疗时间 早期癌症症状不明显，患者不能及时发现，同时缺乏定期的体检，导致90%癌症患者确诊时已是中晚期，错过最佳治疗时间，增加了治疗的难度。对癌症产生恐惧心理，影响治疗效果对癌症产生恐惧心理，影响治疗效果 70%80%的肿瘤病人以为癌症就是绝症，不能治疗，因此产生抑郁，焦虑，恐惧等。心理因素正成为扼杀肿瘤病人生命的重要因素。治疗不彻底，癌细胞转移、复发治疗不彻底，癌细胞转移、复发 当患有肿瘤后，人们首先想到的是手术，放化疗，虽然这三种方法能在一定程度上缓解患者的疼痛，控制病情，但无法彻底清除患者体内的癌细胞，因此很多患者经过治疗后癌细胞还是会出现复发转移。肿瘤与综合治疗 肿瘤是一种慢性、消耗性的全身性疾病，抗肿瘤需要局部治疗和全身性治疗的有机结合。局部治疗局部治疗常用手段：手术、放疗、微创与介入、超声治疗等。全身治疗全身治疗常用手段：化疗、生物治疗、中药等。肿瘤免疫治疗的必要性肿瘤发病（发生、发展）的两个必要条件肿瘤发病（发生、发展）的两个必要条件：1.肿瘤细胞基因表达异常肿瘤细胞基因表达异常 体细胞突变获得恶性表型，无限繁殖与抗凋亡生长2.免疫逃逸免疫逃逸 NK细胞、巨噬细胞、DC细胞、T细胞等起免疫监测与免疫清除用。当发生免疫耐受、抗原调变或免疫细胞凋亡时，肿瘤细胞可逃避免疫监测或清除作用。肿瘤转移和复发的原因肿瘤转移和复发的原因：肿瘤形成后进一步释放大量免疫抑制因子（IL-10、IL-4、VEGF等），导致肿瘤局部和机体全身免疫抑制，失去了抗肿瘤能力。因此，恢复和增强肿瘤病人的免疫力极为重要。因此，恢复和增强肿瘤病人的免疫力极为重要。免疫治疗受世界肿瘤医学界追捧美国癌症学会（美国癌症学会（ACSACS）最好的抗癌药物是人体的免疫力美国临床肿瘤学会（美国临床肿瘤学会（ASCOASCO）生物治疗将成为21世纪人类攻克癌症具有战略意义的一个重要方面2009年6月11日，国家卫生部将细胞免疫治疗列入首批允许临床应用的第三第三类医疗技术类医疗技术。CIK的卫生部医疗项目号：310800024b310800024b免疫治疗发展简史CIK细胞简介 CIK CIK(cytokines-induced killer cell)为细胞因子诱导的杀伤细胞，是将人体外周血单个核细胞(PBMC)在体外模拟人体内环境，用多种细胞因子(如CD3McAb、IL-2、IFN-、IL-1等)共同培养增殖后获得的一群异质细胞。CIK又称为NK细胞样T淋巴细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤特点。CIK细胞培养四天后显微图（1400）CIK细胞特性 CIK细胞为异质细胞群，同时具有T细胞和NK细胞的标志,表面标志为CD3CD56 增殖能力强，可达1000倍 杀瘤谱广 对多重耐药肿瘤细胞同样敏感 杀瘤活性不受CSA、FK506等免疫抑制剂的影响 对正常骨髓造血前体细胞毒性很小 能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞FasFasL凋亡 近期疗效显著CIK细胞的作用机制 直接杀伤肿瘤细胞 活化后产生大量细胞因子的抑瘤杀瘤作用 诱导肿瘤细胞凋亡 激活机体免疫系统，提高机体免疫功能CIK细胞治疗策略常规治疗尽可能使肿瘤负荷降低常规治疗尽可能使肿瘤负荷降低体外诱导体外诱导CIKCIK细胞（细胞（1 110109 9 个细胞以上个细胞以上）回输回输CIKCIK细胞给患者（一疗程回输细胞给患者（一疗程回输3 3次，次，3434疗程疗程/年）年）杀伤残留的肿瘤细胞杀伤残留的肿瘤细胞抑制肿瘤的复发和转移抑制肿瘤的复发和转移CIK治疗方案选择CIK免疫治疗安全性安全性：安全性：细胞来源安全，体外培养操作均在局部百级，整体万级的符合GMP标准的实验室中完成，是非常成熟的个体化细胞治疗技术成熟的个体化细胞治疗技术，目前尚无严重副作用的相关报道。CIK细胞临床应用时的不良反应主要包括：轻度发热、畏寒等，偶见关节痛、腹痛等，一般表现为类感冒症状；不良反应原因不良反应原因：通常是由CIK细胞释放的大量炎性细胞因子所引起，属于一种过敏性反应，即个性化的反应。不良反应处理方法：不良反应处理方法：1.发热：停药后8小时内可自行缓解，也可以肌肉注射非那根25mg或苯海拉明20mg。如果高热应按高热常规护理；2.出现乏力、全身肌肉酸痛等症状：患者应多注意休息，可自行缓解；3.过敏反应：可出现皮肤瘙痒、皮疹等在开始输注前速度宜慢，发现问题及时报告主管医生，以做适当护理；4.回输后应保证充足的睡眠，不能做剧烈的运动。CIK治疗适应人群适适 应应 症症手术后患者，可防止肿瘤转移复发；无法进行手术、放化疗的中晚期患者；放疗、化疗失败的患者；放疗或化疗后患者的综合治疗；骨髓移植后或化疗缓解后的白血病患者；癌性胸、腹腔积液患者；乙型、丙型肝炎。禁禁 忌忌 症症 怀孕或哺乳期妇女；脏器移植者；严重自身免疫性疾病患者；不可控制的感染性疾病；对本治疗中所用生物制剂过敏者；T细胞淋巴瘤；器官功能衰竭者；心脏：级以上；肝脏：达到国内肝功能分级C级以上；肾脏：肾功能衰竭及尿毒症；肺：出现严重的呼吸衰竭症状，并累及到其他 脏器，如肝、肾功能；脑：脑转移并伴意识障碍者。应严格遵照CIK细胞治疗的适应症、禁忌症，并估算患者的预计生存期应不少于不少于3 3个月个月，还应尽可能选择术后或肿瘤负荷较少的患者CIK细胞治疗流程1.细胞采集抽取患者外周血2.提取单个核细胞3.体外诱导培养 CIK细胞4.终产品质量检测5.回输患者6.随访及疗效评估CIK临床应用指导入入 选选 标标 准准患者预期生存3 3个月个月，生存质量评分(KPS)6060。重要生命器官功能正常，血胆红素68 pmol/L冬氨酸氨基转移酶90 IUL，肌酐3.5x109/L，血小板计数80 x109/L，红细胞压积0.20。无严重的病毒、细菌感染。非妊娠及哺乳期患者。对生物制品无过敏反应者。排排 除除 标标 准准颅内转移；心、肝、肾功能不全；有精神或心理疾病；正在接受放疗、化疗或其他全身抗肿瘤治疗者；同时存在其他恶性肿瘤及传染性疾病者；大手术伤口未完全愈合者；怀孕期或哺乳期妇女；对生物制品过敏反应者；T细胞淋巴瘤患者患者选择患者选择：应严格遵守CIK细胞治疗适应症和禁忌症CIK临床应用指导1.1.细胞采集细胞采集细胞来源细胞来源CIKCIK来源来源优点优点缺点缺点自体自体“用自己的细胞治疗自己的病”，安全性好，可避免由于交叉感染引发其他疾病恶性肿瘤患者已存在不同程度的免疫机能受损，CD3+、CD4+、CD8+细胞数量降低同种异体同种异体遗传背景相对接近且血型相同，相对安全可靠。CIK细胞活化和扩增能力较患者自体明显优越需同型血（RH型相同），培养后CIK细胞质量不等脐血脐血脐血来源广泛、采取方便、免疫原性弱，脐血CIK细胞，扩增潜力极强，且杀伤活性高暂无骨髓骨髓骨髓来源的CIK细胞在细胞毒方面与外周血CIK细胞相比无显著性差异骨髓来源不便，其CIK细胞增殖能力较外周血来源的CIK细胞稍差CIK临床应用指导外周血采集前相关检查外周血采集前相关检查：（1 1）患者应提供的化验结果有：）患者应提供的化验结果有：血常规，感染筛查，病毒拷贝数检测和血生化全项（7天内有效），肿瘤标志物和CT或X光片、B超（30天内有效），以进行疗效评价。（2 2）患者采血前注意事项：）患者采血前注意事项：a)患者清晨抽血前可以进食，但勿食用油腻食物b)抽血前12小时不能输液 c)进行放化疗的患者：放化疗前或化疗后淋巴细胞计数正常后取血。已冻存细 1111111胞的情况除外。d)连续两个疗程治疗时，取血和回输细胞在时间上会有交叉。取血必须在细胞 1111111回输之前。CIK临床应用指导 （3 3）外周血采集）外周血采集 血常规，生化和病毒学检查均正常，淋巴细胞绝对值不低于 0.80.810106 6/ml /ml 一般成年患者采集80100ml80100ml外周血CIK临床应用指导2.2.细胞培养细胞培养提取单个核细胞提取单个核细胞 利用密度梯度离心法进行单个核细胞的分离。3.3.体外诱导体外诱导CIKCIK细胞细胞 在细胞悬液中添加一定浓度的细胞因子（CD3单克隆抗体、TNF、IL-2等），培养1420天。细胞回输数量细胞回输数量：12109/次CIK临床应用指导4.4.终产品检测终产品检测回输前进行微生物和各种传染病病毒检测，自检和第三方检测同时进行，确保细胞制剂符合临床要求。细胞活力和细胞计数流式细胞仪（FCM,美国）检测细胞膜标志，CD3+CD56+效应细胞比例同位素释放试验检测细胞杀伤性CIK临床应用指导5.5.回输患者回输患者回输途径回输途径全身治疗：通过静脉进行滴注（使用输血器回输）局部治疗：是将收获的CIK细胞直接注入病灶部位(胸、腹腔积液患者直接注入胸、腹腔内)回输时间间隔回输时间间隔 第1420天输注CIK细胞，可每天1次，连续3d为1个疗程；也可2d 1次，3次为1个疗程。单次回输时间：一般为0.51h，如果远程运送应低温冷藏，控制在12小时内回输。CIK临床应用指导回输前注意事项回输前注意事项：（1）接受本治疗前2周内应终止放疗或化疗；（2）患者的血常规、血生化指标在正常值范围内，乙肝两对半、丙肝抗体等检查正 常，患者心肺功能应在正常状况。同时应了解患者是否是过敏体质等；（3）细胞输注前先测量体温，如体温超过38.538.5，及时通知GMP实验室暂不输注；（4）告知患者具体的回输时间，确保病人每次回输能顺利进行。回输中的护理回输中的护理（1）严格无菌操作，用一次性输血器回输，以过滤抱团的细胞；（2）输注前轻轻摇匀，防止细胞凝集。开始输注时速度为20d/min，观察10min后无 不良反应，可将滴数调为6080d/min；（3）为了防止细胞堵管或粘附管壁，输注过程应轻弹输血管道保持输注通畅，若发现输血器过滤网中有成团细胞，可予生理盐水冲洗后再输入；CIK临床应用指导6.6.随访及疗效判定随访及疗效判定疗效判定指标疗效判定指标具具 体体 内内 容容免疫学指标应用荧光活化细胞分选法（FACS）检测患者CD3/CD4/CD8/CD16/CD56等膜标志表达变化情况，以了解患者免疫功能上升状态肿瘤标志物根据患者病情，检查相应的肿瘤标志物，检测其含量变化形态学检查B超或CT,MRI等影像学手段检测瘤体变化临床指标评估生活质量评分行为状况评分标准(Karnofsky 计分制)WHO 制定的肿瘤缓解评定标准分为:完全缓解(CR),部分缓解(PR),稳定(SD)和进展(PD)毒 副 作 用回输中或回输后35天是否有发热，关节酸疼或过敏现象国内外临床应用报告Sangiolo DCytokine induced killer cells as promising immunother-apy for solid tumors J.Cancer，2011，2：363-368王志华，等CIK细胞治疗癌症：国际临床试验的现状及展望中国肿瘤生物治疗杂志.2013年4月，20(2)CIK细胞过继免疫治疗技术在临床得到广泛应用，通过结合手术，放化疗等治疗方案，均取得较好的临床治疗疗效国内外临床应用报告1.CIK1.CIK细胞治疗肝癌细胞治疗肝癌 检测30例健康志愿者和98例晚期肝癌患者经导管肝动脉栓塞（TACE）术前、术后第7天、CIK回输后第7天的外周血T细胞亚群变化，并观察CIK细胞治疗的毒副反应。陈敬华等.CIK细胞治疗晚期肝癌患者免疫功能变化及安全性评价.JournalofbasicandclinicaloncologyVol.26No.4Aug.2013结论：1.肝癌患者外周血中具有免疫效应的T淋巴细胞比例明显低于健康志愿者；2.TACE 术后序贯CIK治疗，外周血中效应T淋巴细胞比值升高，可提高晚期 肝癌患者的细胞免疫功能，有助于降低患者术后的复发和转移。国内外临床应用报告2.CIK2.CIK细胞联合手术和放疗治疗胃癌细胞联合手术和放疗治疗胃癌 天津医科大学附属肿瘤医院195例胃癌患者行手术后分：联合治疗组：65例化疗联合CIK治疗（1个周期分2次回输，13.07109 个细胞/次，中间间隔1d，每月一疗程，125个疗程不等）；单纯化疗组：130例单纯化疗。结果表明：CIK可明显延长患者35年无进展生存率，而且随着CIK 治疗次数增加，疗效更显著。樊永丽等.胃癌患者术后化疗联合CIK免疫治疗的临床疗效.J中国肿瘤生物治疗杂志.2012,19(2)中位存活中位存活时间联合组：96月化疗组：32月 P=0.001中位无疾病中位无疾病进展展时间联合组：36月化疗组：23月 P=0.011国内外临床应用报告3.CIK3.CIK细胞治疗肺癌细胞治疗肺癌 云南省肿瘤医院选取310例非小细胞肺癌患者，均行手术化疗，系统治疗后按是否给予CIK细胞治疗分为CIK细胞治疗组（210例，每年4次治疗,单次回输细胞量为12109 个细胞）和常规治疗组（100例）复复发转移移中位中位时间患者生存期患者生存期CIKCIK细胞胞治治疗组4143常常规治治疗组3236p p值0.0080.023金从国，等肺癌患者外周血CIK细胞培养质量与疗效相关性的分析.中华肿瘤防治杂志，2013,20(10):778781结论：1.CIK细胞治疗组患者转移复发率低于常规组，出现转移复发的时间延长 2.CIK细胞治疗组患者总生存率高于常规治疗组，总生存期明显延长国内外临床应用报告4.4.CIKCIK治疗消化系统肿瘤治疗消化系统肿瘤 合肥凤凰肿瘤医院生物免疫治疗中心收治的中晚期（期）消化道恶性肿瘤患者118例，患者接受14个疗程,回输细胞量为2109 个细胞/次。王志华等.自体CIK细胞治疗中晚期消化道恶性肿瘤临床疗效评估.J临床研究2013,10（21）结论结论：CIK治疗恶性消化道肿瘤安全可靠，副作用小，疗效确切，并能有效改 善患者细胞免疫状态，提高患者生存质量，抑制肿瘤增长，提高治疗效果。总 结CIK属于体细胞免疫疗法范畴，在细胞治疗上具有杀瘤谱广，杀伤性强等特性；CIK临床上常用于手术、放化疗后或无法接受常规治疗的肿瘤患者，可有效清除残留微小病灶和转移肿瘤细胞；CIK 逐步成为肿瘤治疗中重要的综合治疗方法，可有效提高肿瘤患者生存质量和延长生存时间，实现长期带瘤生存。景源生物专家团队技术总监：魏光伟山东大学教授，博士研究生导师“泰山学者”，“985工程”海外引进学术骨干美国加州大学旧金山分校（University of California San Francisco）客座教授美国劳伦斯-伯克利国家实验室（Lawrence-Berkeley National Laboratory）客座研究员主要研究方向：1.癌基因在上皮-间质细胞转化、肿瘤干细胞形成中的分子机制及干预措施 2.基于生物信息学分析，研究癌基因、抑癌基因在肿瘤复发、转移中的作用、分 子机制和临床意义 3.以动物模型为基础，结合临床数据，研究恶性肿瘤复发、转移、治疗等的生物 标志物 4.应用shRNA文库筛选技术，寻找、分析组织干细胞分化、恶性转化的功能基因及相关机制 景源生物专家团队技术顾问：徐国彤同济大学教授，博士研究生导师，医学院院长曾任美国北德克萨斯大学健康科学中心解剖与细胞生物学系助理研究员临床视觉科学实验室课题组长(PI)和中科院干细胞生物学重点实验室课题组长2007年担任科技部重大科学计划（干细胞资源库与关键技术平台建设项目）首席科学家，中国第一届干细胞学会会长。景源生物专家团队技术顾问：叶胜龙复旦大学复旦大学教授，复旦大学肝癌研究所副所长、医学院中山医院肝肿瘤内科主任、教育部癌变与侵袭原理重点实验室主任、教授、博士生导师主要研究方向：肝脏肿瘤的基础与临床研究，肝癌复发转移的防治，以肿瘤的生物治疗（免疫与基因治疗）为重点研究方向。景源生物专家团队技术顾问：郭全义解放军301医院主任医师主要从事于脊柱外科矫形、外科、小儿骨科、手外科、特别是骨及软组织肿瘤的诊断和治疗。擅长于骨科专业的手术，如四肢骨肿瘤的保肢，及脊柱肿瘤的切除等。对骨及软组织肿瘤的化疗、特别是以大剂量甲氨喋呤为主的综合化疗有丰富的经验，能够独立完成骨转移瘤的手术和化疗。对转移瘤的治疗有新的观点和方法。景源生物专家团队技术顾问：安沂华神经外科学博士，主任医师，武警总院神经干细胞移植科主任参与英国皇家医学会与韩国神经科学研究所关于脑氧化性损伤的合作研究课题，在国内外杂志上发表多篇相关论文。擅长神经干细胞移植治疗小儿脑瘫。景源生物专家团队技术顾问：常晓天山东省泰山学者特聘专家山东省医疗卫生系统学科带头人；山东大学博士生导师山东省千佛山医院医学研究中心主任主要研究方向：类风湿性关节易感基因和肿瘤标志物研究景源生物合作单位公司与以上院校和医院建立了长期战略合作关系，由以上著名科研机构的研究专家和临床专家为景源生物提供细胞制备、实验室管理、科研计划制定、临床研究方案设计、实施等具体工作的指导。景源生物实验室景源生物在中国科学院院士杨胜利先生科研团队的指导下，严格按照国家GMP标准，建成拥有国际先进水平的1000层流净化实验室。景源生物实验室ROOM-6ROOM-5景源生物实验室整体洁净程度达到万级，操作区洁净程度达到百级，保证了细胞培养在严格的无菌环境中进行。景源生物实验室ROOM-4景源生物实验室仪器设备、耗材等均采用国外进口，所有试剂、因子均为进口无动物源成分，保证了细胞制剂的安全性。景源生物专利技术和研发团队景源生物的细胞制备严格执行FDA标准，应用了十余项国内外专利技术，提供与同类产品相比纯度更高、活性更好、功能性更强、安全性更高的细胞制剂。景源生物在魏光伟教授的带领下，正在研究肿瘤干细胞形成的分子机制及干预措施。随着一些肿瘤干细胞表面标志物的发现，未来的我们可以针对不同的肿瘤实施靶向免疫细胞治疗，从根本上杀死肿瘤干细胞，达到彻底治愈肿瘤的目的。