甘草检验操作规程.doc

WA1302·049-01
第 4 页 共 4页

起 草： 日期：
审 核： 日期：
批 准： 日期：
生效日期： 签字：

拷贝号：

变更记载：
制定（变更）原因及目的：
公司更名。
修订号
批准日期
生效日期
00

01

02

分发部门
生产技术部 [ ]份
质量部QA [ ]份
质量部QC [ ]份
一 车 间 [ ]份
二 车 间 [ ]份
三 车 间 [ ]份
设备动力科 [ ]份
物 控 部 [ ]份
总 经 办 [ ]份
综 合 部 [ ]份

甘草检验操作规程
1. 适用范围：适用于甘草药材进厂检验。
2. 职责
检验员：严格按检验操作规程进行检验。
QC主管：监督检查执行情况。
3. 性状：取本品观察。
3.1. 甘草
根呈圆柱形，长25~100cm，直径0.6~3.5cm。外皮松紧不一。表面红棕色或灰棕色，具显著的纵皱纹、沟纹、皮孔及稀疏的细根痕。质坚实，断面略显纤维性，黄白色，粉性，形成层环明显，射线放射状，有的有裂隙。根茎呈圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓。气微，味甜而特殊。
3.2. 胀果甘
根及根茎木质粗壮，有的分枝，外皮粗糙，多灰棕色或灰褐色。质坚硬，木质纤维多，粉性小。根茎不定芽多而粗大。
3.3. 光果甘草
根及根茎质地较坚实，有的分枝，外皮不粗糙，多灰棕色，皮孔细而不明显。
3.4. 甘草饮片
本品为2～4mm厚的片，表面红棕色，粗糙，切面黄白色，具菊花纹，多纤维或显粉。气微，味甜而特殊。
4. 鉴别
4.1. 横切面：照《药材显微鉴别法操作规程》（WA1302·025）横切片制片。
本品横切面：木栓层为数列棕色细胞。皮层较窄。韧皮部射线宽广，多弯曲，常现裂隙；纤维多成束，非木化或微木化，周围薄壁细胞常含草酸钙方晶；筛管群常因压缩而变形。束内形成层明显。木质部射线宽3~5列细胞；导管较多，直径约至160μm；木纤维成束，周围薄壁细胞亦含草酸钙方晶。根中心无髓；根茎中心有髓。
4.2. 粉末特征：照《药材显微鉴别法操作规程》（WA1302·025）粉末制片。
粉末淡棕黄色。纤维成束，直径8~14μm，壁厚，微木化，周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸钙方晶多见。具缘纹孔导管较大，稀有网纹导管。木栓细胞红棕色，多角形，微木化。
4.3. 薄层鉴别
4.3.1. 仪器及器皿：粉碎机、分析天平、冷凝管、水浴锅、分液漏斗、蒸发皿、1%氢氧化钠硅胶G薄层板、层析缸、电热恒温干燥箱、紫外光灯、试剂瓶。
4.3.2. 试剂：乙醚、甲醇、正丁醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸、乙醇、硫酸、水。
10%硫酸乙醇溶液：量取10ml硫酸于试剂瓶中，沿壁缓缓加入乙醇90ml，摇匀，即得。
醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15：1：1：2）展开剂：量取醋酸乙酯150ml，甲酸10ml，冰醋酸10ml，水20ml于试剂瓶中，摇匀，即得。
4.3.3. 试验原理：薄层色谱法（WA1302·009）。
4.3.3.1. 操作方法
l 供试品溶液的制备
取本品粉末1g，加乙醚40ml，加热回流1小时，滤过，药渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。
l 甘草对照药材溶液的制备
取甘草对照药材1g，同供试品溶液方法制成对照药材溶液。
l 甘草酸铵对照品溶液的制备
取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。
l 点样、展开、检视
吸取上述三种溶液各1~2μl分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15：1：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。
4.3.3.2. 判断
若供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，则判符合规定；反之，则判不符合规定。
5. 水分：照《水分测定法操作规程》测定（WA1302·018）。
5.1. 若水分≤12.0%，则判符合规定。
5.2. 若水分＞12.0%，则判不符合规定。
6. 灰分
6.1. 灰分：照《灰分测定法操作规程》测定（WA1302·022）。
6.1.1. 若总灰分≤7.0%，则判符合规定。
6.1.2. 若总灰分＞7.0%，则判不符合规定。
6.2. 酸不溶性灰分：照《灰分测定法操作规程》测定（WA1302·022）。
6.2.1. 酸不溶性灰分≤2.0%，则判符合规定。
6.2.2. 酸不溶性灰分＞2.0%，则判不符合规定。
7. 有机氯农药残留量：照《有机氯类农药残留量测定法操作规程》测定（WA1302·021）。
7.1. 判定
7.1.1. 若六六六（总BHC）≤20ppm，滴滴涕（总DDT）≤20ppm，五氯硝基苯（PCNB）≤10ppm，则判符合规定。
7.1.2. 若其中任何一项超出限度，则判不符合规定。
7.2. 相对偏差：≤2.5%。
8. 含量测定：照《高效液相色谱法操作规程》测定（WA1302·010）。
8.1. 仪器设备：高效液相色谱仪、超声振荡器（功率250W，频率20kHz）、分析天平
8.2. 试剂与试药：甲醇、0.2mol/L醋酸铵溶液、冰醋酸、甘草单铵盐对照品
8.3. 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（67：33：1）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
8.4. 对照品溶液的制备
取甘草单铵盐对照品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。（每1ml中含甘草酸单铵盐对照品0.2mg，折合甘草酸为0.1959mg）
8.5. 供试品溶液的制备
取本品中粉约0.3g，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相约45ml，超声处理（功率250W，频率20kHz）30分钟，取出，放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，即得。
8.6. 测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
8.7. 判断
8.7.1. 若甘草酸≥2.0%，则判符合规定。
8.7.2. 若甘草酸＜2.0%，则判不符合规定。
8.8. 相对偏差：≤1.5%
9. 复检周期：第一次复检周期6个月，第二次复检周期2个月。
10. 编号：Y-010
11. 用途：用于银翘合剂。
12. 编制依据
《中国药典》2000年版一部附录
《四川省中药饮片炮制规范》
《甘草质量标准》 WA1101·010