454测序技术-原理和流程复习课程.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,测序反应以磁珠上大量扩增的,ssDNA,为模板，每次反应加入一种,dNTP,进行合成反应。如果这种,dNTP,能与待测序列配对，则会在合成后释放焦磷酸基团。释放的焦磷酸基团会与反应体系中的,ATP,硫酸化酶反应形成,ATP,。生成的,ATP,和荧光素酶共同氧化反应体系中的荧光素分子并发出荧光。测序反应产生的荧光信号由放置在,PTP,板另一侧的,CCD,照相机记录，再经过计算机分析转换为测序结果。由于每种,dNTP,在反应中产生的荧光颜色不同，因此可以根据荧光的颜色来确定被测分子的序列。反应结束后，游离的,dNTP,会在双磷酸酶的作用下降解,ATP,，导致荧光淬灭，从而使反应体系再生,.,