未成熟网织红临床应用.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,未成熟网织红细胞指数,的临床应用,温州医学院附属第一医院,一、概 念,未成熟网织红细胞指数：,（,immature reticulocyte fraction,，,IRF,）,是指,幼稚,的或,未成熟,的网织红细胞,（即含高,RNA,的网织红细胞）,与,总的,网织红细胞的比值。,二、检 测 原 理,未成熟网织红细胞的,噻唑橙、碱性槐黄,荧光染料 荧光强度,新亚甲蓝、嗪,750,光散射,未成熟网织红细胞显示出,极亮,的荧光强度,或,/,和,较强,的光散射特征。,三、检测,IRF,的仪器概况,1.,Sysmex,XE,2100,血细胞分析仪,R,3000,网织红细胞分析仪,碱性槐黄,荧光,染料 ,前向角散射光,侧向荧光,将,Ret,分为 低荧光强度,Ret -LFR,中荧光强度,Ret -MFR,高荧光强度,Ret -HFR,IRF,HFR+MFR,激光束,强度,2.,ABXPENTRA,120,网织红细胞分析仪,噻唑橙,荧光,染料,RNA,微孔 细胞阻抗信号 体积,激光束,垂直荧光 结构,将,Ret,分为 低,RNA,含量,-Ret L,中,RNA,含量,-Ret M,高,RNA,含量,-Ret H,IRF,Ret M+Ret H,3.拜尔,DVIA,120,血细胞分析仪,染料嗪,750,RNA,低角光散射 大小,高角光散射 血红蛋白浓度,光吸收信号,RNA,含量,固体激光二极管,4.雅培,CELL-DYN,3700,血细胞分析仪,新亚甲蓝,RNA,0,光散射 排除血小板,10,光散射 测定,RBC,和,Ret,90,光散射 测定,Ret,IRF,90,光散射强度,氦氖激光,5.库尔特血细胞分析仪,新亚甲蓝染料 ,电阻法 细胞体积,高频传导技术 细胞内部信息,激光散射光 细胞表面及颗粒特征,高光散射区域数,/,总区域,技术,四、,IRF,的 临 床 应 用,（一）骨髓移植的监测作用,认为,IRF,与绝对中性粒细胞计数,(,ANC,),的变化趋势极为,一致,并对恢复骨髓活性的反应,超过,了,ANC。,（,临床或亚临床感染时能够引起,ANC,受抑,）,IRF,较移植前,增加,20%,提示骨髓红系植活。,与,Ret,比较,提前,了,一半,时间。,(,二,)、,贫血诊治的观察价值,1.,EPO,对肾性贫血治疗过程中的应用,发现,Ret,和,IRF,在,2,后明显增高,而其它红细胞参数在早期尚未检出其疗效反应。,2.在肾移植过程中的应用,当,IRF,在移植后,升高,25%,以上时,较网织红细胞绝对数平均,早,上升,7,认为,IRF,是肾移植后红系生成,最敏感,的早期标志物。,3.,IRF,和,Ret,在一般性贫血中的应用,临床诊断,Ret IRF,AA,低 低,HA,高 高,叶酸或,VitB12,缺乏,低/正常,高,地中海贫血 正常,/,高 正常,/,高,铁缺乏 低/正常,高,慢性疾病 低/正常 正常,骨髓再生 低,高/正常,增生减低性贫血 低 低,失血/缺氧 正常,/,高 高,五、对,IRF,在肾移植过程中 的变化及意义的探讨,(一）,目的,探讨肾移植手术后未成熟网织红细胞指数（,IRF）,的变化规律及临床意义。,（二）标 本 的 来 源,正常对照组 50例我院健康体检者,各种患者组,32例肾移植患者,（手术前、手术后3天、7天、,14天、21天、28天和56天,不同时间段的标本）,（三）标 本 的 采 集,1.采血,1,mL,+,15,l,15%,EDTA-K,2,充分混匀，并在,2小时内,测定完毕。,2.采血,2,mL,于空白试管中，分离血清。,（四）测 定 方 法,1、,EDTA-K,2,抗凝血,在,GEN-S,血细胞分析仪上,测定,IRF,、,Ret%,、,RBC,、,Hgb,，,采用配套试剂。,2、血清标本于日立7600生化分析仪上,测定,Cr,和,BUN,（五）统 计 学 处 理,均数标准差(,s),组内比较采用配对,t,检验,两组间比较采用两样本均数,t,检验,变量间的变化采用相关分析法,（六）结 果,表 肾移植手术前、后不同时间段,IRF、Ret%、RBC、Hgb、Cr,和,BUN,变化及与对照组的比较(,xs),组别 例数,IRF Ret%RBC Hgb Cr BUN,(10,12,/L)(g/L)（mmol/L）（mmol/L）,对照组 50 0.2590.066 0.0120.004 4.630.42 141.411.3 90.06.8 5.961.55,手术前 32 0.2280.079 0.0160.009 3.020.75,88.821.2,640.9259.6,19.937.45,术后3天 32,0.2750.060,0.0150.007 3.170.58,93.117.9,243.6123.9,12.914.63,术后7天 32 0.3450.096,0.0130.008 3.180.52,91.815.5,273.0285.3,13.626.80,术后14天 32 0.3080.118,0.0160.009 3.070.48,88.814.6,194.0149.4,13.668.11,术后21天 32 0.3040.132,0.0230.011,2.930.55,86.117.4,181.6158.5,12.467.91,术后28天 32 0.2590.050,0.0250.007,3.040.56,89.717.4,151.3124.4,10.775.01,术后56天 32 0.3110.079,0.0210.009,3.640.61,112.618.2,108.123.9,8.812.10,注：与对照组比较,P0.05,P0.01；,与手术前比较,P0.05,P0.01。,IRF,在移植后第3天就出现升高，第7天达到高峰,Ret%,在移植后第21天才高于移植前,RBC,和,Hgb,在第56天时显著高于移植前,IRF,的变化与,Cr、BUN,的量存有一定的负相关性,表中显示,IRF,是一个对于有足够骨髓储存的病人,1-3,天内轻微的红血球改变就能提供明显的证据,IRF,的升高是预期肾移植成功,重要的早期敏感的指标,IRF,是衡量肾移植成功和肾功能,得到改善的一个很好的指标。,（七）结 论,六、未成熟网织红细胞在实验性苯中毒中的变化,（一）目的,探讨慢性苯中毒时未成熟网织红细胞指数（,IRF）,的变化规律。,1、实验方法,实验动物：小鼠,分为对照组和实验组两组资料,对照组（,A）,玉米油2,ml/kg,实验组（,B）,苯+玉米油2,ml/kg,每周3次,，按注射次数不同分为,15次、18次、21次、24次,（二）方法,2、标本采集及要求,眶动脉血0.5,ml,6,ul.15%EDTA-K2,3、测定指标及方法,WBC,RBC,HB,PLT,RET%,IRF,MRV,血细胞分析仪,4、统计分析,各组数据以均数,标准差表示,实验组与,相应,对照组测定指标,比较采用两样本均数,t,检验,变量间的变化采用相关分析法,（三）结果,WBC,和,IRF,下降的幅度最明显且时间也最早,WBC,IRF,Ret%,Plt,RBC,Hgb,MRV,1、苯中毒临床特点：,造血系统异常是慢性苯中毒的主要特征之一，,早期中毒以白细胞波动，持续降低为主，,以后有血小板减少，最后出现红细胞减少。,2、本研究显示,小鼠模型符合慢性苯中毒的变化规律。,IRF,和,MRV,是反映骨髓红系造血功能的早期,敏感指标。,（四）讨论,3.结论,慢性苯中毒引起再生障碍性贫血时,IRF,和,MRV,降低比其他红系指标早。,IRF,和,MRV,的检测,作为了解骨髓红系受抑制状态的,新型指标，具有一定的使用价值。,Thanks,Thanks,Thanks,Thanks,Thanks,