实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定.doc

实验一 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定目的初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。实验原理 1可溶性还原糖+斐林试剂（浅蓝-棕-）砖红色沉淀呈色反应 2脂肪+苏丹染液橘黄色（+苏丹染液红色） 3蛋白质+双缩脲试剂紫色反应实验程序一、可溶性还原糖的鉴定选材：含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。 制浆 制备组织液 过滤（用一层纱布）取液呈色反应 （注：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用）结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。关键步骤：斐林试剂现用现配及用量。二、脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡3-4小时）将子叶削成薄片 （1）最理想的薄片 （2）在薄片上滴2-3滴苏丹染液（2-3min）制片 （3）去浮色（4）制成临时装片观察：在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。结论：脂肪能被苏丹染液染成橘黄色。关键步骤：子叶削成理想薄片。三、蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：卵清或黄豆（浸泡1-2d）呈色反应结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。关键步骤：先加试剂A再加试剂B。实验的注意事项1 还原性糖：分子中含有醛基的糖。如葡萄糖、果糖、麦芽糖。但是蔗糖不是。2 斐林试剂很不稳定，帮应将组成斐林试剂的甲液（01g/ml的NaOH溶液）和乙液（005g/ml的CuSO4溶液）分别配制、储存，使用时，再临时配制，将4-5滴乙液滴入2ml甲液中，配完后立即使用。3 双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（01g/ml的NaOH溶液），造成碱性的的反应环境后，再加试剂B（001g/ml的CuSO4溶液）。否则，紫色会被Cu(OH)2的蓝色遮蔽。