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实验一 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
目的
初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
实验原理
1．可溶性还原糖+斐林试剂à（浅蓝-棕-）砖红色沉淀
呈色反应 2．脂肪+苏丹Ⅲ染液à橘黄色（+苏丹Ⅳ染液à红色）
3．蛋白质+双缩脲试剂à紫色反应
实验程序
一、可溶性还原糖的鉴定
选材：含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。
制浆

制备组织液 过滤（用一层纱布）

取液

呈
色
反
应

（注：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用）
结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。
关键步骤：斐林试剂现用现配及用量。
二、脂肪的鉴定
取材：花生种子（浸泡3-4小时）将子叶削成薄片
（1）最理想的薄片
（2）在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液（2-3min）
制片 （3）去浮色
（4）制成临时装片
观察：在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。

结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。
关键步骤：子叶削成理想薄片。
三、蛋白质的鉴定
选材与制备组织样液：卵清或黄豆（浸泡1-2d）

呈
色
反
应

结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
关键步骤：先加试剂A再加试剂B。
实验的注意事项
1． 还原性糖：分子中含有醛基的糖。如葡萄糖、果糖、麦芽糖。但是蔗糖不是。
2． 斐林试剂很不稳定，帮应将组成斐林试剂的甲液（0．1g/ml的NaOH溶液）和乙液（0．05g/ml的CuSO4溶液）分别配制、储存，使用时，再临时配制，将4-5滴乙液滴入2ml甲液中，配完后立即使用。
3． 双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/ml的NaOH溶液），造成碱性的的反应环境后，再加试剂B（0．01g/ml的CuSO4溶液）。否则，紫色会被Cu(OH)2的蓝色遮蔽。