不规则抗体筛查.doc

不规则抗体检查
不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。不规则抗体是指抗 Ａ、抗 Ｂ以外的血型抗体。ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗 Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。其多为ＩｇＧ抗体。主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理
利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂
2.1 5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）
2.2 凝聚胺试剂
2.3 直接抗人球试剂
外周血或静脉血
3. 操作步骤
3.1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆）2滴，加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3.2 各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
4. 筛选Ⅰ号细胞，筛选Ⅱ号细胞，筛选Ⅲ号细胞。对应的细胞反应格局表一张。
红细胞血型抗体筛选细胞反应格局表
序
号
RH-hr
Kidd
MNSs
Duffy
Diego
Kell
Lewis
P
试验结果
D
C
E
c
e
JKa
JKb
M
N
S
s
Mur
Fya
Fyb
Dia
Dib
K
k
Lea
LEb
P1

1
+
+
0
0
+
+
+
+
+
0
+
0
+
0
0
+
0
+
0
+
+

2
+
+
0
+
+
+
+
0
+
0
+
0
+
0
0
+
0
+
+
0
0

3
+
+
+
+
+
+
+
0
+
0
+
0
+
0
0
/
0
+
0
+
0

4. 临床意义
虽然不规则抗体筛选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合,在补体的参与下,使输入的红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应。患者出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿,严重时甚至危及其生命。因此,在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时,必须进一步作抗体鉴定,确定其特异性后,再输入无相应抗原的红细胞,才能达到安全输血之目的。
新生儿溶血病(ＨＤＮ)也是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合的ＩｇＧ性质的不规则抗体,引起的同种被动免疫性疾病。凡是以ＩｇＧ性质出现的不规则抗体,理论上都可以引起ＨＤＮ,因为ＩｇＧ性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环,破坏胎儿红细胞,引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大,甚至并发核黄疸。因此对有输血史或妊娠史的孕妇也应作不规则抗体筛选,若检测出不规则抗体,应作出相应的预防和治疗。Ｒｈ血型中Ｄ抗原的抗原性强于Ｅ抗原的抗原性,因此产生抗 Ｄ抗体的几率大于抗-Ｅ抗体。抗 Ａ1抗体为Ａ亚型中不规则抗体,它的存在提示我们在注意ＡＢＯ血型以外的不规则抗体的同时,也应高度重视ＡＢＯ亚型中的不规则抗体,因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。抗Ｍ抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一般在体内不能引起溶血反应,但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意,因为此类抗体可激活补体。当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4～20℃)时,可发生溶血反应。
不规则抗体产生大多为Ｒｈ血型系统,除抗Ｄ外,其他如抗Ｅ,抗Ｅｃ,抗Ｃｅ检出率占Ｒｈ系统67.8%,提示Ｒｈ阳性患者输血也可引起溶血反应,且机率较高.根据我国汉族人群Ｒｈ抗原分布特点,Ｅ抗原阳性比Ｄ抗原阳性低,产生抗Ｅ抗体的机率高于抗Ｄ抗体,故Ｒｈ血型系统Ｄ抗原阳性Ｅ抗原阴性者输血不容忽视.Ｒｈ阴性个体免疫后产生抗Ｄ的机率为70.9%,产生的抗体其效价在体内会逐渐下降,甚至常规试验会漏检,若以后作为受血者输入Ｒｈ(Ｄ)阳性血刺激时,会很快出现免疫性回忆反应.抗体效价会在1～2ｗｋ内达到高峰,引起迟发性血管外溶血,且发生在输血后几天.造成的输血无效以及溶血,易被临床忽视.溶血反应的强度与抗体效价成正比关系,抗体产生的强度增加溶血反应愈严重.抗Ｍ、抗Ｌｅａ、抗Ｐ1均较少见,但抗Ｌｅａ抗体可引起严重的溶血性输血反应,所以不能作为供血者,如为受血者时应给Ｌｅ(ａ-ｂ-)血液输入.抗Ｍ抗体只有37℃或抗球蛋白试验出现阳性时才具有临床意义.抗Ｐ1最理想的反应温度为4℃,偶可在37℃查出.抗Ｐ1抗体很少在体内造成溶血,几乎总是ＩｇＭ型抗体,所以不能通过胎盘,不会造成ＨＤＮ.冷凝集素在配血时可忽略.自身抗体在自身溶血性贫血时出现较多,一直以来是输血的一大难题,我们仍遵循一般输血原则.
综上所述,不规则抗体是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的主要因素之一, 对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例的诊断有临床意义。因此为了保证输血安全,提高输血疗效,减少或杜绝溶血性输血反应的发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一。