小鼠转基因干眼模型.ppt

小鼠转基因干眼模型小鼠转基因干眼模型S SS的基的基础研究，离不开一个恰当的研究，离不开一个恰当的动物模型。物模型。SSSS小鼠模型在研究小鼠模型在研究SSSS病理、病理、药效等多方效等多方面都面都为一个一个强有有为的工具。因此在的工具。因此在过去的几十年里，去的几十年里，SS小鼠模型受到广泛关注以及深小鼠模型受到广泛关注以及深入的研究，并取得一定的成果。入的研究，并取得一定的成果。小鼠与人的小鼠与人的遗传相似度十分高，并且其很适合做基因克隆与相似度十分高，并且其很适合做基因克隆与转基因修改，因此可以用基因修改，因此可以用小鼠模型小鼠模型阐述人述人类SSSS等多种疾病等多种疾病发生机制。生机制。但是，使用小鼠来模但是，使用小鼠来模拟人人类SSSS的的发生亦存在生亦存在许多不足；例如，人与小鼠的居住多不足；例如，人与小鼠的居住环境差境差异，异，进化史的不同，人与小鼠的固有免疫和适化史的不同，人与小鼠的固有免疫和适应性免疫性免疫间存在差异等。所以在我存在差异等。所以在我们使使用小鼠模用小鼠模拟人人类SS发生生时，须注意注意SSSS小鼠小鼠仅能反映出能反映出SSSS的某一些或某一的某一些或某一类的特征，而的特征，而不能表不能表现出其整个出其整个发病病过程的特征。程的特征。此外，由此外，由小鼠模型所得出的小鼠模型所得出的实验数据数据应参考各品系小鼠不同的参考各品系小鼠不同的遗传背景及各自特点背景及各自特点进行行综合分析合分析，这样得出的得出的实验结果才真果才真实可靠。下面主要从可靠。下面主要从SSSS自自发小鼠模型，基因工小鼠模型，基因工程程SSSS小鼠模型，小鼠模型，实验诱导型型SSSS小鼠模型三方面小鼠模型三方面论述。述。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：许许多多SS自自发发模型小鼠都起源于非爬胖糖尿病小鼠模型小鼠都起源于非爬胖糖尿病小鼠(NOD小鼠小鼠),其中包括其中包括N0D.B10-H26小鼠小鼠，C57BL/6小鼠小鼠，N0D-AeclAec2小鼠小鼠；其他品系的小鼠有其他品系的小鼠有NFS/sld小鼠小鼠，IQI/Jic小鼠小鼠以以及及Aly/aly小鼠。小鼠。1.1.非肥胖糖尿病小鼠非肥胖糖尿病小鼠(NOD小鼠小鼠)NOD小鼠不小鼠不仅仅是是I型糖尿病自型糖尿病自发发模型小鼠模型小鼠，同同时时也是也是SS的自的自发发模型小鼠。模型小鼠。其自其自发发I型糖尿病的主要机理是型糖尿病的主要机理是，NOD小鼠小鼠胰胰腺遭到腺遭到淋巴淋巴细细胞的胞的浸润浸润而而导导致致胰腺胰腺炎炎引起引起胰腺胰腺细细胞破坏胞破坏，最最终导终导致膜致膜岛岛素的分泌不足。素的分泌不足。此外此外，NOD小鼠具有独特的主要小鼠具有独特的主要组织组织相容性复合体相容性复合体(MHC)II类类分子分子H-2g7而而导导致致NOD小鼠疾病易感性增加。序列位点小鼠疾病易感性增加。序列位点标记标记分析分析显显示示NOD小鼠小鼠I型糖尿病的型糖尿病的发发生与生与MHC I-Ag7密切相关密切相关，但但单单个个MHC I-Ag7不足不足以以引起引起I型糖尿病的型糖尿病的发发生生，表明亦有其表明亦有其他相关基因位点与自身免疫性糖尿病的他相关基因位点与自身免疫性糖尿病的发发生有关生有关。从从4 4周龄开始周龄开始N NOD小鼠胰腺中小鼠胰腺中CD4CD4+T T与与CD8CD8+T T细胞浸润明显增加。然而，细胞浸润明显增加。然而，NOD小小鼠胰腺破坏明显，糖尿病症状突出则发生在鼠胰腺破坏明显，糖尿病症状突出则发生在1414周龄左右。周龄左右。3030周龄的雌性周龄的雌性N NOD小鼠小鼠发生糖尿病的概率为发生糖尿病的概率为60-80%,60-80%,而雄性而雄性NODNOD小鼠发生糖尿病的概率为小鼠发生糖尿病的概率为20-30%20-30%。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.1.非肥胖糖尿病小鼠非肥胖糖尿病小鼠(NOD小鼠小鼠)除了能除了能够够在在NOD小鼠小鼠胰腺胰腺中中检测检测到炎性到炎性细细胞的浸胞的浸润润，在外分泌腺中亦可在外分泌腺中亦可发现发现淋巴淋巴细细胞胞的浸的浸润润而而导导致泪腺炎与致泪腺炎与涎涎腺炎腺炎。泪腺炎与。泪腺炎与涎涎腺炎的腺炎的发发生大生大约约是在是在12周周龄龄左右。左右。除了泪腺炎与除了泪腺炎与涎涎腺炎炎性腺炎炎性细细胞浸胞浸润润的病理与人的病理与人类类所所发发生的生的SS表表现现相似外相似外，NOD小鼠血小鼠血清中亦能清中亦能产产生多种与生多种与SS发发生相关的自身抗体生相关的自身抗体，例如抗核抗体例如抗核抗体(ANA)，抗抗SSA/Ro，抗抗SSB/La，抗抗120KDa-胞胞衬衬蛋白抗体蛋白抗体，抗毒抗毒蕈蕈碱受体碱受体3抗体抗体以及胰岛以及胰岛细细胞自身抗体等。胞自身抗体等。此外此外，据据报报道道NOD小鼠血清及唾液腺中亦能找到一小鼠血清及唾液腺中亦能找到一些些与与SS发发生相关的生相关的细细胞因子胞因子，例如例如IL-10，INF-，IL-7，MSCF，IL-17，IL-11，IL-5以及以及IL-8。由于由于NOD小鼠小鼠以以上上发发病病机制与人机制与人类类高度相似高度相似，故其被作故其被作为为一种主要的模型运用于一种主要的模型运用于SS的的研究研究。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.2.N0D.B 10-H2b小鼠小鼠N0D.B 10-H2b小鼠小鼠主要用于原主要用于原发发性性SS的研究的研究。N0D.B 10-H2b小鼠小鼠的最大特点便是不再有的最大特点便是不再有I型糖尿病的型糖尿病的发发生生，而而仅仅表表现现出出SS。因此因此N0D.B 10-H2b小鼠小鼠SS发发生生发发展展过过程中将不再受程中将不再受I型糖尿病的影响。型糖尿病的影响。与人体的与人体的SS的的发发生相生相类类似似，N0D.B 10-H2b小鼠小鼠SS的的发发生主要表生主要表现为现为B淋巴淋巴细细胞的异常活胞的异常活跃跃，刺激刺激B细细胞的异常增殖胞的异常增殖，产产生生过过多的自身抗体。多的自身抗体。有学者通有学者通过应过应用中用中华华眼眼镜镜蛇蛇毒因子干蛇蛇毒因子干预预N0D.B 10-H2b小鼠以小鼠以探究探究补补体在体在N0D.B 10-H2b小鼠小鼠SS的的发发生中所起的作用生中所起的作用发现发现，中中华华眼眼镜镜蛇蛇毒因子由于能蛇蛇毒因子由于能够够特异性阻断特异性阻断C3分子而分子而降低小鼠外分泌腺腺体淋巴降低小鼠外分泌腺腺体淋巴细细胞的浸胞的浸润润以以及及结结核抗体核抗体(ANA)的表达水平。的表达水平。亦有学者运用亦有学者运用N0D.B 10-H2b小鼠小鼠探究性激素在探究性激素在SS发发病病过过程中所起作用程中所起作用，表明卵巢切除表明卵巢切除的的N0D.B 10-H2b小鼠小鼠患患SS的几率明的几率明显显上升且症状表上升且症状表现现突出突出，经经激素替代激素替代疗疗法后可得到法后可得到明明显显的改善。的改善。此外有此外有报报道道显显示表没食子儿茶没食子酸醋及示表没食子儿茶没食子酸醋及绿绿茶提取物皆能改善茶提取物皆能改善NOD与与N0D.B 10-H2b小鼠小鼠的的SS。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.3.NOD其他衍生其他衍生杂杂交小鼠交小鼠许许多其他多其他NOD衍生衍生杂杂交小鼠被用来交小鼠被用来检测检测某些特定的基因与蛋白在原某些特定的基因与蛋白在原发发性性SS发发病机制的病机制的作用。作用。NOD.IFN-/-与与NOD.IFN-R-/-小鼠小鼠外分泌腺并没有外分泌功能的外分泌腺并没有外分泌功能的损伤损伤，表明表明IFN-是引是引发发上皮上皮细细胞胞损伤损伤的关的关键键因素。因素。NOD Ig-/-小鼠被用来研究小鼠被用来研究B淋巴淋巴细细胞与自身抗体在引起胞与自身抗体在引起SS外分泌腺外分泌功能下降的外分泌腺外分泌功能下降的机理。机理。NOD.IL4-/-小鼠被用来探究小鼠被用来探究TH1与与TH2在引起在引起SS唾液腺炎性唾液腺炎性细细胞的浸胞的浸润润与唾液腺外分泌功与唾液腺外分泌功能降低所起到的作用能降低所起到的作用，结结果表明果表明，虽虽然在然在NOD小鼠中可小鼠中可见见到明到明显显的口腔干燥表的口腔干燥表现现以以及及唾液腺中明唾液腺中明显显的的T淋巴淋巴细细胞胞浸润，浸润，但在但在NOD.IL4-/-小鼠并没有出小鼠并没有出现现口腔干燥的症状口腔干燥的症状，表表明明TH1与与TH2在引起在引起SS小鼠小鼠口口腔干燥起到决定作用。腔干燥起到决定作用。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.4.NFS/sld 小鼠小鼠基因突基因突变变NFS/sld小鼠具有抑制舌下腺分化的常染色体小鼠具有抑制舌下腺分化的常染色体隐隐性基因性基因，能能够够影响腺体中腺泡影响腺体中腺泡细细胞分化成粘液分泌胞分化成粘液分泌细细胞。胞。NFS/sld小鼠模型小鼠模型-胞胞衬衬蛋白的异常水解是引起小鼠唾液腺蛋白的异常水解是引起小鼠唾液腺损伤损伤的最主要原因。的最主要原因。胸腺切胸腺切除的除的NFS/sld小鼠出小鼠出现现-胞胞衬衬蛋白活化蛋白活化，在出生后在出生后3天即可出天即可出现现SS样样表表现现，并且其淋并且其淋巴巴细细胞的浸胞的浸润仅润仅局限于外分泌腺。局限于外分泌腺。浸浸润润的淋的淋巴巴细细胞主要胞主要为为CD4+T淋淋巴巴细细胞胞，而而见见少量的少量的CD8+T淋淋巴巴细细胞与胞与B220+B淋淋巴巴细细胞。活化的胞。活化的CD4+T淋淋巴巴细细胞胞则导则导致唾液腺中致唾液腺中IFN-，IL-2，IL-10和和IL-12p40 mRNA的表达升高。的表达升高。NFS/sld小鼠外分泌腺中亦能小鼠外分泌腺中亦能检测检测到到导导管上皮管上皮细细胞抗体。胞抗体。NFS/sld小鼠体小鼠体内内检测检测到的到的120千道千道尔尔顿顿器官特异性的抗原与人体内的器官特异性的抗原与人体内的-胞胞衬衬蛋白序列是相一致的。但是当利用免疫蛋白序列是相一致的。但是当利用免疫荧荧光光标记标记法法检测检测SS患者血清患者血清时时，抗抗-胞胞衬衬蛋白自身抗体与抗蛋白自身抗体与抗SSA/Ro自身抗体和抗自身抗体和抗SSB/La自身抗体相比灵敏度与特异性相差自身抗体相比灵敏度与特异性相差较较大。大。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.4.NFS/sld 小鼠小鼠到目前到目前为为止基因突止基因突变变NFS/sld小鼠己被运用于多小鼠己被运用于多项项研究研究SS发发病机理的研究中。病机理的研究中。利用常利用常规剂规剂量的量的2,3,7,8-四四氯氯二苯并二二苯并二恶恶英干英干预预新生新生NFS/sld小鼠小鼠以以探探讨环讨环境因素在引境因素在引发发SS过过程中所起到的作用程中所起到的作用，结结果果显显示示2,3,7,8-四四氯氯二苯并二二苯并二恶恶英干英干预预后的后的NFS/sld小鼠唾液小鼠唾液腺及其他外分泌腺体中能腺及其他外分泌腺体中能够观够观察到明察到明显显的淋的淋巴巴细细胞浸胞浸润润。口服粘膜保口服粘膜保护剂护剂瑞己匹特瑞己匹特(a-(4-氯氯苯甲苯甲酰基酰基)氨基氨基-1,2-二二氢氢-2-氧代氧代-4-喹啉喹啉丙酸丙酸)能能够够抑制抑制CD4+T的活性及的活性及TH1的的产产生从而降低了自身抗体的生从而降低了自身抗体的产产生。生。实验证实实验证实免疫抑制免疫抑制剂剂环孢霉素环孢霉素能能够够明明显显改善改善NFS/sld小鼠眼干的症状。从金小鼠眼干的症状。从金线线吊吊乌龟乌龟中中生物碱千金藤素能生物碱千金藤素能够够抑制抑制NFS/sld小鼠中性粒小鼠中性粒细细胞的活性胞的活性，防止腺泡防止腺泡细细胞胞损伤损伤。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.5.IQI/Jic 小鼠小鼠和和NOD小鼠一小鼠一样样，IQI/Jic小鼠也是从小鼠也是从ICR小鼠培育而来。小鼠培育而来。6月月龄龄的的IQI/Jic小鼠唾液腺及泪小鼠唾液腺及泪腺中能腺中能够见够见到明到明显显的淋巴的淋巴细细胞浸胞浸润润灶灶，并且在雌性并且在雌性IQI/Jic小鼠胸腺中小鼠胸腺中B细细胞数量明胞数量明显显增增多。多。组织组织病理学病理学发现发现IQI/Jic小鼠不光在外分泌腺腺体中能小鼠不光在外分泌腺腺体中能见见到明到明显的淋巴细胞显的淋巴细胞浸浸润润，在其在其他非分泌性器官中亦能他非分泌性器官中亦能见见到到显显著的淋著的淋巴巴细细胞浸胞浸润润，例如例如肾脏肾脏、胰腺、胰腺、肺肺脏脏等。等。值值得注得注意的是在意的是在IQI/Jic小鼠血清中小鼠血清中仅仅能能检测检测到到结结核抗体的表达水平升高而自身抗核抗体的表达水平升高而自身抗SSA/Ro与与SSB/La并没有并没有检测检测到异常。到异常。涎涎腺炎腺炎发发生在雌性生在雌性IQI/Jic小鼠的各年齡段小鼠的各年齡段，且随着小鼠年且随着小鼠年龄龄的增的增长长涎涎腺炎症状逐腺炎症状逐渐渐加加重重；而雄性而雄性IQI/Jic小鼠小鼠涎涎腺炎的腺炎的发发病病较轻较轻且与年且与年龄龄无关。与人体无关。与人体发发生生SS特特征相似征相似，CD4+T细细胞所造成的外分泌腺体破坏胞所造成的外分泌腺体破坏较轻较轻，而而B220+B则则能引起外分泌腺大范能引起外分泌腺大范围围的炎性的炎性细细胞浸胞浸润润。研研究究表明表明IQI/Jic小鼠体内小鼠体内T淋淋巴巴细细胞活性的增胞活性的增强强能能够够增加器官内增加器官内Klk-13(激激肽肽释释放放酶酶-13)的的产产生生，因此因此Klk-13的的过过多多产产生可能是生可能是IQI/Jic小鼠出小鼠出现现SS样样表表现现的重要原因之一。的重要原因之一。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.5.IQI/Jic 小鼠小鼠尽管直到尽管直到8周周龄龄左右雌性左右雌性IQI/Jic小鼠小鼠颌颌下腺与雄性下腺与雄性IQI/Jic小鼠泪腺中才小鼠泪腺中才检测检测到明到明显显的的淋淋巴巴细细胞胞浸润，浸润，但大但大约约在小鼠四周在小鼠四周龄龄左右便可在左右便可在颌颌下腺与泪腺中下腺与泪腺中检测检测到到MHCII型分子型分子，CD11c+与与CD86+树树突状突状细细胞的存在胞的存在，表明表明树树突状突状细细胞与表皮胞与表皮细细胞可能是参与激活胞可能是参与激活CD4+T细细胞的关胞的关键键因素。因素。胸腺切除的胸腺切除的IQI/Jic小鼠在出生后小鼠在出生后3天天便可便可出出现严现严重的泪腺重的泪腺损伤损伤，其其损伤严损伤严重度与未重度与未进进行行胸腺切除胸腺切除术术16周周龄龄的的IQI/Jic小鼠相仿小鼠相仿，这这一一结结果表明年果表明年轻轻的的IQI/Jic小鼠体内的免疫小鼠体内的免疫调节调节性性T细细胞可能胞可能对对IQI/Jic小鼠自身免疫小鼠自身免疫紊乱紊乱起到一定的起到一定的调节调节作用。作用。最近研最近研究究表明伴随着表明伴随着IQI/Jic小鼠小鼠颌颌下腺腺体淋巴下腺腺体淋巴细细胞的浸胞的浸润润与功能的与功能的紊乱，紊乱，腺泡腺泡细细胞胞中存在着中存在着AQP5的分布异常。的分布异常。小鼠转基因干眼模型1.自自发小鼠模型小鼠模型 ：1.6.Aly/aly 小鼠小鼠Aly/aly小鼠主要是由于常染色体小鼠主要是由于常染色体纯纯合子合子隐隐性基因突性基因突变变而而导导致淋致淋巴巴组织发组织发育不全育不全，表表现现为为系系统统性淋性淋巴巴结结与集合淋与集合淋巴巴结结的缺失的缺失，脾脾脏脏与胸腺与胸腺结结构构紊乱紊乱。Aly/aly小鼠在小鼠在14周周龄时龄时开始自开始自发发的出的出现现唾液腺唾液腺以以及及涎涎腺炎症腺炎症，并随着年并随着年龄龄的増的増长长而逐而逐渐渐加重。加重。组织组织病理学病理学观观察察发现发现，其炎性其炎性细细胞的浸胞的浸润润主要主要以以CD4+T细细胞胞为为主主，浸浸润润特征特征为为由由导导管管周周围围区域向腺泡小叶逐区域向腺泡小叶逐渐扩渐扩散。散。Aly/aly小鼠的小鼠的发发病特点是病特点是泪腺浸泪腺浸润损伤润损伤情况情况比比唾液腺更唾液腺更为严为严重重，唾液腺中唾液腺中淋巴淋巴细细胞浸胞浸润损润损害害较轻较轻，有有时时甚至无淋甚至无淋巴巴细细胞的浸胞的浸润润。小鼠转基因干眼模型2.基因工程模型小鼠：基因工程模型小鼠：转基因与基因敲除鼠基因与基因敲除鼠 ：2.1.Id3 K0 小小鼠鼠转录调节转录调节因子因子Id3能能够够抑制碱性螺旋抑制碱性螺旋-环环-螺旋螺旋结结构域构域转录转录因子与因子与DNA的的结结合从而合从而对对免免疫疫细细胞及非免疫胞及非免疫细细胞的增殖及分化起到胞的增殖及分化起到调节调节作用作用。Id3同同时时也参与也参与T淋己淋己细细胞的胞的选择选择与分化的信号与分化的信号转导转导。Id3 K0 小鼠的基本特征小鼠的基本特征为为免疫系免疫系统统的改的改变变，结结外外边缘边缘区区B细细胞的增殖胞的增殖，前前B细细胞残存胞残存以以及出及出现现MHC限制性。并且限制性。并且这这一品一品系的小鼠将出系的小鼠将出现现与人与人类类相相类类似的似的SS。Id3 K0 小鼠在八周小鼠在八周龄龄唾液腺与泪腺唾液腺与泪腺导导管和血管周管和血管周围围将出将出现现淋巴淋巴细细胞的浸胞的浸润润，并且随着年并且随着年龄龄的增的增长长浸浸润润情况将加重。情况将加重。6至至12月月龄时龄时泪腺与唾液腺将只表泪腺与唾液腺将只表现为现为CD4+T淋巴淋巴细细胞的浸胞的浸润润，12月月龄龄左右左右时时可在血清可在血清中中检测检测到抗到抗SSA/Ro与与SSB/La抗体阳性。抗体阳性。值值得注意的是此系列小鼠得注意的是此系列小鼠早在早在6到到18周周龄时龄时便会便会出出现现SS样样表表现现，但此但此时时小鼠的外分泌腺并未遭到破坏并且此小鼠的外分泌腺并未遭到破坏并且此时时小鼠血清小鼠血清检查检查也未也未发现发现异常的自身抗体异常的自身抗体，表明表明SS的的发发病病还还有其他因素起作用有其他因素起作用。小鼠转基因干眼模型2.基因工程模型小鼠：基因工程模型小鼠：转基因与基因敲除鼠基因与基因敲除鼠 ：2.2.Ar K0 小鼠小鼠通常情况下通常情况下，女性出女性出现现自身免疫性疾病的概率与男性相比明自身免疫性疾病的概率与男性相比明显显要高要高，表明雌性激素在表明雌性激素在自身免疫性疾病的自身免疫性疾病的发发生生过过程中能起到重要作用。程中能起到重要作用。实验证实验证明雌性激素替代明雌性激素替代疗疗法能法能够够明明显显降低卵巢切除小鼠降低卵巢切除小鼠SS的的发发病。口服雌性激素能病。口服雌性激素能够够明明显显减减轻轻雌激素缺乏小鼠雌激素缺乏小鼠T淋淋巴巴细细胞所介胞所介导导的的涎涎腺炎腺炎以以及防止及防止涎涎腺腺细细胞的胞的调调亡。然而亡。然而，尚没有有关尚没有有关SS小鼠雌性激素受体缺乏的小鼠雌性激素受体缺乏的报报道。道。芳香化芳香化酶酶(Ar)基因主要是基因主要是调调控雌性激素的控雌性激素的产产生生，芳香化芳香化酶酶基因敲除小鼠在基因敲除小鼠在12周周龄时龄时会会表表现现出出T淋淋巴巴细细胞的异常增生并且出胞的异常增生并且出现现SS相相类类似的表似的表现现。这这一一类类小鼠小鼠发发病的特征是病的特征是以以B220+细细胞浸胞浸润为润为主主，导导致腺泡致腺泡细细胞胞结结构的破坏构的破坏以以及唾液腺功能的及唾液腺功能的损伤损伤。Ar K0小鼠血清中抗小鼠血清中抗-胞胞衬衬蛋白抗体化及蛋白抗体化及-胞胞衬衬蛋白水解片段与蛋白水解片段与SS患者患者组织损伤组织损伤相相类类似。似。ArK0小鼠体内并不能小鼠体内并不能检测检测到抗核抗体。到抗核抗体。小鼠转基因干眼模型2.基因工程模型小鼠：基因工程模型小鼠：转基因与基因敲除鼠基因与基因敲除鼠 ：2.2.Ar K0 小鼠小鼠在在ArK0小鼠体内可小鼠体内可发现轻发现轻度的脾度的脾肿肿大大，骨髓中骨髓中见见有异常的有异常的B淋淋巴巴细细胞增生。胞增生。对对雌激素雌激素缺乏所引起的缺乏所引起的SS小鼠小鼠发发病机制的研究表明使用雌激素病机制的研究表明使用雌激素，大豆大豆异黄酮异黄酮等等对这对这一一类类型的型的SS进进行治行治疗疗将有可能将有可能有有效。效。Rahimi Darabad R等研究表明等研究表明雌激素缺乏的雌激素缺乏的Ar K0年年轻轻小鼠小鼠虽虽然会影响其与雌激素相关然会影响其与雌激素相关的泪腺特异性基因的表达的泪腺特异性基因的表达，但其并不会表但其并不会表现现出出SS相关表相关表现现。这这些些研研究究也也许许表明表明Ar K0小小鼠尤其是年鼠尤其是年轻轻小鼠泪腺功能与小鼠泪腺功能与结结构的构的变变化除了受雌性激素的不足影响外亦受其他因素化除了受雌性激素的不足影响外亦受其他因素的影响。的影响。小鼠转基因干眼模型3.3.实验诱导型小鼠模型：型小鼠模型：3.1.Ro抗原免疫抗原免疫诱导诱导反复反复对对BALB/c小鼠腹腔小鼠腹腔进进行行60KDa Ro 自身抗原注射能自身抗原注射能够够引起表位引起表位扩扩展展，出出现现一些与一些与SS相相类类似的似的临临床表床表现现。例如出例如出现现唾液腺遭到淋唾液腺遭到淋巴巴细细胞的浸胞的浸润润，口腔干燥等表口腔干燥等表现现。其唾液腺中所浸。其唾液腺中所浸润润的淋的淋巴巴细细胞主要包括胞主要包括:45%CD4+T细细胞胞,18%CD8+T细细胞胞,35%CD19+B细细胞等。胞等。小鼠小鼠38周周龄时龄时在小鼠体内可在小鼠体内可检测检测到抗到抗SSA/Ro与抗与抗SSB/La抗体的抗体的产产生。生。到目前到目前为为止止Ro自身抗体引起小鼠自身抗体引起小鼠SS的的发发病机制尚有争病机制尚有争论论。此此类类SS小鼠模型最大的缺点小鼠模型最大的缺点是是BALB/c小鼠需反复小鼠需反复进进行腹腔注射行腹腔注射Ro自身抗原五个月上才能成模自身抗原五个月上才能成模。小鼠转基因干眼模型3.3.实验诱导型小鼠模型：型小鼠模型：3.1.Ro抗原免疫抗原免疫诱导诱导有有研究研究显显示使用自身抗原示使用自身抗原Ro60干干预预不同品系的小鼠不同品系的小鼠，所得到的所得到的结结果不尽相同。果不尽相同。SJL/J小鼠小鼠对对Ro60的刺激并不的刺激并不产产生免疫反生免疫反应应；C57BL/6小鼠小鼠经经Ro60刺激后刺激后虽虽有自身抗体有自身抗体的的产产生但并不能生但并不能观观察到表位察到表位扩扩展展现现象。象。并且并且SJL/J，C57BL/6与与PL/J小鼠外分泌腺小鼠外分泌腺均均未出未出现现淋淋巴巴细细胞浸胞浸润润情况情况以以及外分泌腺功能及外分泌腺功能丧丧失。失。DBA-2与与BALB/c小鼠外分泌腺均能出小鼠外分泌腺均能出现现淋淋巴巴细细胞的浸胞的浸润润，但只有但只有BALB/c小鼠外分泌功小鼠外分泌功能下降。能下降。小鼠转基因干眼模型3.3.实验诱导型小鼠模型：型小鼠模型：3.2.毒蕈碱受体毒蕈碱受体3肽肽段免疫段免疫诱导诱导许许多研究皆多研究皆证实证实SS患者体内患者体内产产生的抗生的抗毒蕈碱受体毒蕈碱受体3抗体由于能抗体由于能够够与唾液腺腺泡与唾液腺腺泡细细胞上胞上的的毒蕈碱受体毒蕈碱受体3特异性的特异性的结结合而合而导导致唾液腺的外分泌功能的致唾液腺的外分泌功能的丧丧失。失。实验实验表明表明毒蕈碱受体毒蕈碱受体3基因敲除小鼠唾液腺外分泌功能与正常小鼠相比下降基因敲除小鼠唾液腺外分泌功能与正常小鼠相比下降20%，而而毒毒蕈碱蕈碱1受体受体基因敲除小鼠唾液腺外分泌功能并未出基因敲除小鼠唾液腺外分泌功能并未出现现任何任何变变化化，同同时时将小鼠将小鼠毒蕈碱受体毒蕈碱受体1与受体与受体3基因敲除后小鼠唾液腺基因敲除后小鼠唾液腺则则将毫无外分泌功能将毫无外分泌功能，由此可由此可见见在在SS小鼠唾液腺外分小鼠唾液腺外分泌功能下降的泌功能下降的过过程中程中毒蕈碱受体毒蕈碱受体3起到更起到更为为关关键键的作用。的作用。最近的一最近的一项项研究研究报报道了道了毒蕈碱受体毒蕈碱受体3细细胞外第二胞外第二环环功能表位功能表位肽肽段段(208-227)的自身抗体的自身抗体诱诱发发幼年雌性幼年雌性NOD/LtJ小鼠小鼠免免疫反疫反应应的情况的情况，结结果果显显示示NOD/LtJ小鼠体内小鼠体内Th-1，Th-2，Th-17等等细细胞因子表达下降胞因子表达下降，泪腺与唾液腺中淋巴泪腺与唾液腺中淋巴细细胞的浸胞的浸润润情况得到改善。情况得到改善。这这一一结结果果显显示示毒蕈碱毒蕈碱3受体受体肽肽段段对对此此类类SS可能具有一定的治可能具有一定的治疗疗作用。作用。小鼠转基因干眼模型3.3.实验诱导型小鼠模型：型小鼠模型：3.3.CA免疫免疫诱导诱导碳酸酐酶碳酸酐酶(CA)是一种是一种锌锌酶酶，其主要的功能是催化二氧化碳可逆的水合作用。尽管机其主要的功能是催化二氧化碳可逆的水合作用。尽管机体内体内碳酸酐酶碳酸酐酶抗体是自身抗体是自身免免疫性疫性胰腺胰腺炎的典型表炎的典型表现现，但是有研究表明但是有研究表明许许多多SS患者体内患者体内亦能亦能检测检测到到碳酸酐酶碳酸酐酶抗体的表达。抗体的表达。对对pL/J(H-2u)小鼠使用小鼠使用碳酸酐酶碳酸酐酶进进行免疫行免疫诱导诱导能能够产够产生自身免疫性生自身免疫性涎涎腺炎腺炎，在在涎涎腺腺泡周腺腺泡周围围能能够观够观察到明察到明显显的淋的淋巴巴细细胞胞浸润灶浸润灶。但是到目。但是到目前前为为止止碳酸酐酶碳酸酐酶参与参与SS的的发发病机制尚不明确。病机制尚不明确。