杂环类药物的分析PPT课件.ppt

l杂环杂环含有非碳原子的含有非碳原子的环环状有机物，常状有机物，常见见有氧、氮和硫等原子。有氧、氮和硫等原子。l杂环类药杂环类药物的分物的分类类是根据是根据杂杂原子的种原子的种类类（氧氮硫）和数目、（氧氮硫）和数目、环环的元数（常的元数（常见见的五的五元元环环、六元、六元环环和七元和七元环环等）和等）和环环数（常数（常见见1 1、2 2和和3 3环环等）而等）而进进行。行。l教材中介教材中介绍绍了了吡吡啶类啶类、喹喹啉啉类类、托托烷类烷类、酚酚噻嗪类噻嗪类和和苯苯骈骈二氮二氮杂杂卓卓类类五种五种药药物的物的结结构、构、鉴别鉴别和含量和含量测测定方法。定方法。1.吡吡啶类啶类喹喹啉啉类类托托烷类烷类酚酚噻嗪类噻嗪类苯苯骈骈二氮二氮杂杂卓卓类类杂杂环环类类药药物物有机有机酸酸酯酯2.吡吡啶类药啶类药物的分析物的分析典典型型药药物物异烟异烟肼肼尼可刹米尼可刹米硝苯地平硝苯地平 1.结结 构构烟酸、烟酸、维维生素生素B3B3 3.2.官能官能团团与分析方法与分析方法开开环环反反应应Br2CNBrH2OAr-NH2黄棕色黄棕色NaOH 固OH乙醇紫紫红红N3 N5弱碱性：弱碱性：可与重金属离子生可与重金属离子生 BCuSO4NH4SCNB Cu（SCN）2BHgCl2BHgCl2白白弱碱性弱碱性杂环类杂环类原料原料药药多采用多采用非水碱量法非水碱量法进进行含量行含量测测定。定。还还原性原性 H2NNH2AgNO3AgNO3Ag缩缩合合反反应应异烟异烟腙腙（黄色（黄色结结晶）晶）mp228231Cp.Bp.用作用作鉴别鉴别 鉴别鉴别鉴别鉴别 l（1）溴酸）溴酸钾钾法：法：在在强强酸溶液，利用酸溶液，利用氢氢溴溴酸的氧化性和异烟酸的氧化性和异烟肼肼的的还还原性原性进进行反行反应应。l（2）剩余碘量法：剩余碘量法：利用碘的氧化性和异利用碘的氧化性和异烟烟肼肼的的还还原性。原性。戊烯二醛二硝基二硝基氯氯苯反苯反应应银镜银镜成不溶性成不溶性盐盐 鉴别鉴别22绿绿尼可刹米 二乙胺配位物，吡配位物，吡啶啶奈奈醌醌磺酸磺酸定定量量4.5.6.I2(the excess)+2Na2S2O3(VS)2NaI+Na2S4O6异烟异烟肼肼的含量的含量测测定方法定方法21.本法本法简简便便,但因碘氧化力但因碘氧化力较较弱弱,反反应应不不 易完全。常因反易完全。常因反应时间应时间、温度不同有、温度不同有 所差异所差异2.用于制用于制剂剂分析分析时时,含有含有还还原性原性赋赋形形剂时剂时有干有干扰扰；3.化学化学计计量关系：量关系：(1:4)0.1mol/L I23.429mg C6H7N37.异烟肼的含量测定方法The indicator was oxidized into colorless by bromine.T=3/2MW0.01667=3/2137.145/300 5/200=3.429(mg/ml)2 28.1.缓缓缓缓滴滴定定并并充充分分振振摇摇,防防止止局局部部浓浓度度过过高高终终点提前；点提前；2.到到终终点点后后,补补加加一一滴滴指指示示剂剂,如如颜颜色色褪褪去去即即可可,否否则则未到未到终终点；点；9.3.特殊特殊杂质检查杂质检查 l异烟异烟肼肼中游离中游离肼肼的的检查检查l异烟肼是一种不稳定的药物，其中的游离肼是由制备时原料引入，或在贮存过程中降解而产生。而肼又是一种诱变剂和致癌物质，因此国内外药典多数规定了异烟肼原料药及其制剂中游离肼的限量检查。常用的方法有薄层色谱法，（CP）比浊法（JP）P.200。10.CP 薄薄层层色色谱谱法法进进行异烟行异烟肼肼中游离中游离肼肼的的检查检查0.02%11.喹喹琳琳类药类药物分子物分子结结构中含有构中含有吡吡啶啶与苯稠合而成的与苯稠合而成的喹喹啉啉杂环杂环，环环上上杂杂原子的反原子的反应应性能基本与吡性能基本与吡啶啶相同。相同。喹喹啉啉类药类药物物的分析的分析12.硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁 1.结结 构构典型典型药药物物其其结结构分构分为喹为喹啉啉环环和和喹喹啉碱两个部分，各含一个氮原子，啉碱两个部分，各含一个氮原子，喹喹啉啉环环含芳香族氮，含芳香族氮，碱性碱性较较弱；弱；喹喹啉碱含脂啉碱含脂环环氮，碱性氮，碱性强强。左旋体左旋体右旋体右旋体喹喹啉碱立体啉碱立体结结构不同构不同H2SO42H2OH2SO42H2O13.14.盐盐酸酸环环丙沙星丙沙星HCLH2O其中其中环环丙沙星与丙沙星与盐盐酸成酸成盐盐15.2.官能官能团团与分析方法与分析方法碱性：碱性：喹喹核碱含脂核碱含脂环环氮，氮，碱性碱性强强，可与，可与强强酸形成酸形成稳稳定的定的盐盐（硫酸（硫酸盐盐）在在水溶液中能完成二水溶液中能完成二级电级电离，生成离，生成SO42-。含量。含量测测定定时时不同的条件下反不同的条件下反应进应进行的程度不同，滴行的程度不同，滴定度不同定度不同碱性：碱性：喹喹啉啉环环系芳系芳环环氮，碱性氮，碱性较较弱，弱，不能直接与硫酸成不能直接与硫酸成稳稳定的定的盐盐，而与而与喹喹核碱可与二元硫酸成核碱可与二元硫酸成盐盐。旋光性：硫酸奎宁旋光性：硫酸奎宁为为左旋体，其比左旋体，其比旋度旋度为为-237至至-244；硫酸奎尼丁；硫酸奎尼丁为为右旋体，其比旋度右旋体，其比旋度为为275至至290；而；而盐盐酸酸环环丙沙星无旋光性丙沙星无旋光性绿绿奎宁反奎宁反应应（Thalleioquin)经氯经氯化反化反应应，再以氨水，再以氨水处处理，理，生成生成绿绿色的二色的二醌醌基基吲吲胺的胺的铵盐铵盐6绿绿色色兰兰色色中性中性红红色色酸性酸性转转入醇、入醇、氯氯仿中仿中荧荧光特性光特性 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均中均显蓝显蓝色色荧荧光，而光，而盐盐酸酸环环丙沙星丙沙星则则无无荧荧光。光。鉴别鉴别鉴别鉴别含量含量测测定定鉴别鉴别16.硫酸奎宁硫酸奎宁 HClO4直接滴定直接滴定时时，反，反应应摩摩尔尔比比为为1 3 加入高加入高氯氯酸酸钡钡消除硫酸的干消除硫酸的干扰扰后滴定后滴定 硫酸奎宁硫酸奎宁 反反应应摩摩尔尔比比为为1 2 碱化、有机溶碱化、有机溶剂剂提取后，提取后，HClO4滴定滴定时时，反，反应应摩摩尔尔比比为为1 4 17.硫酸奎宁片硫酸奎宁片 ChP（2000）取取本本品品 10 片片，除除去去糖糖衣衣后后，精精密密称称定定，研研细细，精精密密称称取取适适量量（约约相相当当于于硫硫酸酸奎奎宁宁 0.3g），置置分分液液漏漏斗斗中中，加加氯氯化化钠钠0.5g 与与 0.1mol/L 氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液 10ml，混混匀匀，精精密密加加氯氯仿仿50ml，振振摇摇10min，静静置置，分分取取氯氯仿仿液液，用干燥用干燥滤纸滤过滤纸滤过。18.精精密密量量取取续续滤滤液液25ml，加加醋醋酐酐5ml 与与二二甲甲基基黄黄指指示示液液2滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定，至至溶溶液液显显玫玫瑰瑰红红色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1 mol/L）相相当当于于19.57mg的的（C20H24N2O2）2 H2SO42H2O。分子量：分子量：782.9619.光光谱谱特征特征 1.1.紫紫外外吸吸收收光光谱谱特特征征 中中国国药药典典采采用用本本法法鉴鉴别别盐盐酸酸环环丙沙星。丙沙星。鉴鉴别别方方法法：取取本本品品，加加0.0.1 1 mol/Lmol/L盐盐酸酸溶溶液液制制成成每每1 1 mlml中中含含8ug8ug的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法测测定定，在在277nm277nm与与315mn315mn的波的波长处长处有最大吸收。有最大吸收。2.2.红红外外吸吸收收光光谱谱特特征征 硫硫酸酸奎奎宁宁和和盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在中中国国药药典典均均采采用用红红外外光光谱谱的的方方法法进进行行鉴别鉴别。20.硫酸奎宁中特殊硫酸奎宁中特殊杂质杂质 根根据据硫硫酸酸奎奎宁宁的的合合成成工工艺艺，产产品品中中特特殊殊杂杂质质主主要要是是合合成成中中产产生生的的中中间间体体以以及及副副反反应应产产物，通物，通过检查过检查 3.特殊特殊杂质检查杂质检查酸度酸度氯氯仿仿-乙醇中不溶物乙醇中不溶物其他金其他金鸡纳鸡纳碱碱21.酸度酸度 本本项检查项检查主要控制主要控制药药物中的物中的酸性酸性杂质杂质。奎宁和奎奎宁和奎尼丁的碱性不同，奎尼的碱性略大于奎尼丁，其尼丁的碱性不同，奎尼的碱性略大于奎尼丁，其饱饱和水和水溶液的溶液的PH为为8.8。氯氯仿一乙醇中不溶物仿一乙醇中不溶物 本本项检查项检查主要控制主要控制药药物在制物在制备过备过程中引入的醇中不溶性程中引入的醇中不溶性杂质杂质或无机或无机盐类盐类等。等。奎宁在奎宁在氯氯仿仿-无水乙醇无水乙醇(2:1)的混合液中的混合液中易溶，易溶，奎尼丁奎尼丁在乙醇中易溶。在乙醇中易溶。检查检查方法：取本品方法：取本品约约20mg，加水，加水20m1溶解后，用酸度溶解后，用酸度计进计进行行测测定，定，pH值应值应为为5.7一一6.6。检查检查方法：取本品方法：取本品2克，加克，加氯氯仿仿-无水乙醇无水乙醇(2:1)的混合液的混合液15m1，在，在50度加度加热热l0min后，用已称定重量的垂熔坩后，用已称定重量的垂熔坩锅锅（垂熔玻璃（垂熔玻璃滤滤器）器）滤过滤过，滤滤渣用上述混合渣用上述混合液分液分5次洗次洗涤涤，每次，每次10 ml，在，在105度干燥至恒重，度干燥至恒重，遗遗留残渣不得超留残渣不得超过过2mg。22.其他金其他金鸡纳鸡纳碱碱 本本项项检检查查主主要要控控制制硫硫酸酸奎奎宁宁中中其其他他生生物物碱碱，因因其其化化学学结结构构不不十十分分明明确确，没没有有合合适适的的对对照照品品，因因此此采用薄采用薄层层色色谱谱中的高低中的高低浓浓度度对对比法比法进进行行检查检查。检查检查方法：取本品，加稀乙醇制成方法：取本品，加稀乙醇制成 l0mg/1ml l0mg/1ml溶液溶液 供供试试品溶液；品溶液；50ug/1ml 50ug/1ml溶液溶液 对对照溶液照溶液。TLC法法检查检查方法：方法：同一硅胶同一硅胶G薄薄层层板上，以板上，以氯氯仿仿-丙丙酮酮-二乙胺（二乙胺（5：4:1.25）为为展开展开剂剂，展开后，微展开后，微热热使展开使展开剂挥剂挥散，散，喷喷以碘以碘铂铂酸酸钾试钾试液使液使显显色。供色。供试试品溶液品溶液如如显杂质显杂质斑点，与斑点，与对对照溶液的主斑点比照溶液的主斑点比较较，不得更深。，不得更深。23.盐盐酸酸环环丙沙星中特殊丙沙星中特殊杂质杂质的的检查检查 盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的特特殊殊杂杂质质，通通过过酸酸度度、溶溶液液的的澄澄清清度度与与颜颜色色、有有关关物物质质等等项项目的目的检查进检查进行控制。行控制。盐盐酸酸环环丙沙星有关物丙沙星有关物质质 本本项检查项检查主要控制主要控制盐盐酸酸环环丙沙星在生丙沙星在生产产和和贮贮藏藏过过程中程中可能引人可能引人结结构不清的有关构不清的有关杂质杂质，采用，采用HPLC法中法中归归一化法一化法进进行行检查检查。24.色色谱谱条件与系条件与系统统适用性适用性试验试验：用十八用十八烷烷基硅基硅烷键烷键合硅胶合硅胶为为填充填充剂剂；以；以0.05mol/L枸枸橼橼酸溶液酸溶液-乙睛（乙睛（82:18）用三乙胺）用三乙胺调节调节pH值值3.5为为流流动动相；相；检检测测波波长为长为277nm理理论论板数按板数按盐盐酸酸环环丙沙星峰丙沙星峰计计算算应应不低于不低于2000，盐盐酸酸环环丙沙星峰与相丙沙星峰与相邻杂质邻杂质峰的分离度峰的分离度应应符合符合规规定。定。测测定方法：定方法：取本品适量，加水制成每取本品适量，加水制成每1 ml中含中含0.4mg的溶液，取的溶液，取20ul注入液相色注入液相色谱仪谱仪，调节检测调节检测灵敏度和灵敏度和记录仪记录仪衰减，使主衰减，使主成分的峰高成分的峰高为记录仪满为记录仪满量程的量程的20%一一25%倍，倍，记录时间应为记录时间应为主成分峰保留主成分峰保留时间时间的的2倍。按面倍。按面积归积归一化法一化法计计算，算，杂质总杂质总量不量不得超得超过过1.5。25.托托烷类药烷类药物大多数是由莨菪物大多数是由莨菪烷烷衍生的氨衍生的氨基醇与不同的有机酸基醇与不同的有机酸缩缩合成合成酯酯的生物碱，常的生物碱，常见见的有的有颠颠茄生物碱和古柯生物碱，。茄生物碱和古柯生物碱，。现现以典型以典型药药物硫酸阿托品和物硫酸阿托品和氢氢溴酸溴酸东东莨菪碱莨菪碱为为例例进进行其性行其性质质与分析的与分析的讨论讨论。托托烷类药烷类药物物分析分析26.1.结结 构构典型典型药药物物27.碱性碱性 五元脂五元脂环环上含有叔胺氮原上含有叔胺氮原子，有子，有较较强强的碱性，如阿托品的的碱性，如阿托品的pKb为为4.35易与酸成易与酸成盐盐，与生物碱沉淀与生物碱沉淀剂剂形成沉淀。形成沉淀。HgL2 阿托品阿托品旋光性不旋光性不对对称碳原子，有旋光性称碳原子，有旋光性东东莨菪碱莨菪碱呈左旋体。比旋度呈左旋体。比旋度为为-240至至-270，阿托品因，阿托品因外外消旋化消旋化而而为为消旋体，无旋光性。利用此性消旋体，无旋光性。利用此性质质可可区区别别阿托品与阿托品与东东莨菪碱。莨菪碱。区区别别水解性水解性 阿托品和阿托品和东东莨菪碱分子莨菪碱分子结结构中，具有构中，具有酯酯的的结结构，易水解。以阿托品构，易水解。以阿托品为为例，水解生成莨菪醇例，水解生成莨菪醇（I）和）和莨菪酸莨菪酸（II）P.209 2.官能官能团团与分析方法与分析方法Vitaili反反应应氧化反氧化反应应鉴别鉴别阿托品阿托品东东莨菪碱莨菪碱用四苯硼用四苯硼钠钠滴定滴定硫酸根硫酸根氢氢溴酸根的反溴酸根的反应应含量含量测测定定鉴别鉴别鉴别鉴别28.鉴鉴别别方方法法：取取供供试试品品约约10mg,10mg,加加发发烟烟硝硝酸酸5 5滴滴，置置水水浴浴上上蒸蒸干干，得得黄黄色色的的残残渣渣，放放冷冷，加加乙乙醇醇2 2一一3 3滴滴湿湿润润，加加固固体体氢氢氧化氧化钾钾一小粒，即一小粒，即显显深紫色深紫色。Vitaili反反应应醌醌式式结结构构29.莨莨菪菪酸酸可可与与硫硫酸酸和和重重铬铬酸酸钾钾在在加加热热的的条条件件下下，发发生生氧氧化化反反应应，生生成成苯苯甲甲醛醛，而而逸逸出出类类似似苦苦杏仁的臭味杏仁的臭味。氧化反氧化反应应30.硫酸硫酸盐盐与溴化物反与溴化物反应应 硫硫酸酸阿阿托托品品的的水水溶溶液液，加加氯氯化化钡钡试试液液，即即生生成成白白色色沉沉淀淀，沉沉淀淀在在盐盐酸酸或或硝硝酸酸中中均均不不溶溶解解；加加醋醋酸酸铅铅试试液液，也也生生成成白白色色沉沉淀淀，但但沉沉淀淀在在醋醋酸酸胺胺或或氢氢氧氧化化钠钠试试液液中中溶溶解解。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱的的水水溶溶液液，加加硝硝酸酸银银试试液液，即即生生成成淡淡黄黄色色凝凝乳乳沉沉淀淀，沉沉淀淀能能在在氨氨试试液液中中微微溶溶，但但在在硝硝酸酸中中几几乎乎不不溶溶；滴滴加加氯氯试试液液，溴溴即即游游离离，加加氯氯仿仿振振摇摇，氯氯仿仿层层显显黄黄色或色或红红棕色。棕色。31.氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱是是从从茄茄科科植植物物颠颠茄茄、白白曼曼陀陀罗罗、莨莨菪菪等等植植物物中中提提取取得得到到的的莨莨菪菪碱碱的的氢氢溴溴酸酸盐盐。我我国国是是从从茄茄科科植植物物白白曼曼陀陀罗罗的的干干燥燥品品（洋洋金金花花）中中提提取取东东莨莨菪菪碱碱，然然后后制制成成氢氢溴溴酸酸盐盐。根根据据其其制制备备工工艺艺，本本品品在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中可能引人的特殊中可能引人的特殊杂质杂质，通，通过对过对 氢氢溴酸溴酸东东莨菪中特殊莨菪中特殊杂质检查杂质检查酸度酸度其他生物碱其他生物碱易氧化物易氧化物检查进检查进行控制行控制32.酸度酸度 东东莨莨菪菪碱碱碱碱性性很很弱弱，对对石石蕊蕊试试纸纸几几乎乎不不显显碱碱性性反反应应。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱为为强强酸酸弱弱碱碱形形成成的的盐盐，通通过过其其5%5%水水溶溶液液的的pHpH值值为为4.0-5.54.0-5.5，来来控控制制本本品品中中的的酸酸性性杂质杂质。检查检查方法：取本品方法：取本品0.l0g，加水，加水2m1溶解后，分成两等溶解后，分成两等份：一份中加氨份：一份中加氨试试液液2一一3滴，不得滴，不得发发生生浑浊浑浊；另一份；另一份中加中加氢氢氧化氧化钾试钾试液数滴，只液数滴，只许发许发生瞬即消失的生瞬即消失的类类白色白色浑浊浑浊。33.其他生物碱其他生物碱 本本品品的的水水溶溶液液加加入入氨氨试试液液不不得得发发生生混混浊浊。当当有有其其他他生生物物碱碱，如如阿阿扑扑阿阿托托品品、颠颠茄茄碱碱存存在在时时，则则产产生生混混浊浊；本本品品水水溶溶液液加加入入氢氢氧氧化化钾钾试试液液，则则有有东东莨菪碱析出莨菪碱析出显浑浊显浑浊。因因东东莨菪碱在碱性条件下水解，生成异莨菪碱在碱性条件下水解，生成异东东莨菪碱莨菪碱醇和莨菪酸，前者在水中易溶；后者生成碱式醇和莨菪酸，前者在水中易溶；后者生成碱式盐盐在水在水中也能溶解，故可使瞬即中也能溶解，故可使瞬即发发生的生的浑浊浑浊消失。消失。34.易氧化物易氧化物 主主要要是是检检查查本本品品在在生生产产过过程程中中可可能能引引入入的的杂杂质质阿阿扑扑阿阿托托品品及及其其它它含含有有不不饱饱和和双双键键的的有有机机物物质质，可使高可使高锰锰酸酸钾钾溶液褪色。溶液褪色。检查检查方法：取本品方法：取本品0.15g，加水，加水5m1溶解后，在溶解后，在5一一20 加高加高锰锰酸酸钾钾滴定液（滴定液（0.02mo1/L)0.05 ml，l0min内内红红色不得完全消失。色不得完全消失。35.是离子是离子对对提取技提取技术术与比色法相与比色法相结结合形成的一种定量方法合形成的一种定量方法.对对于于弱碱性的弱碱性的药药物物托托烷类烷类(莨菪莨菪烷烷)可以可以选择选择合适的条件合适的条件进进行分析行分析.机理（以弱碱性机理（以弱碱性药药物物为为例）：例）：BHBHBHInIn HIn H分取有机分取有机层层比色比色测测定定碱化碱化,使使In游游离离,比色比色测测定定.实验实验条件的条件的选择选择 水相的水相的PH,要求要求B BHIn,H对对二个平衡都有影响二个平衡都有影响,H是是 多好多好还还是少好？是少好？BHIn定量定量 酸性染料比色法酸性染料比色法阿托品阿托品pKb=4.35有机相有机相水相水相36.B H BH HIn H InKb=BH B H Ka=H In HIn BH=In Kb B H=Ka HIn H H 2=Ka HIn Kb B PH=1/2（）Ka HIn Kb B 理想情况理想情况则则 式中四个数在具体式中四个数在具体实验实验中是已知的中是已知的,故可求出最佳故可求出最佳PH.37.（1）酸性染料酸性染料：常用酸性染料有溴百里酚常用酸性染料有溴百里酚兰兰、溴酚、溴酚兰兰、溴甲、溴甲 酚紫、溴甲酚酚紫、溴甲酚绿绿、甲基橙、金、甲基橙、金莲莲橙橙00、铬铬天青天青S、四溴酚四溴酚酞酞乙乙酯酯、苦味酸。、苦味酸。有机相：有机相：缓缓冲溶液：冲溶液：脱水：脱水：条条 件件 优优 化化38.酸性染料比色法酸性染料比色法测测定定盐盐酸利多卡酸利多卡 因注射液含量因注射液含量l盐盐酸利多卡因是一种酸利多卡因是一种临临床常用的局部麻醉用床常用的局部麻醉用l因其紫外吸收系数很低因其紫外吸收系数很低,直接采用紫外分光光度法直接采用紫外分光光度法则则灵敏度很低。中灵敏度很低。中国国药药典典 2000 年版二部年版二部 采用液相色采用液相色谱谱法和法和电电位滴定法做位滴定法做为为其制其制剂剂含量含量测测定定,上述方法在医院快速上述方法在医院快速检测时检测时,很很难难达到其要求件。达到其要求件。盐盐酸利多卡因酸利多卡因的的结结构构类类似生物碱似生物碱,可与酸性染料在一定的可与酸性染料在一定的pH 条件下条件下,定量定量络络合合,产产生生有色有色络络合物合物,并能被适当的有机溶并能被适当的有机溶剂剂完全萃取完全萃取,络络合物的合物的颜颜色色强强度与溶度与溶液中的液中的盐盐酸利多卡因的含量成正比酸利多卡因的含量成正比,符合比符合比尔尔定律。形成高灵敏的可定律。形成高灵敏的可见见光吸收光吸收,本法具有高灵敏度和准确性本法具有高灵敏度和准确性,方便快速。在方便快速。在pH 为为6.86 介介质质中中,溴百里酚溴百里酚蓝蓝与与盐盐酸利多卡因以酸利多卡因以5 1 生成有色生成有色络络合物合物,于于 415nm 波波长处长处,测测吸收度。吸收度。结结果果盐盐酸利多卡因酸利多卡因浓浓度在度在 3.0 15ugmL 内符合内符合比比尔尔回回归归方程方程为为:A=0.0557C+010334,r=0.9995,平均回收率平均回收率为为100.4%。39.l1.测测定方法按一定比例准确移取定方法按一定比例准确移取盐盐酸利多卡因酸利多卡因标标准溶液和溴百里酚准溶液和溴百里酚l蓝缓蓝缓冲溶液冲溶液,置于置于预预先精密加入先精密加入 10mL 氯氯仿的仿的 125mL 分液漏斗中分液漏斗中,振振摇摇l 2m in,分取分取氯氯仿仿层层,以空白以空白试剂试剂(即不含即不含盐盐酸利多卡因酸利多卡因)同法操作同法操作为为空白空白,分分别别测测定其定其氯氯仿液的吸收度。仿液的吸收度。l2.波波长长的的选择选择精密量取精密量取 1.5mL 盐盐酸利多卡因酸利多卡因标标准溶液准溶液,和和pH 值为值为 6.86 的溴百里酚的溴百里酚蓝缓蓝缓冲溶液冲溶液2.0mL,置于置于预预先精密加入先精密加入 10mL 氯氯仿的仿的 125mL 分分l液漏斗中液漏斗中,按上述方法操作按上述方法操作,分分别别在波在波长长 370nm470nm 处处,测测定吸收度定吸收度,结结果果(见图见图1)。415nm由由图图 可知可知,在在415nm 波波长处长处有最大吸收峰有最大吸收峰,在在420nm 波波长长以后以后,吸收度急吸收度急剧剧下降下降,不易作不易作为测为测定的波定的波长长,故故选择选择 415nm 为测为测定波定波长长。40.l3最佳最佳pH 值值的的选择选择精密量取精密量取 1.5mL 盐盐酸利多卡因酸利多卡因标标准溶液准溶液,和和pH 为为 4.00、6.86、8.00、9.18、12.00 的溴百里酚的溴百里酚蓝缓蓝缓冲溶液冲溶液 2.0mL,置于置于预预先精密加入先精密加入 10mL 氯氯仿的仿的 125mL 分液漏斗中分液漏斗中,按上述方法操作按上述方法操作,在波在波长长 415nm 处处,测测定吸收定吸收处处,结结果果见图见图l 6.86l由由图图 2 可知可知,在在pH 为为 6.86 的条件下有最大的吸收的条件下有最大的吸收值值,即能使即能使盐盐酸利多卡因与酸利多卡因与溴百里酚溴百里酚蓝蓝定量定量结结合后完全合后完全转转溶于有机相溶于有机相,又能将又能将过过量溴百里酚量溴百里酚蓝蓝完全保留在水相完全保留在水相。pH 值过值过低低,抑制了溴百里酚抑制了溴百里酚蓝蓝的解离的解离;pH 过过高高,利多卡因游离利多卡因游离,与溴百里酚与溴百里酚蓝结蓝结合的合的盐盐酸利多卡因的酸利多卡因的浓浓度降低度降低,从而使有机相的吸收度降低。所以从而使有机相的吸收度降低。所以,用溴百里酚用溴百里酚蓝蓝性染料比色法性染料比色法测测定定盐盐酸利多卡因含量酸利多卡因含量,选选用溶液用溶液pH 为为 6.87.0。实验时实验时采用采用6.86。pHA41.l4溴百里酚溴百里酚蓝蓝的用量的用量选择选择在在pH 为为 6.86 的介的介质质中中,考察溴百里酚考察溴百里酚蓝蓝的用量的用量对对吸光度的影响。当溴百里酚吸光度的影响。当溴百里酚蓝蓝与与盐盐酸利多卡因的酸利多卡因的质质量比分量比分别别为为 1 1、2 1、3 1、4 1、5 1、6 1、7 1 时时,于于 415nm 波波长处测长处测定吸定吸收度收度见图见图。由由图图 3 可知可知,质质量比超量比超过过 4 1 时时,吸收度基本保持恒定。所以吸收度基本保持恒定。所以,溴百里酚溴百里酚蓝蓝与与盐盐酸酸利多卡因的利多卡因的质质量比不能低于量比不能低于4 1。5盐盐酸利多卡因波度吸收度的酸利多卡因波度吸收度的线线性方程精密量取性方程精密量取盐盐酸利多卡因酸利多卡因标标准溶液准溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,分分别别置于置于 个个预预先精密加入先精密加入 氯氯仿的仿的 分分5.0mL 125mL液漏斗中液漏斗中 分分别别精密加入精密加入 为为 溴百里酚溴百里酚蓝蓝溶溶,pH 6.86液液 2.0mL,振振摇摇 2m in,分取分取氯氯仿仿层层,同同法做空白法做空白,在在415nm 波波长处测长处测定定氯氯仿吸收度仿吸收度,结结果果盐盐酸利多卡因酸利多卡因-1浓浓度在度在3.0 15.0g/mL,线线性关系良好性关系良好,回回归归方程方程为为A=0.0557C+0.0334,相关系数相关系数 r=0.9995。A质质量比量比1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 142.6回收率回收率测测定按定按盐盐酸利多卡因注射液酸利多卡因注射液处处方方,用已知含量的用已知含量的盐盐酸利多卡酸利多卡因原料配制因原料配制 3 种不同种不同浓浓度的度的盐盐酸利多卡因模酸利多卡因模拟拟溶液各溶液各 3 份份,精密量取精密量取模模拟拟溶液各溶液各 3.0mL,置置 100mL 容量瓶容量瓶,用水稀用水稀释释至刻度至刻度,摇摇匀匀,精密量精密量取取 5.0mL,置置 50mL 量瓶中量瓶中,精密量取精密量取2.0mL 置于置于预预先精密加入先精密加入 10mL 氯氯仿的仿的 125mL 分液漏斗中分液漏斗中,精密加入精密加入 pH 为为 6.86 的溴百里酚的溴百里酚蓝蓝2.0mL,振振摇摇 2m in,分取分取氯氯仿仿层层,同法做空白同法做空白,在在415nm 波波长处测长处测定定氯氯仿液的吸收度仿液的吸收度,代入回代入回归归方程方程,计计算回收率算回收率,结结果果(见见表表 1),平均回平均回收率收率为为 100.4%,RSD 为为1.0%。43.酚酚噻嗪类药噻嗪类药物的分析物的分析 1.结结 构构44.l结结构特点：构特点：l母核母核2位上的位上的R2取代基，通常取代基，通常为为lH、Cl、CF3、COCH3、SCH2CH3等；等；l10位上的位上的R1取代基，取代基，则为则为具有具有2-3个碳个碳链链的二甲的二甲或二乙胺基，或或二乙胺基，或为为含氮含氮杂环杂环如如哌嗪哌嗪和和哌啶哌啶的衍生的衍生物等，物等，由于其氮多由于其氮多为为叔氮有叔氮有较较强强的碱性的碱性可与可与盐盐酸酸成成盐盐。临临床上使用的本床上使用的本类药类药物多物多为为其其盐盐酸酸盐盐。45.46.奋奋乃静乃静47.紫外与紫外与红红外吸收光外吸收光谱谱 含含S、N的三的三环环共共轭轭的大的大 体系，体系，S、N与苯与苯环环 形成形成p-共共轭轭形成具有特征的紫外吸收光形成具有特征的紫外吸收光谱谱。主要由主要由母核三母核三环环的的系系统统所所产产生，一般具有生，一般具有三个峰三个峰 即在即在 204209nm（205nm附近）附近）250265nm（254nm附近）附近）300325nm（300nm附近）附近）最最强强峰多在峰多在 250265nm。药药典用于典用于鉴别鉴别48.200 300254205300325 紫外吸收光紫外吸收光谱谱受取代基的影响，特受取代基的影响，特别别是是S被被氧化的程度不同，有不同的改氧化的程度不同，有不同的改变变，在紫移的同，在紫移的同时时在在270附近附近产产生一新的吸收。紫外吸收用于生一新的吸收。紫外吸收用于鉴别鉴别270成成为为四个峰四个峰49.50.奋奋乃静乃静 ChP（2000）鉴别鉴别 （2）取本品，加无水乙醇制成每）取本品，加无水乙醇制成每1ml 中中含含 7 g 的的溶液，照分光光度法（附溶液，照分光光度法（附录录A）测测定，在定，在 258nm 的波的波长处长处有最大吸收，吸收有最大吸收，吸收度度约为约为0.65。（3）本品的）本品的红红外吸收外吸收图谱应图谱应与与对对照的照的图图谱谱（光（光谱谱集集 243 图图）一致）一致 奋奋乃静乃静 鉴别鉴别（1）取本品）取本品 5mg，加，加盐盐酸与水各酸与水各 1ml，加，加热热至至80，加入，加入过过氧化氧化氢氢溶液数滴，溶液数滴，即即显显深深红红色；放置后，色；放置后，红红色色渐渐褪去。褪去。51.52.2.官能官能团团与分析方法与分析方法可被氧化可被氧化为为亚砜亚砜和和砜砜，氧化，氧化剂剂可以是可以是HNO3、H2SO4、H2O2不同的氧化不同的氧化剂剂，不同的不同的样样品品产产生不同的生不同的颜颜色色鉴别鉴别，产产物复物复杂杂。其中。其中HNO3伴有沉淀；伴有沉淀；H2O2仅仅能氧化能氧化奋奋乃静乃静红红色不色不稳稳定。定。噻嗪噻嗪中的中的S是一良好的是一良好的电电子子给给予体，分二周期予体，分二周期给给出四个出四个电电子，每周期二子，每周期二个个电电子，而紫外吸收光子，而紫外吸收光谱谱随随S被氧化在被氧化在335355nm产产生新的吸收被用生新的吸收被用于制于制剂剂（片、栓、注射（片、栓、注射剂剂、糖、糖浆剂浆剂）的含量）的含量测测定（示差法）。定（示差法）。铈铈量法（量法（Ce（SO4）2）测测定含量定含量 失失1e 红红色色，再失再失1e 无色。无色。T=？（原料药）钯钯离子比色法离子比色法 仅仅未受氧化的未受氧化的 S 能与能与Pd+2生成生成红红色的配合物色的配合物，可，可选择测选择测量未被量未被氧化的氧化的药药物。物。PdCl2PH=2A500nm（50ug150ug/1ml）R1取代基取代基为为 有碱性有碱性,可用非水滴定法定量可用非水滴定法定量.、非水滴定条件的控制：非水滴定条件的控制：盐盐酸酸盐盐要加要加Hg（AC）2除去除去Cl 的影响的影响.对对于加于加Hg（AC）2产产生生红红色的色的药药物物,(氯氯丙丙嗪嗪)可加入可加入Vc 来消除来消除.制制剂剂中（注射中（注射剂剂）加有抗氧）加有抗氧剂剂NaHCO3 须须要要NaOHCHCl3提提取取脱水脱水T不同的氧化不同的氧化剂产剂产生不同的生不同的颜颜色色 没有很没有很专专属性的反属性的反应应，鉴别鉴别要配合要配合IR、UV含量含量测测定利用其定利用其还还原性和取代基的碱性原性和取代基的碱性 2.官能官能团团与分析方法与分析方法53.红红色色 500nm10分分钟钟反反应应完全，呈色可完全，呈色可稳稳定定2小小时时，测测定范定范围围50250微克微克讨论讨论：1.钯钯离子离子试剂试剂：PdCl2和十二和十二烷烷基硫酸基硫酸酯钯盐酯钯盐.用用PdCl2时时，形成的有色，形成的有色络络合物水中溶合物水中溶 解度小解度小,当当样样品品浓浓度大度大时时会会产产生沉淀影响生沉淀影响测测定。定。十二十二烷烷基硫酸基硫酸酯钯盐酯钯盐,其其络络合物溶解度大合物溶解度大,吸收吸收强强度增大（度增大（约约2倍）倍）对样对样品品浓浓度大度大 时应时应使用使用该试剂该试剂。2.本法本法优优点：氧化点：氧化产产物不干物不干扰扰。54.苯苯骈骈二氮二氮杂杂卓卓类药类药物的分析物的分析典典 型型 药药 物物 1.结结 构构55.氯氮卓（1955年合成）地西泮（1959年合成）典型典型药药物物56.2.官能官能团团与分析方法与分析方法二氮二氮杂杂卓卓环为环为七元七元环环，环环上氮原子具有上氮原子具有强强碱性，苯基的取代使碱性降低，可碱性，苯基的取代使碱性降低，可进进行非水滴定法行非水滴定法测测定；本品多定；本品多为为游离碱，游离碱，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯氯仿中。仿中。UV吸收，用吸收，用于含量于含量测测定定环环比比较稳较稳定，在定，在强强酸性下水解，形酸性下水解，形成相成相应应的二苯甲的二苯甲酮酮衍生物，可用于衍生物，可用于鉴别鉴别和比色和比色测测定。（定。（氯氯氮卓水解生氮卓水解生成芳伯胺基；地西泮水解生成芳仲成芳伯胺基；地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸）；胺基和甘氨酸）；鉴别鉴别芳伯胺基反芳伯胺基反应应：氯氯氮卓水解生成芳伯胺氮卓水解生成芳伯胺基基(重氮化偶合反重氮化偶合反应应 鉴别鉴别茚茚三三酮酮反反应应：地西泮水解生成甘氨酸（地西泮水解生成甘氨酸（茚茚三三酮酮反反应应）鉴别鉴别硫酸硫酸荧荧光反光反应应：本本类药类药物物加硫加硫酸，在紫外灯下，酸，在紫外灯下，呈呈荧荧光光 鉴别鉴别定量定量57.在非水溶在非水溶剂剂中中进进行的滴定分析方法行的滴定分析方法称称为为非水滴定法。非水滴定法。l非水溶非水溶剂剂：指的是有机溶：指的是有机溶剂剂与不含水的与不含水的 l 有机溶有机溶剂剂。非非 水水 滴滴 定定 法法 (nonaqueous titrations)58.l非水溶非水溶剂剂有异味、有毒、而且价格又有异味、有毒、而且价格又贵贵，为为何何发发展非水滴定法？展非水滴定法？l原因一：原因一：许许多物多物质质在水中在水中Ka 或或Kb小于小于10-7，l 不能在水中滴定。不能在水中滴定。l l 二：二：许许多有机物在水中基本不溶或溶解甚多有机物在水中基本不溶或溶解甚l 少，不能在水中滴定。少，不能在水中滴定。l l 三：三：强强酸或酸或强强碱在水中全部离解碱在水中全部离解为为H+和和l OH-在水中不能区分在水中不能区分强强酸或酸或强强碱，不碱，不l 能分能分别别滴定。滴定。l 59.基本原理基本原理l一、溶一、溶剂剂的分的分类类l非水滴定中溶非水滴定中溶剂剂分分为质为质子溶子溶剂剂和无和无质质子溶子溶剂剂。l质质子溶子溶剂剂(protonic solvent):能能给给出或接受出或接受质质子子l的溶的溶剂剂。质质子溶子溶剂剂可分可分为为酸性溶酸性溶剂剂，碱性溶，碱性溶剂剂l和两性溶和两性溶剂剂。60.l1、酸性溶、酸性溶剂剂：给给出出质质子能力子能力较较强强的溶的溶剂剂。如冰。如冰醋酸，丙酸等。酸性溶醋酸，丙酸等。酸性溶剂剂适于作适于作为为滴定弱碱性滴定弱碱性物物质质的介的介质质。l2、碱性溶、碱性溶剂剂：接受：接受质质子能力子能力较较强强的溶的溶剂剂。如乙。如乙二胺、液氨、乙醇胺等。碱性溶二胺、液氨、乙醇胺等。碱性溶剂剂适于作适于作为为滴滴定弱酸性物定弱酸性物质质的介的介质质。l3、两性溶、两性溶剂剂：既易接受：既易接受质质子又易子又易给给出出质质子的溶子的溶剂剂。如甲醇、乙醇、乙二醇等。适于滴定不太。如甲醇、乙醇、乙二醇等。适于滴定不太弱的酸、碱的介弱的酸、碱的介质质。61.二、溶二、溶剂剂的性的性质质(一一)溶溶剂剂的离解性的离解性 常用的非水溶常用的非水溶剂剂中中,只有惰性溶只有惰性溶剂剂不能离解不能离解,其他其他溶溶剂剂均有不同程度的离解。均有不同程度的离解。SH H+S-SH+H+SH2+KaSH 为为固有酸度常数固有酸度常数KbSH为为固有碱度常数固有碱度常数62.合并两式，即得到溶合并两式，即得到溶剂剂自身自身质质子子转转移反移反应应：2SH SH2+S由于溶由于溶剂剂自身离解很微，自身离解很微，SH可看作定可看作定值值，定，定义义KS称称为为溶溶剂剂的自身离解常数或离子的自身离解常数或离子积积-63.如乙醇的自身如乙醇的自身质质子子转转移反移反应为应为 2C2H5OH C2H5OH 2+C2H5O-KS=C2H5OH 2+C2H5O-=7.910-20水的自身离解常数水的自身离解常数KS=H3O+OH-，即即为为水的水的离子离子积积常数常数KW=KS=110-1464.(二二)溶溶剂剂的酸碱性的酸碱性现现以以HA代表酸，代表酸，B代表碱，根据代表碱，根据质质子理子理论论有有下列平衡存在：下列平衡存在：HA H+A-B+H+BH+65.若将酸若将酸HA溶于溶于质质子溶子溶剂剂SH中，中，则发则发生下生下列列质质子子转转移反移反应应：HA H+A-SH+H+SH2+SH+HA A-+SH2+HA在溶在溶剂剂SH中的表中的表观观离解常数离解常数KHA按下式按下式计计算：算：上式表