药物致癌作用.ppt

第十六章第十六章 药物致癌作用物致癌作用1.肿瘤瘤(tumor，neoplasm)：有分裂潜能的：有分裂潜能的细胞胞受致癌因素作用后受致癌因素作用后发生生恶性性转化和克隆性增生化和克隆性增生所形成的新生物所形成的新生物良性良性肿瘤：瘤：呈膨呈膨胀生生长，与周，与周围组织有明有明显的的界限，多有包膜，它界限，多有包膜，它们生生长常有常有“自限性自限性”，对机体破坏机体破坏较小小恶性性肿瘤瘤：癌和肉瘤：癌和肉瘤癌癌(carcinoma)：由上皮：由上皮细胞来源的胞来源的恶性性肿瘤瘤肉瘤肉瘤(sarcoma)：由：由间质细胞来源的胞来源的恶性性肿瘤瘤2.良性良性肿瘤瘤恶性性肿瘤（癌）瘤（癌）膨膨胀或外生性生或外生性生长侵侵袭性生性生长通常通常缓慢生慢生长生生长较快，常无止境快，常无止境不侵不侵袭有侵有侵袭与蔓延与蔓延现象象不不转移移一般多有一般多有转移移一般不复一般不复发常易复常易复发3.4.5.化学致癌的化学致癌的历史史l癌症是以具有失控癌症是以具有失控细胞生胞生长为共同特征的一共同特征的一类疾病。疾病。化学化学致癌致癌问题时是当今关注的是当今关注的热点点l近年来近年来肿瘤瘤发病率不断提高，病率不断提高，发病年病年龄向低向低龄化化发展。展。l查明了明了遗传因素与病毒因素与因素与病毒因素与肿瘤有关，但并非是瘤有关，但并非是肿瘤瘤发病率增高的主要原因。病率增高的主要原因。l发现环境化学境化学污染和某些物理有害因素与染和某些物理有害因素与肿瘤瘤发病密切相病密切相关。关。6.WHOWHO指出，指出，人人类癌症癌症90%90%与与环境因素有关境因素有关，其中主，其中主要要为化学因素化学因素lFDAFDA列出列出24002400种可能种可能对动物致癌的物物致癌的物质。l已知化学已知化学药物在物在动物身上能物身上能诱发肿瘤的数目瘤的数目为150150种以上。种以上。l对于人于人类，有，有20-3020-30种化学物种化学物质与与肿瘤有关。瘤有关。（环磷磷酰胺、胺、氯霉素等）霉素等）7.不同环境因素引起的肿瘤死亡分布8.职业性癌症性癌症 l职业性皮肤癌症性皮肤癌症常常发生于接触生于接触砷砷矿、砷、砷杀虫虫剂和化工的和化工的工人；接触工人；接触煤烟煤烟和和煤焦油煤焦油的炉工、的炉工、沥青青工和工和树脂工；接触脂工；接触X线和放射和放射线的医的医务人人员和科学工作者。和科学工作者。居里夫人：白血病居里夫人：白血病9.l职业性膀胱癌症性膀胱癌症常常发生在生生在生产染料和染料和颜料料的工人；接触的工人；接触橡胶橡胶轮胎的生胎的生产者和者和橡胶橡胶工人；接触煤工人；接触煤焦油和焦油和多多环芳香碳芳香碳氢化合物化合物的煤气工人、的煤气工人、铝制品工人。制品工人。10.l职业性肺和支气管癌症性肺和支气管癌症常常发生于接触砷和煤焦油的工种；生于接触砷和煤焦油的工种；还可可发生于接触生于接触化学溶化学溶剂和有机化学品和有机化学品的生的生产者和者和喷漆工；漆工；铬和和镍化合物化合物的生的生产者者和和焊接工；石棉接工；石棉矿开采和加工的开采和加工的矿工和工和工人，接触工人，接触石棉的石棉的人人发生胸膜生胸膜间皮瘤皮瘤远远高于不接触者。高于不接触者。11.饮食引食引发癌症癌症l（1）食物）食物过烫l（2）煎炸、熏烤、）煎炸、熏烤、发霉霉l（3）肥、甘、厚、）肥、甘、厚、腻l（4）过咸：沿海咸：沿海l（5）腌制、干咸）腌制、干咸鱼12.一、化学致癌作用一、化学致癌作用（一）基本概念（一）基本概念1、致癌作用：致癌作用：是是导致癌症的一系列内在或外部的致癌症的一系列内在或外部的多步多步骤过程，具体包括任何良性或程，具体包括任何良性或恶性性肿瘤的起瘤的起源或源或发生。生。2、致癌致癌剂：能引起人能引起人类或或动物体内物体内产生生肿瘤的化瘤的化学物学物质。13.3、直接致癌物直接致癌物或或初初发致癌原致癌原：指未指未经代代谢或生或生物物转化就足以激化就足以激发致癌效致癌效应的母体化合物。的母体化合物。4、间接致癌物接致癌物：进入机体后需入机体后需经代代谢或生物或生物转化成化成为另一种化合物，才能另一种化合物，才能诱发致癌作用的化致癌作用的化学物学物质。5、辅致癌物（促癌物）致癌物（促癌物）：本身无致癌作用，只本身无致癌作用，只有与致癌有与致癌剂同同时存在存在时，能增加后者致癌活性，能增加后者致癌活性的化学物的化学物质。14.（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分类类：1.1.1.1.遗传遗传毒性致癌物毒性致癌物毒性致癌物毒性致癌物：与：与：与：与DNADNADNADNA反反反反应应，造成，造成，造成，造成DNADNADNADNA损损害：害：害：害：直接致癌物；直接致癌物；直接致癌物；直接致癌物；间间接致癌物；接致癌物；接致癌物；接致癌物；无机致癌物。无机致癌物。无机致癌物。无机致癌物。15.直接致癌物（直接致癌物（directcareinogens）：在体内不需要在体内不需要经过代代谢活化即可致癌活化即可致癌（各种（各种烷化化剂、金属致癌物）、金属致癌物）间接致癌物（接致癌物（indirectcareinogens）：）：在体内在体内经代代谢转化，其化，其产物具致癌作用物具致癌作用无机致癌物：无机致癌物：亲电子子剂或通或通过选择性改性改变DNA复制保真性，复制保真性，导致致DNA的改的改变(镍、铬、钛、锰等金属及其等金属及其盐类)16.（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分类类：2.2.2.2.非非非非遗传遗传毒性致癌物毒性致癌物毒性致癌物毒性致癌物：不与：不与：不与：不与DNADNADNADNA反反反反应应。促癌促癌促癌促癌剂剂：激素；激素；激素；激素；细细胞毒胞毒胞毒胞毒剂剂；过过氧化物氧化物氧化物氧化物酶酶体增殖体增殖体增殖体增殖剂剂；免疫抑制免疫抑制免疫抑制免疫抑制剂剂；固固固固态态物物物物质质。17.(1)促癌促癌剂本身无致癌性，在本身无致癌性，在给以以遗传毒性致癌毒性致癌物之后再物之后再给以促以促长剂可增可增强遗传毒性致毒性致癌物的致癌作用，也可促癌物的致癌作用，也可促进“自自发性性”转化化细胞胞发展成癌。展成癌。佛波佛波酯(TPA及其衍生物及其衍生物)、苯巴比妥、苯巴比妥、二丁基二丁基羟基甲苯基甲苯(BHT)、1,8,9-蒽三醇、蒽三醇、DDT、Alkanes及胆及胆盐18.lTPA是小鼠是小鼠皮肤癌皮肤癌诱发试验的促癌的促癌剂；苯巴比妥苯巴比妥对大鼠大鼠肝癌肝癌有促癌作用；色氨有促癌作用；色氨酸和糖精酸和糖精对膀胱癌膀胱癌有促癌作用；有促癌作用；l丁基丁基羟甲苯、甲苯、DDT、多、多卤联苯、苯、氯丹、丹、七七氯和四和四氯二苯并二苯并对二二恶英（英（TCDD）等。）等。19.(2)内分泌内分泌调控控剂(3)免疫抑制免疫抑制剂主要改主要改变内分泌系内分泌系统平衡及平衡及细胞正胞正常分化，常起促常分化，常起促长剂作用。如乙作用。如乙烯雌酚、雌酚、雌二醇、硫雌二醇、硫脲。主要主要对病毒病毒诱导的的恶性性转化起增化起增强作用作用。如。如嘌呤同型物。呤同型物。20.雌二醇雌二醇l为经皮肤吸收的雌激素治皮肤吸收的雌激素治疗剂。补充女性卵巢充女性卵巢分泌的分泌的17-雌二醇的不足雌二醇的不足。l妊娠期妊娠期间不要使用雌二醇，全身用不要使用雌二醇，全身用药可能可能导致致胎儿畸形，阴道用胎儿畸形，阴道用药也也应注意。用注意。用药后所生女后所生女婴有有发生生殖道异常，罕生生殖道异常，罕见病例在育病例在育龄期有期有发生生阴道癌或阴道癌或宫颈癌。癌。雌二醇可雌二醇可经乳腺乳腺进入乳汁入乳汁而排出，并可抑制泌乳，哺乳期而排出，并可抑制泌乳，哺乳期妇女禁用。女禁用。21.(4)细胞毒胞毒剂可能引起可能引起细胞死亡，胞死亡，导致致细胞增殖活胞增殖活跃及癌及癌发展。如次氮基三乙酸、展。如次氮基三乙酸、氯仿。仿。氮川三乙酸氮川三乙酸主要用于合成洗主要用于合成洗涤剂、化学、化学镀、和无、和无氰电镀、除垢、除垢剂和阻垢和阻垢剂、印染助、印染助剂、塑料添加、塑料添加剂、工工业脱硫、化学分析、照相行脱硫、化学分析、照相行业、农作物生作物生产抑制抑制及印刷油墨、稀土提取等。及印刷油墨、稀土提取等。使使锌进入入肾脏，由于，由于锌的毒性，造成的毒性，造成细胞死亡，胞死亡，结果引起增生和果引起增生和肾肿瘤瘤。22.(5)过氧化物氧化物酶体增殖体增殖剂可可导致致细胞内氧自由基胞内氧自由基过量生成。如祛量生成。如祛脂乙脂乙酯、邻苯二甲酸乙基己苯二甲酸乙基己酯。降血脂。降血脂药安安妥明、降脂异丙妥明、降脂异丙酯、1，2-三三氯乙乙烯(6)固固态物物质物理状物理状态是关是关键性因素，可能涉及性因素，可能涉及细胞胞毒性。如塑料、石棉毒性。如塑料、石棉。23.（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分（二）化学致癌物按作用机制分类类：3.3.3.3.未分未分未分未分类类致癌物致癌物致癌物致癌物：二：二：二：二恶烷恶烷、美舍吡、美舍吡、美舍吡、美舍吡伦伦。助致癌物（助致癌物（cocarcinogens）：不具有）：不具有引引发和促和促长作用，但可以促作用，但可以促进引引发作用和作用和增增强促促长作用，即能促作用，即能促进或增或增强全部致癌全部致癌过程程。如乙醇、二氧化硫。如乙醇、二氧化硫24.（二）致癌（二）致癌过程程癌症的体癌症的体细胞突胞突变理理论25.引引发阶段段(initiation)促促长阶段段(promotion)进展展阶段段(progression)26.1 1引引引引发阶发阶段段段段/启启启启动阶动阶段段段段致癌物致癌物致癌物致癌物对对靶靶靶靶细细胞胞胞胞DNADNA产产生生生生损伤损伤作用，作用，作用，作用，经经细细胞分裂增殖固定下来，造成胞分裂增殖固定下来，造成胞分裂增殖固定下来，造成胞分裂增殖固定下来，造成单单个或少量个或少量个或少量个或少量细细胞胞胞胞发发生永久性、不可逆的生永久性、不可逆的生永久性、不可逆的生永久性、不可逆的遗传遗传性改性改性改性改变变突突突突变细变细胞（启胞（启胞（启胞（启动细动细胞，胞，胞，胞，initiatedcellinitiatedcell）引引引引发剂发剂（启（启（启（启动剂动剂，initiatorinitiator）具有引具有引具有引具有引发发作用的化学物作用的化学物作用的化学物作用的化学物质质 27.促促进引引发形成形成肿瘤瘤细胞分裂生胞分裂生长的作用的作用阶段段2促促长阶段段引引发物作用之后，促癌物物作用之后，促癌物长期、慢性作用期、慢性作用引引发物物单独作用一般不会引起独作用一般不会引起肿瘤瘤只有促癌物的慢性作用不会引起只有促癌物的慢性作用不会引起肿瘤瘤引引发物与促物与促长物的作用有先后次序物的作用有先后次序引引发作用不可逆，促作用不可逆，促长在早期可逆在早期可逆28.在促在促进之中或之后，之中或之后，细胞表胞表现出不可逆的出不可逆的遗传学改学改变，其，其标志志为遗传不不稳定性增加和定性增加和恶性性变化，在形化，在形态上或功能代上或功能代谢和行和行为方面方面逐逐渐表表现出出肿瘤的特征，如生瘤的特征，如生长速度、侵速度、侵袭性、性、转移能力及生化、免疫性能改移能力及生化、免疫性能改变。3进展展阶段段29.30.二、二、临床常床常见致癌致癌药物物l（）激素（）激素 雌激素在雌激素在更年期更年期应用治用治疗更年期更年期综合征有增加子合征有增加子宫内内膜癌的可能；在膜癌的可能；在怀孕期孕期为了控制流了控制流产，服已，服已烯雌酚，明雌酚，明显地增加下一代女性阴道腺癌的地增加下一代女性阴道腺癌的发生率；生率；口服激素避孕口服激素避孕药可可能增加肝能增加肝脏良性良性肿瘤的瘤的发生率。生率。动物物实验结果果证实长期大期大剂量服用雌激素可以量服用雌激素可以产生肝生肝癌，癌，为大家所公大家所公认，但人，但人类长期服用激素避孕期服用激素避孕药是否致癌，是否致癌，意意见分歧。分歧。应用雄激素治用雄激素治疗再生障碍性再生障碍性贫血，用血，用药剂量大，量大，时间长能能诱发良性肝良性肝脏肿瘤。黄体瘤。黄体酮可能与可能与宫颈癌有关。癌有关。31.（）解（）解热镇痛痛药 长期期滥用用解解热镇痛痛药的的肾脏病病变患者，其患者，其肾盂盂癌及膀胱癌的癌及膀胱癌的发生率生率较一般人一般人为高，可达高，可达8.68.6，而非而非滥用者用者仅1.271.27；滥用用非那西汀非那西汀的患者中，的患者中，30304040发生生肾盂盂肿瘤，瘤，5 51515发生生输尿管尿管肿瘤，瘤，5050以上以上发生膀胱生膀胱肿瘤。瘤。氨基比林氨基比林在酸性介在酸性介质中能中能产生致癌物二甲基生致癌物二甲基亚硝胺。硝胺。32.l（）免疫抑制（）免疫抑制剂 病人用病人用硫硫唑嘌呤呤合并合并皮皮质类固醇固醇药物，物，发生淋巴生淋巴瘤的危瘤的危险性大大地增加，在性大大地增加，在肾移植病人多移植病人多见。免疫。免疫抑制的病人也常有下列抑制的病人也常有下列肿瘤瘤发生，如肝癌、膀胱癌、生，如肝癌、膀胱癌、支气管腺癌、皮肤支气管腺癌、皮肤鳞癌以及黑色素瘤等。癌以及黑色素瘤等。长期期应用用烷化化剂有增加膀胱癌和非淋巴有增加膀胱癌和非淋巴细胞白胞白血病血病发生的危生的危险性。性。33.l（4 4）抗癌）抗癌药 l临床常用的化床常用的化疗药物中，肯定有致癌作用的有物中，肯定有致癌作用的有白消安、白消安、环磷磷酰胺、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、甲胺、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、甲环亚硝硝脲等，其中等，其中环磷磷酰胺可引起白血病、胺可引起白血病、鳞癌及膀胱癌等；癌及膀胱癌等；l致癌可能性致癌可能性较大的有大的有氯氨氨铂、氮芥、阿霉素、卡氮芥、氮芥、阿霉素、卡氮芥、环己己亚硝硝脲、甲、甲苄肼等；等；l轻度致癌作用的有度致癌作用的有氮氮烯唑胺、尿胺、尿嘧啶氮芥氮芥等。等。l外用外用甲氨喋呤甲氨喋呤也可致皮肤癌、鼻咽癌等。也可致皮肤癌、鼻咽癌等。34.（）（）杂类 砷砷剂可引起皮肤癌。有致癌可能性，但尚未能肯定的可引起皮肤癌。有致癌可能性，但尚未能肯定的药物有物有保泰松、保泰松、氯霉素（易致白血病）、苯丙胺、苯妥英霉素（易致白血病）、苯丙胺、苯妥英钠（易患（易患恶性淋巴瘤）、利血平（易致乳腺癌）、性淋巴瘤）、利血平（易致乳腺癌）、氯贝丁丁酯（安妥明）（易患胃（安妥明）（易患胃肠道道肿瘤）、煤焦油瘤）、煤焦油软膏（易患皮膏（易患皮肤癌）肤癌）等。等。一些一些药物物经过动物物实验初步初步证明可能致癌，如明可能致癌，如灰黄霉灰黄霉素、异烟素、异烟肼等。等。土霉素土霉素在酸性介在酸性介质中能中能产生致癌物二甲基生致癌物二甲基亚硝胺。硝胺。35.（）中草（）中草药 动物物实验表明，表明，丹宁酸丹宁酸对肝有毒性，肝有毒性，对动物物有致癌作用；有致癌作用；槟榔种子榔种子（其中（其中槟榔次碱）、榔次碱）、款冬款冬花粉花粉（其中含有的双稠吡胳（其中含有的双稠吡胳啶类生物碱森克京）、生物碱森克京）、虞美人、白屈菜虞美人、白屈菜中含有的血根碱、中含有的血根碱、积雪草中所含雪草中所含有的有的积雪草雪草甙、苏铁素、紫花茄、素、紫花茄、鱼藤藤酮、黄樟、黄樟醚、爱草草脑、-细辛辛醚、鞣、鞣质、斑蝥素、巴豆油、斑蝥素、巴豆油等均等均对动物有致癌的可能。物有致癌的可能。36.三三.观察化学毒物致癌作察化学毒物致癌作用的基本方法用的基本方法 37.化学致癌物的判化学致癌物的判化学致癌物的判化学致癌物的判别别 人群流行病学人群流行病学人群流行病学人群流行病学调查调查：两两两两项项以上由不同以上由不同以上由不同以上由不同研究者在不同地点、不同研究者在不同地点、不同研究者在不同地点、不同研究者在不同地点、不同对对象中以不同象中以不同象中以不同象中以不同调查调查方法方法方法方法获获得的得的得的得的结论结论相符的相符的相符的相符的证证据；据；据；据；动动物物物物实验证实验证据：据：据：据：两两两两项项按按按按现现行常行常行常行常规设计规设计进进行，符合行，符合行，符合行，符合GLPGLP（goodlaboratorygoodlaboratorypracticepractice），在不同物种），在不同物种），在不同物种），在不同物种动动物中所得物中所得物中所得物中所得结结果一致的果一致的果一致的果一致的动动物致癌物物致癌物物致癌物物致癌物鉴鉴定定定定资资料。料。料。料。38.定性判定性判别：受受试物能否致癌；物能否致癌；定量判定量判别：剂量量-反反应关系分析关系分析短期短期试验；动物致癌物致癌试验；人人类流行病学流行病学调查39.1、短期致突、短期致突变性和致癌性性和致癌性筛选实验通通过评价化合物的致突价化合物的致突变性而性而预测其其致癌性致癌性实验系系统：微生物、昆虫、哺乳微生物、昆虫、哺乳动物物细胞胞检测参数：参数：基因突基因突变、染色体效、染色体效应、DNA修复修复40.2、体外、体外转化化实验 以体外以体外以体外以体外诱发细诱发细胞胞胞胞恶恶性性性性转转化（化（化（化（细细胞形胞形胞形胞形态态、细细胞生胞生胞生胞生长长能力、生化表型及能力、生化表型及能力、生化表型及能力、生化表型及动动物体内成物体内成物体内成物体内成瘤瘤瘤瘤）的能力）的能力）的能力）的能力为终为终点，点，点，点，评评价化合物致癌活价化合物致癌活价化合物致癌活价化合物致癌活性。性。性。性。实验实验周期短、易重复、周期短、易重复、周期短、易重复、周期短、易重复、实验实验条件易控制，条件易控制，条件易控制，条件易控制，其其其其结结果与体内致癌果与体内致癌果与体内致癌果与体内致癌结结果一致性高。果一致性高。果一致性高。果一致性高。41.3、促癌、促癌剂与共致癌与共致癌剂评价价采用采用啮齿动物的物的皮肤、皮肤、结肠、乳腺、肝、乳腺、肝脏、胰腺和膀胱、胰腺和膀胱等等为模型，通模型，通过在在遗传毒毒性致癌性致癌剂处理理动物之前、同期或之后用物之前、同期或之后用促促癌癌剂或共致癌或共致癌剂处理理动物，确定是否增加物，确定是否增加肿瘤的瘤的发生率，并以此生率，并以此评价化合物的促癌价化合物的促癌或或协同致癌能力。同致癌能力。42.4、有限致癌、有限致癌实验实验终点点为肿瘤形成或癌前病瘤形成或癌前病变，实验时间比比长期致癌期致癌实验短很多，如短很多，如小鼠皮肤瘤、小鼠皮肤瘤、A系小鼠的肺系小鼠的肺肿瘤、雌性瘤、雌性大鼠乳腺癌等。大鼠乳腺癌等。43.5、转基因基因动物模型物模型转转癌基因小鼠：癌基因小鼠：癌基因小鼠：癌基因小鼠：与与与与转录转录启启启启动动子子子子连连接的接的接的接的癌基因癌基因癌基因癌基因转转入入入入后可后可后可后可直接在某些特定的直接在某些特定的直接在某些特定的直接在某些特定的组织组织中高效表达，使中高效表达，使中高效表达，使中高效表达，使该组织细该组织细胞胞胞胞处处于引于引于引于引发发状状状状态态，这类转这类转基因基因基因基因动动物是研究化学物致癌作用物是研究化学物致癌作用物是研究化学物致癌作用物是研究化学物致癌作用的敏感体系。的敏感体系。的敏感体系。的敏感体系。携携携携带带癌基因癌基因癌基因癌基因的的的的转转基因基因基因基因动动物可用于致癌物可用于致癌物可用于致癌物可用于致癌试试验验，试验试验周期周期周期周期仅仅3 3 3 3个月左右，有希望个月左右，有希望个月左右，有希望个月左右，有希望发发展成代替展成代替展成代替展成代替长长期期期期动动物致癌物致癌物致癌物致癌试验试验的的的的实验实验系系系系统统。这这些携些携些携些携带带有癌基因的有癌基因的有癌基因的有癌基因的转转基因基因基因基因动动物，可用来研究物，可用来研究物，可用来研究物，可用来研究外外外外源化学物与源化学物与源化学物与源化学物与肿肿瘤相关基因瘤相关基因瘤相关基因瘤相关基因的作用及外源化学物在致癌的作用及外源化学物在致癌的作用及外源化学物在致癌的作用及外源化学物在致癌不同不同不同不同阶阶段中的作用机制。以各种段中的作用机制。以各种段中的作用机制。以各种段中的作用机制。以各种组织组织特异性的特异性的特异性的特异性的促促促促长剂长剂处处理理理理转转入不同癌基因的小鼠，可入不同癌基因的小鼠，可入不同癌基因的小鼠，可入不同癌基因的小鼠，可为为致癌致癌致癌致癌过过程的研究提程的研究提程的研究提程的研究提供新供新供新供新线线索。索。索。索。44.肿肿瘤抑制基因敲除小鼠：瘤抑制基因敲除小鼠：瘤抑制基因敲除小鼠：瘤抑制基因敲除小鼠：在在在在P53-/-P53-/-P53-/-P53-/-小鼠，小鼠，小鼠，小鼠，肿肿瘤瘤瘤瘤(特特特特别别是淋巴是淋巴是淋巴是淋巴肉瘤肉瘤肉瘤肉瘤)的的的的发发生比正常小鼠生比正常小鼠生比正常小鼠生比正常小鼠(P53+/+)(P53+/+)(P53+/+)(P53+/+)增加而且提前。由于增加而且提前。由于增加而且提前。由于增加而且提前。由于P53-P53-P53-P53-/-/-/-/-小鼠的小鼠的小鼠的小鼠的肿肿瘤瘤瘤瘤发发生具有生具有生具有生具有组织组织特异性，特异性，特异性，特异性，进进一步研究一步研究一步研究一步研究这这些些些些肿肿瘤瘤瘤瘤的的的的遗传遗传学基学基学基学基础础有助于有助于有助于有助于鉴鉴定定定定P53P53P53P53基因的功能。而半合子小鼠基因的功能。而半合子小鼠基因的功能。而半合子小鼠基因的功能。而半合子小鼠(P53+/-)(P53+/-)(P53+/-)(P53+/-)在出生后在出生后在出生后在出生后6 6 6 6个月内自个月内自个月内自个月内自发发癌癌癌癌发发生率低，但在之后生率低，但在之后生率低，但在之后生率低，但在之后发发生生生生淋巴瘤和淋巴瘤和淋巴瘤和淋巴瘤和软组织软组织肉瘤，其中大部分肉瘤，其中大部分肉瘤，其中大部分肉瘤，其中大部分丢丢失失失失P53P53P53P53野生型等位基因。野生型等位基因。野生型等位基因。野生型等位基因。这这种小鼠种小鼠种小鼠种小鼠对遗传对遗传毒性致癌物敏感性并不增加。毒性致癌物敏感性并不增加。毒性致癌物敏感性并不增加。毒性致癌物敏感性并不增加。这这种半合子种半合子种半合子种半合子小鼠也可用于小鼠也可用于小鼠也可用于小鼠也可用于鉴鉴定致癌定致癌定致癌定致癌过过程中的程中的程中的程中的协协作基因。作基因。作基因。作基因。45.转转穿梭穿梭穿梭穿梭质质粒的粒的粒的粒的转转基因基因基因基因动动物小鼠物小鼠物小鼠物小鼠：转转入入入入带带有有有有报报告基告基告基告基因的穿梭因的穿梭因的穿梭因的穿梭载载体，是研究体内基因突体，是研究体内基因突体，是研究体内基因突体，是研究体内基因突变变的的的的转转基因基因基因基因动动物模型。常用的靶基因如物模型。常用的靶基因如物模型。常用的靶基因如物模型。常用的靶基因如lacIlacI、lacZlacZ可通可通可通可通过过噬菌噬菌噬菌噬菌体体外包装等方法，从小鼠基因体体外包装等方法，从小鼠基因体体外包装等方法，从小鼠基因体体外包装等方法，从小鼠基因组组内回收，再在内回收，再在内回收，再在内回收，再在大大大大肠肠杆菌内杆菌内杆菌内杆菌内检测检测靶基因突靶基因突靶基因突靶基因突变变，可，可，可，可为为研究不同器官研究不同器官研究不同器官研究不同器官基因的自基因的自基因的自基因的自发发突突突突变变和和和和诱发诱发突突突突变变的分子机制提供有效的分子机制提供有效的分子机制提供有效的分子机制提供有效的方法的方法的方法的方法。46.判断化学物是否是判断化学物是否是动物致癌物的唯一依据。物致癌物的唯一依据。实验步步骤：每日每日经一定途径一定途径给各个各个组动物一定物一定剂量量的受的受试物，接触期物，接触期为动物物预期寿命的大部分期寿命的大部分时间。接触期每天接触期每天观察察动物各种症状并物各种症状并间隔一定隔一定时间称称量体重和做必要的量体重和做必要的实验检测。实验结束束时处死死动物，物，进行大体解剖及适当的行大体解剖及适当的组织病理学病理学检查，观察其察其肿瘤瘤发生情况。生情况。举例例1:啮齿类致癌致癌实验47.对动物的要求物的要求：特定品系特定品系如如SDSD大鼠（易大鼠（易诱发乳腺癌）、乳腺癌）、A A系小鼠（易系小鼠（易诱发肺、皮肤肺、皮肤及乳腺癌）等；供及乳腺癌）等；供货商必商必须提供提供5 5年内年内该品系小鼠的品系小鼠的自自发肿瘤瘤发生率生率数据；数据；SPFSPF条条件件饲养，以期使养，以期使实验动物寿命达到物寿命达到2-32-3年；年；排除其他因素排除其他因素如如饲料、料、饮水、空气可能水、空气可能含有的致癌物。含有的致癌物。48.动物物选择：易感性是易感性是选择动物最重要依据物最重要依据物种：特定靶器官物种：特定靶器官品系：品系：年年龄：刚断乳断乳性性别：雌雄各半：雌雄各半数量：各数量：各50只只49.剂量量设计一般一般设3个染毒个染毒剂量量组和和1个个对照照组，必要必要时另另设一个溶一个溶剂对照照组。3个染毒个染毒剂量量组包括包括无作用无作用剂量量组、阈剂量量组、发生生肿瘤的瘤的剂量量组（此（此为最最高高剂量量组），以求出明确的），以求出明确的剂量反量反应关关系系50.原原则上上试验期限要求期限要求长期或期或终生。生。致癌致癌试验通常与慢性毒性通常与慢性毒性试验结合起来合起来进行。行。试验期限与染毒期限与染毒时间小鼠最少小鼠最少1.5年年大鼠大鼠2年年51.1、阳性、阳性实验结果果出出现下述情况中的一种或几种下述情况中的一种或几种时可可认为实验结果果为阳阳性：性：1）实验组与与对照照组发生相同种生相同种类的的肿瘤（一种或数瘤（一种或数种）种）时，实验组肿瘤瘤检出率出率显著高于著高于对照照组；或；或肿瘤瘤检出率出率虽未增加，但未增加，但实验组肿瘤瘤发生生时间早于早于对照照组。2）实验组出出现对照照组没有的没有的肿瘤瘤类型。型。3）与）与对照照组相比，相比，实验组动物的平均物的平均肿瘤数瘤数显著增著增加。加。结果的果的观察、分析和察、分析和评定定52.2、阴性、阴性实验结果果满足下列条件才能足下列条件才能评价价实验结果果为阴性：阴性：1）由于）由于组织自溶、自食或管理不当所造成的任何一自溶、自食或管理不当所造成的任何一组动物物损失不超失不超过10%。2）小鼠和地鼠）小鼠和地鼠实验满18个月，大鼠个月，大鼠满24个月个月时，所，所有有动物存活率不低于物存活率不低于50%。3）在两个种属、两种性）在两个种属、两种性别进行的行的实验中，未出中，未出现能能评价价为阴性阴性结果的情况。果的情况。53.3、药物致癌物致癌实验结果的果的评估估药物与一般的物与一般的环境化学物相比，其致癌性境化学物相比，其致癌性评价有其自身价有其自身的特点。由于癌症的潜伏期的特点。由于癌症的潜伏期长，临床床实验中的流行病学中的流行病学调查敏感性低，故其在敏感性低，故其在药物致癌性物致癌性评价中作用价中作用较小。小。在人用在人用药物的开物的开发过程中，一般以程中，一般以遗传性性实验结果果评价价药物物对临床床实验病人的致癌病人的致癌风险，以，以啮齿类长期致癌期致癌实验结果果评价价药物的致癌物的致癌风险。对药物不必像物不必像环境化学物那境化学物那样，需要，需要进行定量行定量风险评估估和外推，而是和外推，而是综合合现有的有的资料和料和临床使用床使用进行行风险/利利益比的益比的评价。价。54.实验过程程动物准物准备：取孕期：取孕期12-14d的叙利的叙利亚地鼠，麻醉后断地鼠，麻醉后断颈处死，死，无菌取子无菌取子宫，分离胎鼠，剪碎，分离胎鼠，剪碎，组织消化，制原代消化，制原代细胞，胞，培养。培养。染毒染毒剂量：量：以以细胞半数存活量（胞半数存活量（LC50）为最高最高剂量，以此量，以此半量半量递减，一般减，一般设5-7个个剂量。每一量。每一剂量量设8-12个平行个平行样本。本。细胞染毒：胞染毒：取取2代代细胞，接入受胞，接入受试物，培养物，培养24h，去除受，去除受试物，培养物，培养10-20天。天。举例例2：叙利：叙利亚地鼠胚胎地鼠胚胎细胞体外胞体外恶性性转化化实验55.集落固定与染色：集落固定与染色：甲醇固定甲醇固定10-20min，Giemsa染色染色20min。镜检：正常正常SHE细胞呈梭形、多角形或胞呈梭形、多角形或锥形，胞形，胞浆丰富，丰富，嗜碱性弱染色浅，嗜碱性弱染色浅，细胞排列有序，集落外胞排列有序，集落外围区区细胞呈胞呈单层生生长、无交叉重叠、无交叉重叠现象；象；转化化细胞呈胞呈纺锤形胞形胞浆明明显减少，减少，细胞嗜碱性增胞嗜碱性增强染色深，染色深，集落外集落外围区区细胞排列胞排列杂乱，相互交叉，重叠生乱，相互交叉，重叠生长明明显。集落分离，染色体数目与核型分析集落分离，染色体数目与核型分析：举例例2：叙利：叙利亚地鼠胚胎地鼠胚胎细胞体外胞体外恶性性转化化实验56.l致癌视频http:/ 美国研究人员发现，癌细胞生长能量源自机体回收利用蛋白机体回收利用蛋白质的过程。小鼠实验显示，阻断这一过程，肿瘤开始萎缩，癌细胞几乎不再转移。这项研究有助开发治癌新药，关键是如何有选择地抑制机体回收利用蛋白质。59.细胞自噬胞自噬l最新研究显示，癌细胞以加快加快细胞自噬胞自噬方式获取能量。细胞自噬是机体一种重要防御和保护机制，是把受损、变性或衰老的蛋白质以及细胞器运输至溶酶体，继而消化降解的过程。l溶酶体不仅是垃圾箱，更像小型回收站。在那里，细胞残骸胞残骸转变成能量成能量。癌细胞似乎知道如何优化这一进程，以获取所需能量。60.改改变基因基因l耶希瓦大学爱因斯坦医学院发展分子生物学教授安娜库埃沃改变基因，阻断这一回收利用进程，癌细胞随即停止分裂，大部分死亡，还把这种方法运用于小鼠，结果小鼠的肿瘤显著萎著萎缩，几乎完全停止转移。”l这项研究所获结果由最新一期美国科学转化医学杂志发表 61.青蛙皮肤提取物可治青蛙皮肤提取物可治疗癌症癌症 l英国贝尔法斯特女王大学的药剂师们近日在青蛙和蟾蜍青蛙和蟾蜍皮肤中发现可遏制肿瘤扩散、最终可能导致肿瘤被扼杀的蛋白质。l研发人员表示，他们已经在老鼠身上进行了试验，结果证明定时向老鼠体内注射取自青蛙皮肤的蛋白质可以减减缓肿瘤瘤中血管的生长速度。62.蜘蛛毒液治蜘蛛毒液治疗乳腺癌乳腺癌 l澳大利亚昆士兰大学分子生物研究所的大卫威尔逊博士在过去两年中收集了近10只弗雷泽岛漏斗网蜘蛛的毒液蜘蛛的毒液。l威尔逊博士接受采访时表示，经过上百万年的进化，蜘蛛的毒液中包含某些特定功能的分子：“这些分子能针对某些特定的区域产生作用，而我们希望其中一些分子能帮助我们消消灭癌癌细胞胞。”63.抗体抗体疗法法l许多癌症都有一个共同特点，即癌细胞表面有一种名为“EpCAM”的蛋白。的蛋白。不久前，一种可攻击“EpCAM”蛋白的抗体被发现。l奥地利因斯布鲁克癌症研究中心的科学家运用免疫组织化学法，通过抗体染色来标注相关的蛋白，对2000多个癌组织样品展开分析。结果发现，与其他癌症类型相比，现有的抗体疗法更适用于乳腺癌、乳腺癌、肾癌、癌、肝癌和膀胱癌肝癌和膀胱癌。64.以癌治癌以癌治癌 l纽约罗戈辛研究所的研究人员首次成功展示了如何使用老鼠肾脏癌细胞抑制或阻止人类癌症扩散。l研究证实，把老鼠癌细胞注入由藻类提取物制成的胶囊并移植到癌症患者的腹部，能够减减缓或阻止或阻止肿瘤生瘤生长。65.l在研究第一阶段，研究人员在30多位癌症多位癌症晚期患者晚期患者身上进行的试验证实了这种疗法的可靠性。在第二阶段，试验扩展到了早期结肠癌、胰腺癌和前列腺癌患者。l此外，研究人员还在40只自发患上前列腺癌、肝癌和乳腺癌的猫和狗猫和狗身上进行了试验。结果显示肿瘤发展受到了抑制，在某些情况下，肿瘤出现坏死或消失坏死或消失，这些动物最终恢复了正常生活。66.资料可以编辑修改使用学习愉快！课件仅供参考哦，实际情况要实际分析哈！感感谢您的您的观看看