高效液相色谱仪期间核查规程[1].doc

青岛华仁药业股份有限公司企业标准
Q/HR 第 4 页 共 4 页
题目： 高效液相色谱仪期间核查作业指导书
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版本号：
批准人： 日期：
颁发部门：
制订依据：GMP（1998）
实施日期：
变更原因及目的：
复印份数：
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1．目的
为了解高效液相色谱仪的状态,维护高效液相色谱仪在两次检定期间校准状态的可信度,减少由于仪器稳定性变化造成的试验结果偏差,特对高效液相色谱仪进行期间检查。
2. 人员及职责
2.1检验员按照指导书负责期间核查计划的具体实施及负责期间核查的核查记录。
2.2审核人：负责审核核查方案、监督期间核查过程、确认核查效果、审核数据。审核人可由中心负责人兼任。
2.2 质量部长审核期间核查结果并负责组织处理核查发现的不符合项目,审核批准核查报告。
2.3 资料管理员负责仪器设备期间核查记录的归档保管。
3. 引用标准
3.1 jjg705-2002液相色谱仪检定规程
3.2液相色谱仪使用、维护说明书。
4. 核查条件
4.1 环境条件
4.1.1环境温度5~35 ℃，相对湿度20%~85%。
4.1.2室内无强烈的机械振动和电磁干扰。
4.2 仪器安装要求：仪器应安装在平稳的工作台面上，电缆线的接插件应紧密配合，仪器接地良好。
4.3 电源要求：电压为（220±22）V，频率为（50±1）HZ。
4.4期间核查的准备
4.4.1测试设备
秒表： 分度值不大于0.1秒
电子分析天平
微量注射器：10μL， 50μL，（自动进样器不需）
游标卡尺：15cm/0.02mm以上器具需计量检定合格
4.4.2试药：萘 甲醇（色谱纯）
4.5人员的资格确认 记载所有参与验证工作的人员，并对他们的资格进行确认。
姓名
部门
职责
签名
日期

质量部

5. 测试项目和技术指标
确认部件
确认项目
合格标准
输液泵
流量设定值误差SS
0.5ml/min:＜5%；1.0ml/min:＜3%
流量稳定性误差SR
0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%
自动进样器
进样量准确度误差
≤±2%
检测器
基线噪声
≤ 2×10－4AU
基线漂移
≤5×10－3AU/h
整机性能
定性测量重复性误差
RSD≤1.5%（n=6）
定量测量重复性误差
RSD≤3.0%（n=6）
4 测试方法
4.1 流量设定值误差SS和流量稳定性误差SR
选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，启动仪器，待压力稳定后，在流动相出口处用清洁、干燥已称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5分钟，测量3次，称重，计算SS和SR。
SS=（Fm平 - FS）/FS×100%
SR =（Fmax-Fmin）/ F m平 ×100%
式中：SS—流量设定值误差（%）
Fm—流量实测值 Fm=（W2-W1）/ρt·t
W2—容量瓶+流动相的质量（g）
W1—容量瓶的质量（g）
FS—流量设定值（mL/min）
ρt—实验温度下流动相的密度（g/cm3）
t—收集流动相的时间（min）
SR—流量稳定性误差（%）
Fmax—同一组测量中流量最大值（mL/min）
Fmin—同一组测量中流量最小值（mL/min）
F m平 —同一组测量的算术平均值（mL/min）
4.2 基线噪声ND和基线漂移
选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为254nm，启动仪器，待压力稳定后，记录基线30min，计算基线噪声（用AU表示）。
基线漂移用1h内基线偏离原点的值（AU/h）表示。
4.3 定性、定量重复性检查
选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为254nm，启动仪器，待压力稳定后，精密量取1×10-4g/mL萘/甲醇标准溶液注入高效液相色谱仪，进样量5～10μL，连续测定6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，分别计算相对标准偏差（RSD）。
4.4自动进样器进样量准确度误差试验
取1.5ml进样瓶装入1ml水，用天平精密称定其重量，然后置于自动进样器上让其进样10次，每次50μl。进样完成后再精密称定其重量，由重量差计算进样量准确度。
5 测试周期
一年
6.负责人对核查结果进行综合评价，做出核查结论，发放核查证书，确认需补充项目及时间。对验证结果的评价应包括：
6.1核查试验是否有遗漏？核查记录是否完整？
6.2核查试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步的补充试验？

附：反相液相色谱柱性能测试
1.性能指标
项目
标准
理论塔板数
3×104 -- 4×104
不对称因子
0.95 -- 1.05
2.柱性能测试方法
2.1测试条件与标准溶液
2.1.1测试合格的液相色谱仪
2.1.2流动相：甲醇-水（85：15）；流速1.0ml/min(直径4.6mm柱)；检测波长254nm
2.1.3标准溶液：含10-4g/ml尿嘧啶；10-5g/ml联苯和萘（蒽）的甲醇溶液
2.1.4进样量：10μL
2.1.5游标卡尺
3.测试：
3.1将色谱柱连接到合格的色谱仪
3.2进样，记录色谱图。重复3次，取平均值。
保留时间需精确到0.02min
3.3计算每米的理论塔板数（中国药典2005年版附录）
n＝5.54(tR/Wh/2)2 ×1000/L L=柱长（mm）
3.4 根据色谱图计算不对称因子（中国药典2005年版附录）

期间核查记录
仪器名称

型号

制造商

系列号

出厂日期

所在部门

准确度级别

安装地点

室温

相对湿度

外观检查

核查方法
柱规格：
流动相： 流速：
标准液：
检测波长
流量设定值误差SS和流量稳定性误差SR
序号
时间min
空称量瓶g
称量瓶加水重g
标准值
流量设定值误差
平均值
1

2

3

计算
流量稳定性误差
结论：
基线噪声ND和基线漂移
见图谱
定性、定量重复性检查
序号
保留时间
保留时间RSD
峰面积
峰面积RSD
1

2

3

4

5

6

自动进样器进样量准确度误差试验
序号
样品瓶+水重
进样后样品瓶
+水重
进样10次的水重
准确度误差
1

2

检测者：
年 月 日
复核者：
年 月 日
确认

检验中心
年 月 日

质量部
年 月 日

验证委员会
年 月 日