GB 31656.4-2021 食品安全国家标准 水产品中氯丙嗪残留量的测定 液相色谱－串联质谱法.pdf

食品安全国家标准水产品中氯丙嗪残留量的测定液相色谱-串联质谱法20中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号：XXXX-XXXX67.120.30CCS X31656.42021National food safety standardDetermination of chlorpromazine residue in fishery products byliquid chromatography-tandem mass spectrometric methodGB2021?09?16发布2022?02?01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发 布国 家 市 场 监 督 管 理 总 局中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部G B 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分: 标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件系首次发布.G B 食品安全国家标准水产品中氯丙嗪残留量的测定液相色谱串联质谱法范围本文件规定了水产品中氯丙嗪残留检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法.本文件适用于鱼、 虾、 蟹可食组织中氯丙嗪残留量的检测.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件; 不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法G B/T 水产品抽样规范术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理试样中残留的氯丙嗪, 用乙腈提取, 混合型阳离子固相萃取柱净化, 液相色谱串联质谱测定, 内标法定量.试剂和材料以下所用试剂, 除另有注明外均为分析纯, 水为符合G B/T 规定的一级水. 试剂 乙腈(CHC N) : 色谱纯. 甲醇(CHOH) : 色谱纯. 甲酸(HC OOH) : 色谱纯. 乙酸铵(NHCHO) . 氨水(NHHO) . 标准品 盐酸氯丙嗪(C h l o r p r o m a z i n eh y d r o c h l o r i d e,C H C lNS,C A S号: ) : 含量 . 盐酸氯丙嗪 d(C h l o r p r o m a z i n e dH y d r o c h l o r i d e,C H DC lNS,C A S号: ) : 含量 . 溶液配制 氨化甲醇溶液: 取氨水mL、 甲醇 mL, 混匀. mm o l/L乙酸铵溶液: 取乙酸铵 g, 加甲酸mL, 用适量水溶解并稀释至 mL. 甲醇乙酸铵溶液: 取甲醇 mL、mm o l/L乙酸铵溶液 mL, 混匀. 标准溶液制备 氯丙嗪标准储备液( g/mL) : 取盐酸氯丙嗪标准品约 m g, 精密称定, 加甲醇适量使溶解并G B 稀释定容至 mL容量瓶, 摇匀, 即得. 以下避光保存, 有效期个月. 内标储备液( g/mL) : 取盐酸氯丙嗪 D标准品约 m g, 精密称定, 加甲醇适量使溶解并稀释定容至 m L容量瓶, 摇匀, 即得. 以下避光保存, 有效期个月. 氯丙嗪标准中间液( n g/mL) : 准确量取氯丙嗪标准储备液适量, 用甲醇稀释制成浓度为 n g/m L氯丙嗪标准中间液. 以下避光保存, 有效期个月. 内标工作液( n g/mL) : 准确量取内标储备液适量, 用甲醇稀释配制成浓度为 n g/mL氯丙嗪 D内标工作液. 以下避光保存, 有效期个月. 材料 混合型阳离子固相萃取柱: m g/mL, 或相当者. 水相聚砜醚针式滤器: m.仪器和设备 液相色谱串联质谱仪: 配电喷雾离子源. 天平: 感量 g和 g. 均质机. 离心机: r/m i n. 旋转蒸发仪. 涡旋混合器. 超声波清洗器.测定步骤 试样的制备按G B/T 中附录B的要求制样.a)取匀浆后的供试样品, 作为供试试样;b)取匀浆后的空白样品, 作为空白试样;c)取匀浆后的空白样品, 添加适宜浓度的标准中间液, 作为空白添加试样. 试样的保存 以下保存, 有效期个月.测定步骤 提取取试样g( 准确至 g) 于 mL离心管中, 加内标工作液 L, 加乙腈 mL, 均质m i n, 超声 m i n, r/m i n离心m i n, 将上清液转移至另一 mL离心管中; 另取乙腈 mL清洗均质机 s, 洗液倒入残渣中, 涡旋混合m i n, 超声 m i n, r/m i n离心m i n, 合并上清液, r/m i n离心m i n, 取上清液, 备用. 净化取固相萃取柱, 依次用甲醇、 水各mL活化, 将上清液过柱, 速度约为每秒滴, 用甲醇mL淋洗,弃去流出液, 抽干.用氨化甲醇溶液mL洗脱, 收集洗脱液, 氮气吹干.准确加入 甲醇乙酸铵溶液m L溶解残留物, 用水相针式滤器过滤至进样小瓶中, 供液相色谱串联质谱测定. 基质标准曲线的制备准确量取适量 n g/mL氯丙嗪标准中间液和 n g/mL内标工作液, 氮气吹干, 用空白基质液配制成同位素内标物浓度为 n g/m L, 氯丙嗪浓度为 n g/m L、 n g/m L、 n g/m L、 n g/m L和 n g/m L的系列基质标准工作液, 供液相色谱串联质谱测定.以氯丙嗪特征离子质量色谱峰面积与G B 同位素内标物特征离子质量色谱峰面积比值为纵坐标、 相应的浓度为横坐标绘制标准曲线, 求回归方程和相关系数. 测定 液相色谱条件a)色谱柱:C 柱, mm mm,m, 或性能相当;b)流速: mL/m i n;c)柱温: ;d)进样量: L;e)流动相:A为甲醇,B为mm o l/L乙酸铵, 梯度洗脱条件见表.表梯度洗脱条件时间m i n甲醇mm o l/L乙酸铵溶液 质谱条件a)离子源: 电喷雾离子源;b)扫描方式: 正离子扫描;c)检测方式: 多反应监测;d)喷雾电压: V;e)离子传输毛细管温度: ;f)源内碰撞诱导解离电压:V;g)雾化气流速: L/h;h)辅助气流速: L/h;i)母离子、 子离子和碰撞能量参考值见表.表母离子、 子离子和碰撞能量参考质谱条件目标化合物母离子m/z子离子m/z碰撞能量e V氯丙嗪 a 氯丙嗪 D a为定量离子. 测定法取试样溶液和基质标准工作液等体积进样, 作单点或多点校准, 以色谱峰面积定量, 内标法计算.基质标准溶液及试样溶液中氯丙嗪的响应值均应在仪器检测的线性范围之内.通过试样中待测物的保留时间、 特征离子相对丰度与浓度相近的基质标准溶液的保留时间、 特征离子相对丰度相对照定性.试样液中待测物与标准品的保留时间偏差在 以内; 特征离子相对丰度偏差满足表的要求, 则可判定试样中存在相应的被测物.在上述色谱质谱条件下, 氯丙嗪及内标标准溶液特征离子色谱图见附录A.G B 表相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分号相对离子丰度 允许的最大偏差 空白试验取空白试料, 除不加标准溶液外, 采用相同的测定步骤进行平行操作.结果计算和表述试样中氯丙嗪的残留量按公式() 计算.XCVfm()式中:X 试样中氯丙嗪残留量的数值, 单位为微克每千克(g/k g) ;C 从标准曲线计算得到的试样溶液中氯丙嗪浓度的数值, 单位为纳克每毫升(n g/mL) ;V 溶解残余物所用体积的数值, 单位为毫升(mL) ;f 稀释倍数;m 供试试样质量的数值, 单位为克(g) . 方法灵敏度、 准确度和精密度 灵敏度本方法检出限为 g/k g, 定量限为 g/k g. 准确度本方法氯丙嗪在g/k g g/k g添加浓度范围内, 回收率为 . 精密度本方法的批内相对标准偏差 , 批间相对标准偏差 .G B 附录A( 资料性)特征离子质量色谱图氯丙嗪及同位素内标标准溶液特征离子质量色谱图见图A .标引序号说明: 氯丙嗪特征离子质量色谱图( ) ; 氯丙嗪特征离子质量色谱图( ) ; 氯丙嗪 D特征离子质量色谱图( ) .图A 氯丙嗪及同位素内标标准溶液特征离子质量色谱图( n g/m L)31656.42021GBGB31656.42021书 书 书1 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?