高二生物PCR技术(课堂PPT).ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,课题2,多聚酶链式反应（PCR)扩增DNA片段,1,温故知新1,组成DNA分子的基本单位是什么?,这些基本单位是如何连接成DNA分子的?,DNA分子结构有什么特点？,2,脱氧核苷酸,脱氧核苷,磷酸,脱氧核糖,含氮碱基,嘌呤,嘧啶,腺嘌呤（A）,鸟嘌呤（G）,胞嘧啶（C）,胸腺嘧啶（T）,3,1,2,3,4,5,4,碱基,OH,O,O,P,O,HO,OH,O,O,P,O,HO,碱基,OH,OH,5,O,O,P,O,HO,碱基,O,OH,O,O,P,O,HO,OH,碱基,碱基,脱氧核糖,磷酸基团,碱基,脱氧核糖,碱基,脱氧核糖,5,3,脱氧核苷酸链结构简图,磷酸二酯键,6,5,5,3,3,7,DNA,分子的复制需要哪些条件？,DNA,分子的复制过程是怎样的？,温故知新2,8,DNA母链：,提供复制的模板,解旋酶：,打开DNA双链,4种脱氧核苷酸：,合成子链的原料,DNA聚合酶：,催化合成DNA子链,ATP：,为复制过程提供能量,引物：,使DNA聚合酶从引物的3,端开始连接脱氧核苷酸,DNA复制的条件,9,10,一、PCR原理：,PCR（多聚酶链式反应）技术,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。,利用了,DNA的热变性,原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。,11,DNA母链：,提供复制的模板,解旋酶：,打开DNA双链,4种脱氧核苷酸：,合成子链的原料,DNA聚合酶：,催化合成DNA子链,ATP：,为复制过程提供能量,引物：,使DNA聚合酶从引物的3,端开始连接脱氧核苷酸,PCR反应的条件,80100,耐热的DNA聚合酶,缓冲溶液：,维持反应的pH值不变,12,二、PCR反应的过程,1、变性：,温度上升到,90,以上,时,双链,DNA解聚,成为单链。,2、复性（退火）：,温度下降到,50,左右,引物与模板DNA单链,的互补序列配对,结合,。,3、延伸：,温度上升到,72,左右,溶液中的4种脱氧核苷酸在,Taq,DNA聚合酶,的作用下,根据碱基互补配对的原则,合成新的DNA链,。,13,14,