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耳聋基因诊断耳聋基因诊断 揭示耳聋背后的秘密揭示耳聋背后的秘密 哈尔滨医科大学附属第四医院检验科哈尔滨医科大学附属第四医院检验科梁红艳梁红艳背背景景1耳聋的遗传模式耳聋的遗传模式 2常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 3耳聋基因诊断的方法耳聋基因诊断的方法 4常用常用SNP检测方法检测方法 5传音、感音及其听觉传导通路中的听神经和各级中枢发生病变，引起听功能障碍，产生不同程度的听力减退。根据听力减退的程度不同，又称之为听力障碍、听力减退、听力下降等。耳聋耳聋背背景景1 听力正常父亲+听力正常母亲听力普通人中，大约有56%的人也会携带隐性状态的耳聋基因突变。如果夫妻双方都携带相同的耳聋基因，就算听力正常，也有高达25%的几率生育出聋儿。例如：父听力正常 SLC26A4 2168位点杂合突变 母听力正常 SLC26A4 IVS-7 位点杂合突变 孩子先天性耳聋 SLC26A4 2168和IVS-7 位点杂合突变按遗传模式分类常染色体显性遗传常染色体显性遗传常染色体隐性遗传常染色体隐性遗传X和和Y染色体伴性遗传染色体伴性遗传 线粒体母系遗传线粒体母系遗传 耳聋的遗传模式耳聋的遗传模式 2常染色体显性遗传常染色体显性遗传在一个大家系中可以有很多耳聋病人，耳聋就像一个幽灵一样在这个家系中游荡 常染色体隐性遗传常染色体隐性遗传比例最高，由于这种患儿需要父母各携带一个致病等位基因，因此通常表现为散发病例 X和和Y染色体伴性遗传染色体伴性遗传 线粒体母系遗传线粒体母系遗传 一般比较少见，X连锁遗传多是由母亲传给儿子，女儿一般不发病，或者病情较轻，Y连锁遗传是男性相传，更为少见 母亲将基因传给儿子或女儿，有些线粒体基因突变患儿可以出现氨基糖甙类药物耳毒性，这种患儿即使使用正常剂量的药物，有时一针即可致聋 常染色体显性遗传常染色体显性遗传DFNA，迄今已定位27型（DFNA1DFNA31)NSHI类型基因临床表现定位常染色体显性遗传：学语后进行性感音神经性聋学语后进行性感音神经性聋，语言发育正常语言发育正常DFNA1 HAID1 低频听力受损5q31DFNA2 GJB3,KCNQ4 在1 000 Hz以上频率每年下降15 dB；1 000 Hz以下每年下降0.20.5 dB。逐渐发展为全频率中-重度聋1p34DFNA3 GJB2,GJB6 学语前中-重度感音神经性聋，听力常保持稳定或仅呈轻微进行性下降13q12DFNA5 DFNA5 听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋7p15DFNA6低频听力受损低频听力受损DFNA8-tectorin 学语前中-重度感音神经性聋，听力常保持稳定或仅呈轻微进行性下降11q22-24DFNA9 COCH 听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋14q12-13DFNA11 Myosin7A 听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋11q12.3-21DFNA12-tectorin 学语前中-重度感音神经性聋，听力常保持稳定或仅呈轻微进行性下降11q22-24DFNA15POU4F3听力减退与年龄和频率有关，多为高频神经性聋5q31NSHI类型基因临床表现定位常染色体隐性遗传：双耳学语前非进行性重双耳学语前非进行性重-深度感音神经性聋深度感音神经性聋DFNB1 GJB2GJB2 临床表型不衡定，可为先天性聋或110岁期间进行性听力下降，受损程度可从轻重度聋13q12DFNB2 Myosin7A 听力下降在5008 000 Hz大于90 dB11q12.3-21DFNB3 Myosin15 17q11.2DFNB4 PDSPDS（SLC26A4SLC26A4)50%合并有前庭导水管扩大7q31DFNB8学语后进行性听力减退，但比常染色体显性遗传发病年龄早，听力下降速度快DFNB9 OTOF 2p22-23DFNB21-tectorin 11q22-24常染色体隐性遗传常染色体隐性遗传常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 3GJB212rRNAGJB3常见致聋常见致聋基因基因SLC26A4常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 3GJB2GJB2 基因突变是非综合征型常染色体隐性遗传性语前聋的主要原因种族差异明显，在欧美地区，35delG为主；在东亚,包括中国、日本和韩国,235delC 是常见的GJB2 突变据报道，中国非综合征型耳聋人群中，235delC占16.3%。但我们的研究表明，在黑龙江地区，约占30%左右。治疗方法：人工耳蜗植入 常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 3GJB2GJB2 常见的突变位点1、35delG：在欧美多见，亚洲少。2、79G-A突变：目前认为是基因多态性3、109A-G突变：目前认为是基因多态性4、176del 17bp 5、235delC：在中国最常见6、299-300delAT7、341A-G突变也称PDS基因，这种基因突变可以造成两种临床表现，一是Pendred综合征，表现为甲状腺肿大和耳聋；另外一些患儿仅表现为耳聋，CT检查可以发现前庭导水管扩大 这些孩子在出生后有些听力是正常的，通常在一次轻微的外伤后（特别是头部外伤）出现听力下降，经过一段时间后听力可以部分恢复，但是经过多次发作，听力逐渐下降，最终需要植入人工耳蜗来帮助这些患儿恢复听力。SLC26A4对于这些孩子进行SLC26A4基因诊断，可以早期发现，提醒家长注意尽量避免孩子受到外伤，延缓听力下降的时间，可以为孩子争取宝贵的语言发育时间。常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 312rRNA线粒体基因突变与氨基糖类药物的耳毒性有关 常用氨基糖类药物有庆大霉素、链霉素、小诺霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素、新霉素等等 临床上应用较为广泛，这些药物的过量或长期应用可以导致耳鸣、听力下降，但也有一些患者仅应用一次这些药物就出现耳鸣，甚至严重的听力下降，这些患者往往就与线粒体基因突变有关，也有些患者并不表现为氨基糖甙类药物的耳毒性，即使不用药，也会像其它基因突变一样出现耳聋。常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 3GJB3常见的致聋基因及位点常见的致聋基因及位点 3GJB3纯合突变容易导致孩子后天感音神经性耳聋 耳聋基因诊断的方法耳聋基因诊断的方法 4芯片法荧光探针法ARMS-PCR法测序法芯片法荧光PCR法ARMS-PCR法测序法有批号的厂商博奥济南英盛智海生物中生北控检测位点GJB2 35del GGJB2 176 del 17bpGJB2 235del CGJB2 299-300delATGJB3 538 CTSLC26A4 2168 AGSLC26A4 IVS-712sRNA 1494 CT12sRNA 1555 AG济南英盛：GJB2 235del C智海生物12sRNA 1494 CT12sRNA 1555 AGGJB2 35del GSLC26A4 IVS-712sRNA 1494 CT12sRNA 1555 AG根据需要检测优点基因位点多快速，成本低，无须特殊设备；可避免实验室污染成本低可发现其他基因突变，是金标准缺点需要基因芯片检测的系列设备位点少，需要后续检测操作繁琐，耗时长；易造成实验室污染需要特殊设备；成本高位点少，需要后续检测成本高易造成实验室污染适用大批量检测适用大批量检测技术含量高测序技术测序技术常用常用SNP检测方法检测方法 5PCR-RFLP分型技术分型技术 常用常用SNP检测方法检测方法 5TaqMan探针分型技术探针分型技术 常用常用SNP检测方法检测方法 5MultiplexSNaPshot分型技术分型技术 常用常用SNP检测方法检测方法 5电离飞行时间质谱（电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）分型技术）分型技术 常用常用SNP检测方法检测方法 5HRM技术技术常用常用SNP检测方法检测方法 5等位基因特异PCR技术常用常用SNP检测方法检测方法 5