大肠杆菌生化实验.docx

　细菌常用生理生化反应实验结果观察
一 结果观察
１　葡萄糖发酵实验
直接观察试管, 试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌,不变者为阴性菌.

左边为恶臭假单胞菌，有气泡并变为黄色；右边为大肠杆菌,
２　 V. P. 反应和甲基红试验:
将培养好的液体培养基分装于两个干净的小试管中,在一管中滴入2-3滴甲基红试剂, 溶液变红的为甲基红阳性菌,不变的为甲基红阴性菌. 在另一管中加入V. P. 试剂,在37℃保温15分钟, 变红者为阳性菌,不变者为阴性菌.

VP，图为右边为大肠杆菌，溶液变红，为阳性菌。
３吲哚实验
在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌.

左边为大肠杆菌，出现红色阳性菌；右边为产气杆菌，颜色不变，阴性菌。

４　硝酸盐还原实验
在点滴板上滴入革里斯试剂 A液和B液，如过溶液变红说明有亚硝酸盐，为硝酸盐还原阳性菌，如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂，如果变蓝，说明此菌为阴性菌；如果不变色，说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌．

右下方恶臭假单胞菌，加入革里斯试剂A、B后不变色，再加入二苯胺试剂后变蓝，为阴性菌；左上方大肠杆菌为红色。
５　柠檬酸盐实验
直接观察斜面，斜面变兰色者为柠檬酸盐利用阳性菌，不变者为阴性菌．

左边产生蓝色，产气杆菌 阳性；右边为大肠杆菌，阴性。

６　明胶水解
向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌．

左边为大肠杆菌，出现透明圈，阳性；右边为枯草杆菌，阴性菌。
7 淀粉水解实验
向培养好的淀粉培养基平板上加入碘液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为淀粉水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌．

左边枯草杆菌，出现透明圈，阳性；右边大肠杆菌，无透明圈，阴形。
8 硫化氢产生实验
直接观察培养好的培养基，出现黑色沉淀者为阳性菌，不变者为阴性菌．

左边为变形杆，菌出现黑色沉淀，阳性菌；右边为大肠杆菌，阴性菌。
二 思考题
１　你的实验结果与实验预期是否相同？如果不同试分析原因．
答：与试验预期部分相符。
不相符的结果多处于大肠杆菌接种处，可能原因—大肠杆菌不足。
２　你认为在做生理生化反应实验中应注意什么问题？
答：1）要严格按照培养基配方配制培养基。
2）观察结果时要注意滴加药量及反应时间