诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响.pdf

HitologyZI:690.2023年8 月第43卷第8 期口腔医学诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响张岚，李艳萍，何丽娜，潘爽，王冉旭，牛玉梅摘要目的石研究诺丽提取物溶液（Morinda citrifolia juice,MCJ）联合EDTA对牙本质机械性能的影响，评估MCJ作为根管冲洗液应用于根管治疗的效果。方法选取2 1颗人单根前磨牙和36 颗人第三磨牙，根据冲洗液不同随机分为阴性对照组和5个实验组。阴性对照组：蒸馏水；实验组：A组5.2 5%NaCIO、B组6%MCJ、C组17%EDTA、D 组5.2 5%NaCIO-17%EDTA、E组6%MCJ-17%EDTA。随机取12 颗人单根前磨牙，近远中向劈开，每个半根为一个样本，共2 4个样本。不同冲洗液浸泡后进行显微硬度测试；剩余的9颗人单根前磨牙，制备36 个沙漏型牙本质样本块，浸泡后进行极限拉伸强度测试；36 颗人第三磨牙截根后切割，冠部牙本质制备7 2 个矩形牙本质本块，浸泡后每组随机取6 个样本分别进行三点弯曲强度和压缩强度测试。结果根颈1/3区,B、E组牙本质显微硬度明显大于A组、C组和D组（P0.05）；根中1/3区，B组牙本质显微硬度明显大于A、C、D、E组（P0.05）；根尖1/3区,B、E组牙本质显微硬度明显大于A组牙本质显微硬度（P0.05）。B、D、E组牙本质极限抗拉强度明显高于A、C组（P0.05）。B组牙本质三点弯曲强度明显高于A、C组，E组牙本质三点弯曲强度明显高于D组（P0.05）。B、E组牙本质压缩强度明显高于A、D 组（P0.05）。结论诺丽对牙本质机械性能的影响小于5.2 5%NaC1O；诺丽联合17%EDTA应用对牙本质机械性能的影响小于5.2 5%NaCIO联合17%EDTA。【关键词根管冲洗；诺丽；机械性能中图分类号R781.05文献标识码A文章编号1003-9872(2023)08-0690-07doi10.13591/ki.kqyx.2023.08.004Effects of Morinda citrifolia combined with EDTA root canal irrigation on the mechanical properties of dentinHANG Lan,LI Yanping,HE Lina,PAN Shuang,WANG Ranxu,NIU Yumei.(Department of Endodontics,School of Stomoarbin Medical University,Department of Endodontics,the First Afiliated Hospital of Harbin Medical,Harbin 150001,ChinaAbstract:Objective To study the effect of Morinda citrifolia juice combined with EDTA on the mechanical properties of dentin,and evaluate the application prospect of MCJ as a root canal irrigation solution.Methods Twenty-one human single-rooted premolarsand 36 human third molars were selected and randomly divided into negative control group and five experimental groups according todifferent immersion protocols.Negative control group:distlled water;experimental group:5.25%NaCIO in group A,6%MCJ in groupB,17%EDTA in group C,5.25%NaCI0-17%EDTA in group D,and 6%MCJ-17%EDTA in group E.12 human single-rooted pre-molars were randomly selected and split in the mesio-distal direction.Each half root was one sample,so there were a total of 24 sam-ples.They were randomly divided into 6 groups,and 4 samples from each group for micro-hardness test.The remaining 9 human single-rooted premolars were split mesio-distally to prepare 36 hourglass dentin sample blocks,and 6 samples were randomly selected fromeach group for ultimate tensile strength test.After root resection of 36 human third molars,coronal dentin prepared 72 rectangular den-tin blocks.After immersion,6 samples were randomly selected from each group for flexural strength and compressive strength tests,re-spectively.Results In the crown 1/3 area,the dentin micro-hardness in groups B and E were significantly greater than that ingroups A,C and D(P0.05);in the middle 1/3 area of the root,the dentin micro-hardness in group B was significantly greater thanthat in groups A,C,D,and E(P0.05);in the apical 1/3 area,the dentin micro-hardness in groups B and E were significantly grea-ter than that in group A(P0.05).T h e u l t i ma t e t e n s i l e s t r e n g t h o f d e n t i n i n g r o u p s B,D a n d E w e r e s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h a t i ngroups A and C(P0.05).The dentin flexural strength of group B was significantly higher than that of groups A and C,and the den-tin flexural strength of group E was significantly higher than that of group D(P0.05).The dentin compression strength in groups Band E were significantly higher than that in groups A and D(P0.05).Conclusion MCJ has less effect on the mechanical propertiesof dentin than 5.25%NaCIO;MCJ combined with 17%EDTA root canal irrigation has less effect on the mechanical properties of dentinthan 5.25%NaClO combined with 17%EDTA.Keywords:root canal irrigation;Morinda citrifolia juice;mechanical properties作者单位：哈尔滨医科大学附属口腔医院牙体牙髓科，哈尔滨医科大学附属第一医院牙体牙髓科，黑龙江哈尔滨（150 0 0 1）通信作者：牛玉梅Tel：（0 451)8 55532 34E-mail:niuym Stomatology,2023,43(8):690-696根管治疗成功的关键是彻底清除根管内的感染和防止再感染。根管机械预备后仍有35%50%的691张岚，等.诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响根管壁未被切削到1，致使根管系统内有大量感染物质存在。同时，机械预备过程中产生大量感染牙本质碎屑和站污层，这些物质都需要化学预备去除。临床常用的根管冲洗液有NaCIO、ED T A 等，体外研究表明，NaClO浓度越高，使用NaClO冲洗根管时间越长，对牙本质显微硬度影响越大，特别是对靠近根管内壁的牙本质影响更为显著 2 。此外,与生理盐水相比，5.2 5%NaClO溶液冲洗能够导致牙本质弯曲强度和弹性模量降低 3。同样,EDTA作为根管冲洗液会在一定程度上导致牙本质显微硬度降低 4-5。但是,EDTA溶液对牙本质的弯曲强度没有负面影响 6 。因此，根管治疗过程中尽量避免单独使用EDTA作为根管冲洗液，通常将NaCIO与EDTA联合使用。近年来一些研究证实，诺丽提取物溶液（Morinda citrifolia juice，M CJ）由于其良好的抗菌效果而有应用于根管治疗或口腔漱口水的可能性。本课题组前期对MCJ进行了相关的研究：通过对体外细菌实验结果进行定量和定性分析，显示MCJ与NaCIO对放线菌、粪肠球菌及白念珠菌的抗菌效果无显著性差异,且MCJ显著抑菌作用的最低浓度为6%7 ；与NaCIO相比，6%MCJ对人根尖乳头干细胞和人牙周膜成纤维细胞的细胞增殖、细胞形态、细胞迁移能力的影响更小，且对人根尖乳头干细胞成牙向分化及矿化能力的影响更小 8 ;6%MCJ与17%EDTA联合应用能有效去除站污层且先使用6%MCJ冲洗，再使用17%EDTA冲洗更有助于玷污层的清除和根管封闭剂的渗透 9。因此，本研究在课题组前期研究的基础上，将进一步评估6%MCJ与17%EDTA联合使用对牙本质机械性能的影响。1材料与方法1.1实验材料与设备金刚砂车针（日本Mani公司）；5.2 5%NaClO（中国福建维真园医药科技有限公司）；17%EDTA（中国武汉朗力生物医药有限公司）；诺丽粉（中国海南百舒堂生物科技开发有限公司）；SYJ-150型低速切片机（中国沈阳科晶公司）；HV-1000A硬度计（上海精密仪器仪表有限公司）；体视显微镜（德国Leica公司）；万能材料试验机（美国Instron公司）。1.2实验方法1.2.1样本的选择本研究获哈尔滨医科大学医学伦理专家委员会批准。2 0 2 1年6 月至9月于哈尔滨医科大学附属口腔医院收集因正畸需要而新鲜拔除的2 1颗单根下颌前磨牙和36 颗第三磨牙，清洗黏附的软组织，浸泡在0.9%生理盐水中，储存在4冰箱中备用。纳人标准：下颌前磨牙，拍摄近远中及颊舌向X线片，确定样本为单根管、根管弯曲不超过10，根尖发育完全，无内外根吸收，无钙化，无牙髓治疗史；第三磨牙要求冠部无龋齿、裂纹、无充填处理1.2.2牙本质显微硬度测试随机选取12 颗单根前磨牙，使用SYJ-150低速金刚石切割机去除牙冠后获得（12.0 0.5）mm标准根长，使用双面金刚石圆盘钻在水冷条件下用高速手机在根的颊侧和舌侧外表面上创建凹槽，并用凿子将牙根纵向分成两半以获得2 4个半根，在体视显微镜（型号TZ240）下检查样本，所有样本均无裂纹。分别将样本包埋于丙烯酸树脂中，将有凹沟的一半牙根面朝上，依次使用800#、150 0#、2 0 0 0#的金相砂纸打磨，以去除表面划痕 10 。所有样本随机分为6 组,分别放人2 mL的A组5.2 5%NaCIO、B组6%MCJ、C 组17%EDTA、D组5.2 5%NaC10-17%EDTA、E组6%MCJ-17%EDTA中浸泡5min；阴性对照组在蒸馏水中浸泡5min。然后，实验组样本分别用蒸馏水彻底冲洗2min，以防止牙本质表面连续脱矿。将牙根分为根颈1/3、根中1/3和根尖1/3的3个区域（图1），在每个区域中距离根管壁50 0 m处各取3个点进行维氏硬度测试，测试施加载荷参数为10 0 g，维持15s,记录数值。根颈1/3根中1/3根尖1/3根管壁500m菱形压痕图1显微硬度测试菱形压痕示意图Fig.1Schematic diagram of the diamond-shapedindentation of the micro-hardness test1.2.3极限拉伸强度测试剩余9个单根前磨牙使用SYJ-150低速金刚石切割机去除牙冠后获得（12.0 0.5）mm标准根长，用高速手机沿颊舌垂直向钻磨两条纵沟，沿纵沟用骨凿劈开获得18 个半根，然后每个半根都以垂直与牙体长轴的方向以2mm为厚度进行切割,再通过使用横截面积为1mm的圆柱形金刚砂钻针将样本制备成沙漏形状。样本数、分组及处理方法同1.2.2。将样本固定于万能材料实验机的夹钳上，以5mm/min拉伸载荷，记录样?6922023年8 月第43卷第8 期口腔医学本断裂瞬间的应力值。极限拉伸强度（MPa）通过以下公式计算：F/A,其中F（N）是应力,A（m m）是断裂部位的面积（图2)12 对照A:5.25%NaC101.00 mmB:6%MCJC:17%EDTAD:5.25%NaC10-17%EDTAE:6%MCJ-17%EDTA图2极限拉伸强度样本制备及测试示意图Fig.2Schematic diagram of ultimate tensile strength sample preparation and test1.2.4三点弯曲强度测试使用第三磨牙冠部牙本质进行三点弯曲强度评估。随机选取18 颗第三磨牙，在大量蒸馏水冷却的条件下，用SYJ-150低速金刚石切割机垂直于牙齿长轴在牙冠部进行切割，得到牙本质盘并进一步修整，最终制备成36 个矩形牙本质块（长（9.30 1.30）mm、宽（1.98 0.53）mm、厚（1.7 90.19）mm）。将36 个牙本质块随机分成6组（n=6）（分组同1.2.2），浸泡5min。然后，用蒸馏水彻底冲洗样本2 min，以防止牙本质表面连续脱矿质。在万能材料试验机上使用支撑跨度为6 mm的微型三点弯曲装置进行弯曲强度测试。依次将36个牙本质块放置在试验台，测试前在其表面涂一薄层凡士林，防止样本干燥，将万能材料试验机的十字头以0.5mm/min的速度加载直至断裂。使用公式3PL/2bd计算三点弯曲强度（以MPa为单位），其中P为断裂载荷（N）、L为支撑跨度长度（mm）、b 为梁宽（mm）d 为梁厚度(mm)（图3)12)对照A:5.25%NaC101.79 mm-1.98mmB:6%MCJ9.30mmC:17%EDTAD:5.25%NaCI0-17%EDTAE:6%MCJ-17%EDTA图3三点弯曲强度样本制备及测试示意图Fig.3Schematic diagram of three-point flexural strength sample preparation and test1.2.5压缩强度测试使用磨牙冠部牙本质进行抗压强度评估。选取18 颗第三磨牙，样本制备、分组及处理方法同1.2.4，使用万能材料试验机，将每个样本依次放置于测试装置的上下两个压盘之间，并将压缩强度测试的应变速率设置为5mm/min13,记录每个样本的最大载荷值，使用公式P=F/S,式中P为压缩强度,单位为MPa;F为最大载荷,单位为N;S为受力面积，单位为mm（图4）。1.3统计学处理所有数据均使用SPSS25.0软件进行统计处理。对显微硬度、弯曲强度、压缩强度及极限拉伸强度各组数据分别进行正态性检验和方差齐性检验。如果方差齐，则使用单因素方差分析进行多组数据比较,LSD方法用于多重比较，如果方差不齐，则使用韦尔奇检验，使用Games-Howell方法进行多重比较，P0.05具有统计学意义。:693:张岚，等.诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响对照A:5.25%NaC101.79 mm1.98mmB:6%MCJ9.30 mmC:17%EDTAD:5.25%NaCl0-17%EDTAE:6%MCJ-17%EDTA图4压缩强度样本制备及测试示意图Fig.4Schematic diagram of compression strength sample preparation and test2结果2.1牙本质显微硬度测试结果冠1/3区,B、E组的牙本质显微硬度与对照组相比差异无统计学意义,而B、E组的牙本质显微硬度明显大于A组、C组和D组（P0.05）；根中1/3区,B组牙本质显微硬度与对照组相比差异无统计学意义,而B组牙本质显微硬度明显大于A、C、D、E组（P0.05）；根尖1/3区,B、E组牙本质显微硬度与C、D 组和对照组相比没有显著性差异,但明显大于A组牙本质显微硬度（P0.05）（表1）。表1不同冲洗液处理后各组间显微硬度比较Tab.1Comparison of micro-hardness between groups after different rinse solution treatment组别根颈1/3/HVo.1根中1/3/HVo.1根尖1/3/HVo.1FP（对照组）蒸馏水66.85 3.08 acde71.954.38acde61.953.82ad(A组)NaCIO47.90 8.48 abd55.33 4.71abce51.65 9.66abce1.3260.295(B 组)MCJ61.384.85abed70.13 2.64abede59.733.87a12.3670.001(C 组)EDTA50.08 4.13 bce61.952.36abed58.716.93 ac9.5890.002(D 组)NaCIO-EDTA49.62 4.70 bde54.932.36 bede54.653.39d4.1070.038(E组)MCJ-EDTA56.83 1.10acd62.08 3.86abde59.231.53ae6.7460.008F14.21424.7782.792P0.0010.0010.035单因素ANOVA检验：不同的小写字母代表组间统计学显著差异2.2牙本质极限拉伸强度测试结果A、B、C、D、E组的极限拉伸强度明显低于对照组,B、D、E组的牙本质极限抗拉强度明显高于A、C组(P0.05)(表2)。表2不同冲洗液处理后各组间极限拉伸强度的比较Tab.2Comparison of ultimate tensile strength betweengroups after different rinse solution treatment组别极限拉伸强度/MPa（对照组）蒸馏水43.25 10.90abede(A 组)NaClO8.222.38abede(B 组)MCJ21.973.15abc(C 组)EDTA14.122.68abede(D组)NaCIO-EDTA20.00 1.13ad(E组)MCJ-EDTA24.582.01aceF35.022P0.001单向ANOVA检验；不同的小写字母代表组间统计学显著差异2.3牙本质三点弯曲强度测试结果A、B、C、D、E组的牙本质弯曲强度明显低于对照组（P0.05）。B组的牙本质弯曲强度明显高于A、C组,E组的牙本质弯曲强度明显高于D组(P0.05)(表3)。表3不同冲洗液处理后各组间三点弯曲强度的比较Tab.3Comparison of three-point flexural strength betweengroups after different rinse solutiontreatment组别弯曲强度/MPa（对照组）蒸馏水199.396.25abede(A组)NaClO96.8024.55ab(B组)MCJ138.6323.77abede(C组)EDTA99.43 11.71 bed(D 组)NaCIO-EDTA79.48 11.71 bede(E 组)MCJ-EDTA114.1611.20bdeF41.573P0.001单向ANOVA检验；不同的小写字母代表组间统计学显著差异2.4牙本质压缩强度测试结果A、D 组的牙本质压缩强度明显低于对照组（P0.05）,B、C、E组的牙本质压缩强度与对照组无显:6942023年8 月第43卷第8 期口腔医学著性差异。B、E组的牙本质压缩强度明显高于A、D组(P0.05)(表4)。表4不同冲洗液处理后各组间压缩强度的比较Tab.4Comparison of compressive strength betweengroups after different rinse solution treatment组别压缩强度/MPa(对照组）蒸馏水75.060.04ad(A组)NaClO65.77 7.73 abcde(B 组)MCJ74.002.56abd(C 组)EDTA74.760.67acd(D 组)NaCIO-EDTA58.328.68bede(E组)MCJ-EDTA75.030.04adeF12.279P0.001单向ANOVA检验；不同的小写字母代表组间统计学显著差异3 讨 论根管冲洗是根管治疗术的关键步骤，根管冲洗的效率高低与根管治疗成功与否密切相关。目前临床上常用的根管冲洗液的种类有很多，但尚无一类能满足理想的根管冲洗液的所有特性。因此，寻找具有安全性且不损害组织机械性能的冲洗液是非常有必要的。诺丽，又名海巴戟（Morindacitrifolia），是茜草科巴戟天属的传统药用植物。它具有良好的生物相容性、抗氧化性和抗菌性 14。Divia等 15 用离体前磨牙模型证实,MCJ对于粪肠球菌的抑制作用虽低于5%NaClO，但仍有一定的抑制效果。Chandwani等 16 研究表明MCJ对于感染根管内细菌微生物的抑制效果与NaClO间没有明显的统计学差异。因此,本文在课题组前期对诺丽抗菌性、生物安全性及联合EDTA去除站污层的基础上，进一步探索诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响。牙本质具有良好的机械性能才能在咀嚼过程中行使正常功能，但是根管治疗后的牙齿更加脆弱、更容易折裂。Carter等 17 认为牙体硬组织结构的破坏和牙本质小管的脱水是使根管治疗过的无髓牙脆性增大的主要原因。NaClO作为根管冲洗液会导致管壁牙本质的有机结构形态紊乱、结构丧失 18 NaClO对牙本质有机成分的破坏影响了牙本质的机械性能且有明显的浓度依赖效应 19牙本质的显微硬度、极限拉伸强度、三点弯曲强度和压缩强度是评估冲洗液对剩余健康牙体硬组织作用的常用参数 2 0 显微硬度被用作衡量牙体组织整体强度或抗断裂能力的指标，其变化揭示了牙本质有机和无机成分的变化 2 1。本实验中使用的维氏硬度测试不易受到表面条件的影响。由于金刚石形压痕在测试过程中很容易观察到,并且在使用相同的载荷时对测量误差更敏感,从而使显微硬度测量更准确 2 2 。因此,本实验显微硬度测试同Cruz-Filho等 5 所述，在平行于根管内壁边缘的直线上进行压痕。实验结果如表1所示，在根颈1/3、根中1/3和根尖1/3区，与对照组相比,A组和C组的牙本质显微硬度显著降低（P0.05），而B组对牙本质的显微硬度没有显著变化,这与Prabhakar等 2 3 得出的MCJ不会对牙本质显微硬度产生显著不利影响的结果是一致的。研究表明17%EDTA会显著降低牙本质的显微硬度，进而表现出促进牙本质内壁持续脱矿的潜力 2 4O这种潜力是由于EDTA具有通过螯合机制与牙本质钙化成分结合的能力，导致组织脱矿和软化 2 4。因此本研究中牙本质块在17%EDTA浸泡5min后，使用蒸馏水冲洗以阻止实验样本持续脱矿。在根颈1/3区和根中1/3区，E组牙本质显微硬度明显高于D组的牙本质显微硬度（P0.05）；而根尖1/3区,E组与D组相比没有显著性差异。这表明6%MCJ和17%EDTA联合冲洗对牙本质显微硬度的不利影响远比5.2 5%NaC1O和17%EDTA联合冲洗要小，但是在根尖1/3区两者没有显著性差异，可能由于根尖区牙本质与冲洗液不能充分接触。同时，不能排除样本表面不平整的情况下进行显微硬度测试打出不规则菱形而产生不可避免的实验误差。研究表明，当17%EDTA持续存在于根管内10min或更长的时间时，根管治疗后牙本质的显微硬度明显降低，而由于在联合冲洗的过程中，17%EDTA留存于根管内的时间较短，几乎不会对牙本质的显微硬度产生影响 2 5，因此才会将17%EDTA与诺丽联合使用。在冠1/3区,E组牙本质显微硬度明显高于C组（P0.05），这同样也表明将诺丽与17%EDTA联合使用减轻了单独使用17%EDTA对牙本质显微硬度产生的不利影响。本实验使用万能试验机，采用机械测试法中的位移法，即通过位移传感器测量试件的尺寸应变变化，通过力传感器来测量力的大小，从而完成对试件的测量。对于极限拉伸测试以极限拉伸强度来表示。如表2 所示，极限拉伸强度是材料断裂的最大阻力。A、B、C、D、E组的极限拉伸强度与对照组差异有统计学意义（P0.05）,B、D、E组的牙本质极限抗拉强度明显高于A、C组（P0.05），与Barcellos等 2 4 得出2.5%NaC1O、17%ED T A 使牙本质的极限拉伸强度显著降低的结论一致,表明6%MCJ对牙本质极限拉伸强度产生的不利影响更小，且当17%:695.张岚，等.诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响EDTA分别与5.2 5%NaCIO和6%MCJ联合使用时，可显著降低单独使用17%EDTA作为冲洗液时对牙本质极限拉伸强度的不利影响。抗弯曲强度对于保持牙本质特性，避免牙本质脆性增加和降低牙齿纵折的风险起到了非常重要的作用。因此，应最大限度降低冲洗液对牙本质弯曲强度的不利影响。如表3所示,A、B、C、D、E组的牙本质三点弯曲强度明显低于对照组（P0.05）,B组的牙本质三点弯曲强度明显高于A、C组,E组的牙本质三点弯曲强度明显高于D组（P0.05），与Cec-chin等 2 6 得出6%NaCIO的使用显著降低了牙本质的机械性能（弯曲强度、极限拉伸强度）的研究结果一致。本研究表明实验组无论何种冲洗液都会对牙本质的三点弯曲强度产生不利影响，但6%MCJ和17%EDTA联合应用对牙本质弯曲强度的不利影响远小于5.2 5%NaCIO和17%EDTA联合应用，而5.2 5%NaC1O之所以可以显著降低牙本质弯曲强度，是因为NaCIO对可以通过破坏碳原子之间的键和氧化蛋白质的主框架导致牙本质胶原蛋白的分解 2 7 。因此,NaCIO对牙本质有机基质的不良影响，导致应力集中增加，从而降低了牙齿的断裂强度 2 8 压缩测试以压缩强度来表示，压缩强度指牙本质在外力作用下未达到断裂时能承受的最大应力。如表4所示，A、D 组的牙本质压缩强度明显低于对照组,B、C、E组的牙本质压缩强度与对照组无显著性差异(P0.05）。B、E组的牙本质压缩强度明显高于A、D 组（P0.05）。这表明6%MCJ对牙本质压缩强度产生不利影响更小，且6%MCJ和17%EDTA联合应用对牙本质压缩强度的不利影响远小于5.2 5%NaC1O和17%EDTA联合应用。根据药物作用机制，EDTA、Na CIO 均可以通过引起牙本质脱矿而显著改变牙本质化学组成 2 9。牙本质化学组成的改变可以影响牙本质性能,进一步影响牙齿的力学性能 30 综上所述，诺丽对牙本质机械性能的不利影响显著小于NaCIO，但由于不能完全去除站污层，需要与EDTA联合使用。课题组前期研究证实诺丽具有良好的抗菌性和生物安全性等优点，因此有望作为根管冲洗液应用于根管治疗。然而，诺丽应用于临床仍需相关体内试验进行进一步的探索。参考文献1Peters OA,Schonenberger K,Laib A.Effects of four Ni-Ti prepara-tion techniques on root canal geometry assessed by micro computedtomographyJ.Int Endod J,2001,34(3):221-230.2Slutzky-Goldberg I,Maree M,Liberman R,et al.Effect of sodiumhypochlorite on dentin microhardness JJ.J Endod,2004,30(12):880-882.3Sim TP,Knowles JC,Ng YL,et al.Effect of sodium hypochloriteon mechanical properties of dentine and tooth surface strain J.Int Endod J,2001,34(2):120-132.4Bello YD,Porsch HF,Farina AP,et al.Glycolic acid as the finalirrigant in endodontics:Mechanical and cytotoxic effects J.Mater Sci Eng C Mater Biol 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