苜蓿叶粉替代豆粕对母猪血清抗氧化水平、免疫功能及繁殖性能的影响.pdf

第 57 卷第 4 期河 南 农 业 大 学 学 报Vol.57No.42023 年8 月Journal of Henan Agricultural UniversityAug.2023收稿日期:2022-12-07基金项目:国家现代农业产业技术体系项目(CARS-34);河南省优质饲草与动物健康科技创新团队项目(22IRTSTHN022);郑州市科技惠民计划项目(2021KJHM0036)作者简介:杨旭(1998),男,河南洛阳人,硕士研究生,主要从事动物营养与饲料科学研究。通信作者:史莹华(1976),女,河南驻马店人,教授,博士;王志昌(1987),男,山东青州人,讲师,博士。引用:杨旭,马季祥,皇甫卫康,等.苜蓿叶粉替代豆粕对母猪血清抗氧化水平、免疫功能及繁殖性能的影响J.河南农业大学学报,2023,57(4):615-622.DOI:10.16445/ki.1000-2340.20230414.001苜蓿叶粉替代豆粕对母猪血清抗氧化水平、免疫功能及繁殖性能的影响杨旭1,马季祥1,皇甫卫康1,卢家顶1,牛家宽1,张喜喜1,栗守仁1,曹仕僖1,王志昌1,2,3,史莹华1,2,3(1.河南农业大学动物科技学院,河南 郑州 450046;2.河南省草地资源创新与利用重点实验室,河南 郑州 450046;3.河南省草业工程技术研究中心,河南 郑州 450046)摘要:【目的】探究苜蓿叶粉替代豆粕成为新型蛋白质饲料原料的潜力,减少蛋白质资源不足对中国养猪业发展的限制。【方法】选取 30 头妊娠 63 d 的初产母猪,按照各个试验组体况良好、背膘厚度基本一致的原则随机分为对照组(control group,CTRL)和苜蓿叶粉组(alfalfa leaf meal,ALM),每组 15 个重复,每个重复 1 头母猪,饲喂至母猪转入产房舍,预试期 7 d。而后采集母猪妊娠 85、105 d 血清样品,分娩时记录产仔数据。【结果】1)与对照组相比,苜蓿叶粉显著降低了妊娠 85 d 母猪血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,显著提高了谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)酶活,妊娠 105 d 时苜蓿叶粉组母猪血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、GSH-Px 酶活极显著提高,血清活性氧(reactive oxygen species,ROS)浓度极显著降低。2)与对照组相比,妊娠 105 d 母猪血清中辅助性 T 细胞(helper T cell,CD4+)/细胞毒性 T 细胞(cytotoxic T lymphocyte,CD8+)值显著提高,妊娠 85、105 d 苜蓿叶粉组母猪血清 CD8+质量浓度极显著降低。3)苜蓿叶粉组母猪繁殖性能得到改善,初生窝质量及初生窝均质量显著提高。4)相关性分析结果表明,血清 SOD 酶活同繁殖性能的改善具有显著正相关关系,血清 ROS 浓度同繁殖性能具有显著负相关关系。【结论】苜蓿叶粉能够提高妊娠后期母猪血清抗氧化水平、免疫功能,改善母猪繁殖性能,苜蓿叶粉替代妊娠母猪饲粮豆粕具有可行性,在母猪生产中能够发展成为新型饲粮蛋白源。关键词:苜蓿叶粉;妊娠母猪;抗氧化水平;免疫功能;繁殖性能中图分类号:S828;S816文献标志码:A文章编号:1000-2340(2023)04-0615-08Effects of replacing soybean meal with alfalfa leaf meal on serum antioxidant level,immune function and reproductive performance of sowsYANG Xu1,MA Jixiang1,HUANGFU Weikang1,LU Jiading1,NIU Jiakuan1,ZHANG Xixi1,LI Shouren1,CAO Shixi1,WANG Zhichang1,2,3,SHI Yinghua1,2,3(1.College of Animal Science and Technology,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450046,China;2.Key Laboratory of Innovation and Utilization of Grassland Resources of Henan,Zhengzhou 450046,China;3.Forage Engineering Technology Research Center of Henan,Zhengzhou 450046,China)Abstract:【Objective】In order to explore the feasible potential of alfalfa leaf meal as a new protein 616 河南农业大学学报第 57 卷feed raw material instead of soybean meal and reduce the limitation of insufficient protein resources on the development of pig industry in China.【Method】30 primiparous sows on 63 d day of gestation were selected and randomly divided into control group(CTRL)and alfalfa leaf meal group(ALM),15 replicates per group,one sow per replicate,according to the principle of similar body appearance.All sows had free access to diet and water during the entire experimental period.The pre-test period was 7 days.The serum samples were collected from sows on 85 and 105 d of gestation,and the farrowing performance of the sows was recorded during farrowing.【Result】1)Compared with CTRL,ALM sig-nificantly decreased the concentration of serum MDA but significantly increased the enzyme activities of serum GSH-Px and in sows at 85 d of gestation;ALM significantly increased the enzyme activities of serum SOD and GSH-Px and significantly decreased the concentration of serum ROS in sows at 105 d of gestation.2)Compared with CTRL,CD4+/CD8+value of serum in sows on 105 d of gestation was significantly increased,while the mass concentration of serum CD8+of sows in ALM on 85 d and 105 d of gestation was extremely significantly decreased.【Conclusion】In summary,ALM could improve the serum antioxidant level,immune function and reproductive performance of sows in late pregnancy.It was proved that ALM was feasible to replace soybean meal in pregnant sows,and can be developed as a new dietary protein source for pregnant sows.Key words:alfalfa leaf meal;pregnant sow;antioxidant level;immune function;reproductive per-formance在中国畜牧业生产中,饲粮蛋白质原料多以豆粕为主。近年来,由于豆粕价格上涨,“人畜争粮”的矛盾日益凸显,蛋白质资源短缺严重阻碍了中国养猪业的发展1。为此,2022 年中国出台了玉米-豆粕减量替代的相关政策。在当前母猪养殖规模扩大、蛋白资源日益紧张的形势下,寻找适合的蛋白原料具有重要的战略意义。目前,使用本土杂粕如菜籽粕2、棕榈核仁粕等3替代豆粕方面的研究取得了一定成果,但本土杂粕在应用中仍具有诸多限制4,尚未在畜牧业生产中大规模推广。紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是一种优质牧草,在反刍动物中应用较多,同时作为膳食纤维添加在母猪日粮中亦具有较多益处5。在妊娠日粮中添加苜蓿草粉能够提高母猪繁殖性能,改善仔猪初生个体质量6。苜蓿草粉可以防止哺乳母猪异常行为的发生,提高母猪初乳和常乳中的脂肪含量,有利于初生仔猪的存活和生长7。苜蓿中粗蛋白含量高,氨基酸组成较平衡,苜蓿叶中蛋白含量是茎的 2 倍8,而苜蓿茎叶分离可以得到粗蛋白含量更高的苜蓿叶粉,具有替代豆粕进一步发展成为新型蛋白质原料的潜力。目前,以苜蓿叶粉替代豆粕在母猪饲粮中的可行性研究尚有待加强。因此,本试验探讨了苜蓿叶粉替代饲粮豆粕对母猪妊娠后期血清抗氧化能力、免疫功能及繁殖性能的影响,为苜蓿叶粉作为新型蛋白源及进一步应用提供依据。1材料与方法1.1试验材料和试验设计苜蓿叶粉加工自河南农业大学原阳试验基地,营养成分见表 1。本试验在河南省周口市鑫欣牧业有限公司某一猪场进行,选取 30 头健康状况和体质量相近的妊娠 63 d 初产母猪,分别为对照组(control group,CTRL)和苜蓿 叶粉组(alfalfa leaf meal,ALM),每组 15 个重复,每个重复为 1 头母猪。CTRL 组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,ALM 组使用苜蓿叶粉替换基础饲粮中豆粕。预饲期 7 d,饲喂至母猪转入产房舍,根据美国科学研究委员会(National Research Council,NRC)(2012)9母猪营养需求 配制妊娠后期 饲粮,其成 分及营养水 平见表 2。1.2饲养管理试验母猪按照猪场的免疫程序进行常规免疫。母猪妊 娠期饲喂方式 为单栏限饲,分别于当 天7:30 和 14:00 进行饲喂。试验过程中,母猪自由采食和饮水,猪舍管理方式按照猪场程序正常进行。每天观察试验母猪的食欲、饮水和粪便形态等情况。第 4 期杨旭,等:苜蓿叶粉替代豆粕对母猪血清抗氧化水平、免疫功能及繁殖性能的影响617 表 1苜蓿叶粉及豆粕常规营养成分(风干基础)Table 1Nutrient composition of alfalfa leaf meal and soybean meal(air-dried basis)%项目 Items苜蓿叶粉Alfalfa leaf meal豆粕Soybean meal干物质 Dry matter93.2089.00粗蛋白 Crude protein25.5644.20粗脂肪 Ether extract2.141.90粗纤维 Crude fiber12.753.50中性洗涤纤维Neutral detergent fiber28.2513.60酸性洗涤纤维Acid detergent fiber17.569.60粗灰分 Crude ash15.026.10钙 Calcium1.220.33磷 Phosphorus0.290.62表 2妊娠后期母猪饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 2Dietary composition and nutrient level of sows in late pregnancy(air-dried basis)%项目 Items对照组CTRL苜蓿叶粉组ALM原料 Ingredients玉米 Corn55.35 28.24 豆粕 Soybean meal7.39 0.00 苜蓿叶粉 Alfalfa leaf meal0.00 13.73 次粉 Wheat middling8.07 26.94 小麦麸 Wheat bran24.07 21.82 大豆油 Soybean oil0.86 5.46 石粉 Limestone1.67 1.29 碳酸氢钙 Ca(HCO3)21.05 0.96 食盐 NaCl0.35 0.35 赖氨酸 Lysine0.13 0.12 蛋氨酸 Methionine0.01 0.03 苏氨酸 Threonine0.05 0.05 预混料 Premix1.00 1.00 合计 Total100.00100.00营养水平 Nutrient levels消化能/(MJkg-1)Digestible energy12.61 12.61 粗蛋白质 Crude protein13.0013.00 粗纤维 Crude fiber3.815.14钙 Calcium0.92 0.92 磷 Phosphorus0.63 0.63 赖氨酸 Lysine0.65 0.65 蛋氨酸 Methionine0.20 0.20 苏氨酸 Threonine0.50 0.50 注:预混料为每 kg 全价料中包含的微量成分,包括铜 18 mg,铁 150 mg,锌 80 mg,锰 40 mg,硒 0.4 mg,碘 0.3 mg,维生素 E 20 mg,维生素 A 9 250 U,维生素 D3 2 500 U,维生素 K3 2.5 mg,维生素 B1 2.5 mg,维生素 B2 6 mg,维生素 B6 3 mg,维生素 B12 0.08 mg,生物素 0.02 mg,泛酸 12.0 mg,叶酸 1.2 mg 和烟酸 2.5 mg。Note:Per kilogram feedstuff contains microelements in premix inclu-ding Cu 18 mg,Fe 150 mg,Zn 80 mg,Mn 40 mg,Se 0.4 mg,I 0.3 mg,vitamin E 20 mg,vitamin A 9 250 U,vitamin D3 2 500 U,vitamin K3 2.5 mg,vitamin B1 2.5 mg,vitamin B2 6 mg,vitamin B6 3 mg,vitamin B12 0.08 mg,biotin 0.02 mg,pantothenic acid 12.0 mg,folic acid 1.2 mg and niacin 2.5 mg.1.3样品采集及方法 分别于妊娠 85、105 d 清晨每组选取 6 头母猪,空腹从耳缘静脉采血 10 mL 至促凝管中,静置1 h 后在 3 500 rmin-1、4 离心 15 min(Heraeus Multifuge X1R 台 式 冷 冻 离 心 机,赛 默 飞 世 尔 公司),分离血清至-20 保存。本研究的所有试验程序均符合河南农业大学实验动物福利与动物伦理相关规定。1.4指标测定 1.4.1血清抗氧化指标的测定使用试剂盒(南京建成生物工程研究所),按照说明书检测步骤,测定母猪血清中活性氧(reactive oxygen species,ROS)浓度、丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)酶活、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)酶活和总抗氧化能力(total antioxidant capaci-ty,T-AOC)。1.4.2血清免疫指标的测定使用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(上海酶联生物科技有限公司),按照说明书检测步骤,检测血清免疫球蛋白 A(immune globulin A,IgA)、免疫球蛋白 G(immune globulin G,IgG)、免疫球蛋白 M(immune globulin M,IgM)、辅助性 T 细胞(helper T cell,CD4+)、细胞毒性 T 细胞(cytotoxic T lymphocyte,CD8+)质量浓度,CD4+质量浓度与 CD8+质量浓度的比值即为CD4+/CD8+值。1.4.3产仔性能的测定按照刁新迎等10的方法对母猪产仔性能进行测定,于母猪分娩时记录窝总产仔数、窝产活仔数、仔猪初生个体质量和仔猪初生窝质量。1.5数据统计与分析使用 SPSS 25.0 统计软件对试验数据进行 t 检验,结果以平均数标准差表示,p0.05 差异显著,p0.01 差异极显著;选取ALM 组和 CTRL 组母猪妊娠 105 d 机体抗氧化及免疫指标同仔猪初生个体质量、仔猪初生窝质量 2个产仔性能指标,使用 SPSS 25.0 统计软件对试验数据进行 spearman 相关性分析,探究母猪机体代谢状况的变化同妊娠结局改变的联系。2结果与分析2.1苜蓿叶粉对妊娠后期母猪血清抗氧化水平的影响由表 3 可知,妊娠 85 d 时 ALM 组母猪血清GSH-Px 酶活显著高于 CTRL 组(p0.05),MDA 浓度显著低于 CTRL 组(p0.05);妊娠 105 d 时,ALM 组母猪血清SOD、GSH-Px 酶活极显著高于 CTRL 组(p0.01),ROS 浓度极显著低于 CTRL 组(p0.05)。以上结果表明苜蓿叶粉提高了母猪血清抗氧化水平。表 3苜蓿叶粉对母猪妊娠后期血清抗氧化水平的影响 Table 3Effects of alfalfa leaf meal on serum antioxidant level in sows during late pregnancy项目 Items对照组CTRL苜蓿叶粉组ALMp 值p value妊娠 85 d On 85 d of gestation 活性氧/(molL-1)ROS128.606.04 aA128.207.67 aA0.936总抗氧化能力/(UmL-1)T-AOC0.810.02 aA0.830.02 aA0.395超氧化物歧化酶(UmL-1)SOD 61.562.41 aA63.984.15 aA0.292谷胱甘肽过氧化物酶/(UmL-1)GSH-Px2 685.4822.22 bA2 711.5145.10 aA0.040丙二醛/(molL-1)MDA3.340.24 aA2.620.26 bA0.030妊娠 105 d On 105 d of gestation活性氧/(molL-1)ROS93.723.35 aA61.126.29 bB0.001总抗氧化/(UmL-1)T-AOC0.680.14 aA0.660.08 aA0.756超氧化物歧化酶/(UmL-1)SOD63.702.82 bB103.433.42 aA0.001谷胱甘肽过氧化物酶/(UmL-1)GSH-Px2 478.3760.91 bB2 915.9228.84 aA0.001丙二醛/(molL-1)MDA4.590.96 aA3.260.28 aA0.072注:不同小写字母表示差异显著(p0.05),不同大写字母表示差异极显著(p0.01)。下同。Note:Values with different lowercase letters mean significant difference(p 0.05),and with different capital letters mean highly significant difference(p0.01).The same as below.2.2 苜蓿叶粉对妊娠后期母 猪血清免疫 指标的影响由表 4 可知,苜蓿叶粉极显著降低了妊娠 85 d母猪血清 CD8+质量浓度(p0.05);妊娠 105 d 时,ALM 组母猪血清 CD8+质 量 浓 度 极 显 著 低 于 CTRL 组(p 0.01),CD4+/CD8+值显著高于 CTRL 组母猪(p0.05)。结果表明,苜蓿叶粉改善了妊娠母猪的补体系统水平。表 4苜蓿叶粉对母猪妊娠后期血清免疫指标的影响 Table 4Effects of alfalfa leaf meal on serum immune indexes of sows in late pregnancy 项目 Items对照组CTRL苜蓿叶粉组ALMp 值p value妊娠 85 d On 85 d of gestation免疫球蛋白 A/(mgL-1)IgA165.183.25 aA166.949.50 aA0.680免疫球蛋白 G/(mgL-1)IgG5.630.26 aA5.420.35 aA0.287免疫球蛋白 M/(mgL-1)IgM4.030.18 aA3.910.26 aA0.390辅助性 T 细胞/(gL-1)CD4+15.710.30 aA15.330.31 aA0.124细胞毒性 T 细胞/(gL-1)CD8+4.670.11 aA4.410.07 bB0.007CD4+/CD8+3.360.14 aA3.470.09 aA0.232妊娠 105 d On 105 d of gestation免疫球蛋白 A/(mgL-1)IgA175.227.75 aA176.854.73 aA0.677免疫球蛋白 G/(mgL-1)IgG5.760.23 aA5.610.08 aA0.188免疫球蛋白 M/(mgL-1)IgM4.150.02 aA3.960.36 aA0.241辅助性 T 细胞/(gL-1)CD4+15.890.12 aA15.050.68 aA0.052细胞毒性 T 细胞/(gL-1)CD8+5.300.03 aA4.310.20 bB0.001CD4+/CD8+3.000.02 bA3.500.31 aA0.0182.3苜蓿叶粉对母猪繁殖性能的影响由表 5 可知,苜蓿叶粉显著提高了妊娠母猪的初生窝质量和初生个体质量(p0.05)。这表明苜蓿叶粉能够改善母猪的繁殖性能,提高了初生窝质量和初生窝均质量,有利于仔猪的存活及后续的生长发育。第 4 期杨旭,等:苜蓿叶粉替代豆粕对母猪血清抗氧化水平、免疫功能及繁殖性能的影响619 表 5苜蓿叶粉对母猪繁殖性能的影响 Table 5Effects of alfalfa leaf meal on reproductive performance in pregnant sows 项目Items对照组CTRL苜蓿叶粉组ALMp 值p value窝总产仔数/头 Total litter size11.751.16 aA12.200.84 aA0.471窝产活仔数/头 Live litters10.751.75 aA11.602.15 aA0.406窝产健仔数/头 Healthy litters10.132.03 aA10.601.66 aA0.671初生窝质量/kg Birth weight12.252.03 bA15.552.79 aA0.031初生个体质量/kg Average weight of newborns1.100.13 bA1.290.14 aA0.038健仔率/%Fitness rate0.860.14 aA0.870.10 aA0.4822.4母猪繁殖性能与机体抗氧化能力、免疫功能相关性分析由表 6 可知,相关性分析结果表明,血清 ROS浓度 同 初 生 个 体 质 量 呈 显 著 负 相 关 关 系(p 0.05),同初生窝质量呈极显著负相关关系(p 0.01),SOD 酶活同初生个体质量呈极显著正相关关系(p0.01),同初生窝质量呈显著正相关关系(p0.05);血清 CD8+质量浓度同 ROS 浓度呈显著正相关关系(p0.05),同 SOD 酶活呈显著负相关关系(p0.05),同 GSH-Px 酶活呈极显著负相关关系(p0.01),而 CD4+/CD8+值同 ROS 浓度呈显著负相关关系(p0.05),与血清 GSH-Px 酶活呈极显著正相关关系(p0.01)。表 6母猪繁殖性能与血清抗氧化水平及免疫功能的相关性分析Table 6Correlation analysis of reproductive performance of sows with serum antioxidant level and immune function斯皮尔曼Sperman初生个体质量Average weight of newborn初生窝质量Birth litter weight活性氧ROS超氧化物歧化酶SOD丙二醛 MDA谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px细胞毒性 T细胞 CD8+CD4+/CD8+初生个体质量Average weight of newborn10.808-0.8210.818-0.5640.368-0.6870.476初生窝质量 Birth litter weight0.808 1-0.929 0.661-0.4360.502-0.6150.595活性氧 ROS-0.821-0.929 1-0.7140.618-0.8210.764-0.821超氧化物歧化酶SOD0.818 0.661-0.7141-0.7640.584-0.8310.619丙二醛MDA-0.564-0.4360.618-0.7641-0.5640.620-0.509谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px0.3680.502-0.8210.584-0.5641-0.903 0.886 细胞毒性 T 细胞CD8+-0.687-0.6150.764-0.8310.620-0.903 1-0.843 CD4+/CD8+0.4760.595-0.8210.619-0.5090.886-0.843 1注:表示 p0.05,相关性显著;表示 p0.01,相关性极显著。Note:“”indicates significant correlation at p0.05;while“”indicates highly significant correlation at p0.01.3结论与讨论 本研究使用由紫花苜蓿茎叶分离得来的苜蓿叶粉替代妊娠后期母猪饲粮豆粕,结果表明,苜蓿叶粉作为新型蛋白源代妊娠后期母猪饲粮豆粕可以提高妊娠 85 d 母猪血清 GSH-Px 酶活,降低 ROS浓度,提高了妊娠 105 d 母猪血清 GSH-Px、SOD 酶活,降低了 MDA 浓度,进而增强了妊娠母猪机体的抗氧化能力,改善了母猪免疫性能和繁殖性能,提高了初生窝质量和初生个体质量。妊娠过程对母体是一种挑战,尤其是在妊娠后期,胚胎的快速生长增加了母体代谢负担,易引发全身氧化应激、免疫失调、代谢紊乱和组织细胞损伤11。母体氧化应激与多种不良结果有关,如妊娠糖尿病、胎儿死亡和低初生体质量等12。机体ROS 浓度升高及氧化应激状态与仔猪低初生体质量有关,影响母猪繁殖性能和仔猪生长性能13,机体氧化应激状态还与胎儿宫内发育迟缓相关14。MDA 是机体膜脂过氧化的产物,其浓度可以反映脂质过氧化的程度,间接反映自由基对机体的损伤程度15。GSH-Px、SOD 是机体抗氧化酶系统的重要组成部分,对氧自由基等具有清除作用。本研究620 河南农业大学学报第 57 卷结果表明,苜蓿叶粉作为新型蛋白源替代妊娠后期母猪饲粮豆粕后,提高了妊娠后期母猪血清抗氧化酶活性,降低了血清中过氧化物等的水平,与 LIU等16关于苜蓿草的应用报道具有相似性。苜蓿叶蛋白与豆粕蛋白相比具有诸多有益作用。苜蓿叶蛋白水解得到的苜蓿叶多肽在体外具有抗氧化功能,对超氧自由基、羟基自由基和 DPPH 自由基具有较强的清除能力,苜蓿叶多肽清除自由基活性是谷胱甘肽过氧化物的 3 5 倍17,而苜蓿浓缩蛋白能够提高畜禽血浆中的抗氧化潜能,提高 SOD 活性、降低 MDA 浓度18。同时本研究中所用苜蓿叶粉含有纤维,使 ALM 组母猪饲粮中粗纤维含量升高,而诸多研究已证明纤维尤其是苜蓿的纤维成分具有调节母猪机体代谢的作用19-20。因此,本次试验结果中母猪血清抗氧化水平的改善亦有可能是苜蓿叶蛋白和苜蓿纤维的共同作用,但是苜蓿叶粉对于母猪机体抗氧化能力的作用机制还有待进一步探究。本研究中,随着母猪饲喂苜蓿叶粉饲料时间的增加,妊娠母猪机体抗氧化系统得到的改善效果愈加显著,表明苜蓿叶粉饲粮对于母猪机体抗氧化系统的改善效果具有随着饲喂时间增加的累加效应,而这种改善机体抗氧化系统的累加效应还有待进一步验证和探究。相关性分析表示,抗氧化酶 SOD、GSH-Px 酶活同母猪繁殖性能呈正相关关系,而 ROS 浓度与母猪繁殖性能负相关。这表明机体抗氧化能力同母猪繁殖性能的强相关性,对于在商业化养殖过程中改进妊娠母猪饲养策略、加强妊娠母猪养殖过程中的母猪代谢状况监测及降低养殖过程中母猪氧化应激的发生,从而提高母猪繁殖性能具有重要意义。本次试验结果表明,苜蓿叶粉替代豆粕能够通过降低妊娠母猪机体氧化应激水平,改善母猪机体健康状况。在妊娠期间,胚胎的成功着床、胎盘发育和胎儿的生长,以及母体和胎儿健康的维持,都需要免疫反应的平衡21;妊娠期间母体免疫系统得到加强,能够识别、交流、转运和修复机体免疫网络,在必要时能够发出警报,维持母体和胎儿的健康22。免疫球蛋白是免疫系统的重要组成部分,在机体抵御病原体,对抗疾病方面具有重要的作用,主要包括 IgA、IgG、IgM 等,而妊娠阶段母体 IgG 能够通过胎盘进入胚胎中,是胎儿的先天性免疫的重要组成部分23。CD4+细胞能够通过提供关键的抗病毒细胞因子或通过直接的细胞毒性在抗病毒免疫中发挥直接作用24。CD8+细胞是先天性和适应性免疫防御机制中的重要角色,保护人们免受外在的病原体、病毒和细菌等,以及内在的恶性细胞等的威胁25。CD4+/CD8+值的变化直接反映了免疫系统的状态26。本研究中 ALM 组母猪血清 CD8+质量浓度较 CTRL 组降低,CD4+/CD8+值较 CTRL 组提高,而苜蓿叶粉不影响血清免疫球蛋白质量浓度。与豆粕相比,苜蓿具有调节动物免疫的作用,苜蓿草粉能够提高仔猪及育肥猪血清中免疫球蛋白的水平27-28,同时苜蓿多糖类生物活性物质具有激活猪淋巴细胞活性的作用29。而苜蓿叶粉中诸多生物活性物质的具体含量还有待进一步测定。本研究中,母猪机体的补体系统随着苜蓿叶粉饲喂时间的延长,得到愈加显著的改善效果,表明了苜蓿叶粉对于母猪补体系统的改善同样具有随作用时间增加的累加效应,但是这种累加效应还需要进一步验 证 和 分 析。相 关 性 分 析 结 果 表 明,血 清CD8+质量浓度同 ROS 浓度呈负相关关系,同抗氧化酶 SOD、GSH-Px 酶活呈正相关关系。在动物体内,氧自由基含量的下降及抗氧化能力的提升能够减少细胞的氧化损伤,降低感染疾病的风险,增强动物免疫力30。本研究证明了相较于使用豆粕作为蛋白源,苜蓿叶粉作为饲粮蛋白源能够改善妊娠母猪机体抗氧化能力同时提高机体免疫力,为胎儿的生长提供有利的条件。妊娠中后期母猪机体会发生代谢紊乱等症状,而母体的代谢变化会对胚胎的生长发育造成影响,可能导致流产等不良状况的发生22。妊娠中后期改善母猪营养状况,能够改善胚胎的均匀性,减少胚 胎 发 育 的 变 化 和 妊 娠 后 期 胚 胎 体 质 量 的 变化31。本研究结果表明,苜蓿叶粉提高了仔猪初生个体质量及初生窝均质量,有利于初生仔猪的存活及生长,证明了苜蓿叶粉对母猪繁殖性能具有改善作用。苜蓿对于母猪生产具有积极影响,饲粮中添加苜蓿草粉能够提高仔猪初生个体质量和仔猪初生窝质量,改善母猪繁殖性能32,而苜蓿中含有的 B 族维生素、维生素 E 以及-胡萝卜素对于繁殖性能具有重要的作用33。相关研究发现,使用本土杂粕代替豆粕对母猪繁殖性能无改善作用。GRELA 等34研究发现,使用发酵菜籽粕替代豆粕可以提高初乳中免疫球蛋白含量,增加哺乳期活仔数和哺乳期窝质量,但对于产仔数、仔猪初生个体质量、初生窝质量等繁殖性能方面并没有改善效果。SWIATKIEWICZ 等35使用蚕豆饲喂妊娠母猪发现对繁殖性能无影响。本研究分别使用豆粕和苜蓿叶粉作为妊娠母猪饲粮蛋白源,通过对各时期母猪妊娠期机体抗氧化能力、机体免疫水平和最终第 4 期杨旭,等:苜蓿叶粉替代豆粕对母猪血清抗氧化水平、免疫功能及繁殖性能的影响621 妊娠结局的分析,证明了苜蓿叶粉作为新型蛋白源替代妊娠母猪饲粮中豆粕的可行性,在一定程度上可以缓解中国蛋白质资源紧缺问题,为苜蓿叶粉作为新型蛋白源在畜牧养殖中的应用提供参考。参考文献 References:1岳玉胜,张海龙,沈斌,等.低蛋白日粮在养猪生产中的应用进展J.猪业科学,2020,37(12):78-80.YUE Y S,ZHANG H L,SHEN B,et al.Application of low protein feed in pig production J.Swine Industry Science,2020,37(12):78-80.2LIU Y H,OLIVEIRA M S F,STEIN H H.Canola meal produced from high-protein or conventional varieties of canola seeds may substitute soybean meal in diets for gestating and lactating sows without compromising sow or litter productivityJ.Journal of Animal Science,2018,96(12):5179-5187.3夏冬华.棕榈核仁粕和椰子粕替代豆粕在肥育猪中的应用可行性分析J.中国动物保健,2021,23(3):99-100.XIA D H.Feasibility analysis on the application of palm kernel meal and coconut meal instead of soybean meal in finishing pigsJ.China Animal 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