人多巴胺受体D5DRD5酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx

人多巴胺受体D5(DRD5)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T
8ng/L - 240ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中多巴胺受体D5(DRD5)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人多巴胺受体D5(DRD5)水平。用纯化的人多巴 胺受体D5(DRD5)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入多巴胺受 体D5(DRD5),再与HRP标记的多巴胺受体D5(DRD5)抗体结合，形成抗体-抗原-酸标抗体 复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸 的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的多巴胺受体D5(DRD5)呈正相关。用酶 标仪在450nm波长下测定吸光度(0D值)，通过标准曲线计算样品中人多巴胺受体D5(DRD5) 浓度。
试剂盒组成标本要求
1
30倍浓缩洗涤液
20ml X 1 瓶
7
终止液
6ml X 1 瓶
2
酶标试剂
6ml X 1 瓶
8
标准品(480ng/L)
0.5ml XI 瓶
3
酶标包被板
12孔X8条
9
标准品稀释液
1.5ml XI 瓶
4
样品稀释液
6ml X1 瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml X 1 瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml X 1/瓶
12
密封袋
1个
1 .标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。假设不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应防止反复冻融.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1 .标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照以下图表在小试管中进行稀释。
240ng/L
5号标准品
150|11的原倍标准品加入150|J标准品稀释液
120ng/L
4号标准品
150111的5号标准品加入150|11标准品稀释液
60ng/L
3号标准品
150111的4号标准品加入150川标准品稀释液
30ng/L
2号标准品
150111的3号标准品加入150m标准品稀释液
15ng/L
1号标准品
150111的2号标准品加入150|11标准品稀释液

2 .加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50|11,待测样品孔中先加样品稀释液40M 然后再加待测样品10川（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3 .温育：用封板膜封板后置37c温育30分钟。
4 .配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸僧水30倍稀释后备用.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。
5 .加酶：每孔加入酶标试剂50M，空白孔除外。
6 .温育：操作同3。
7 .洗涤：操作同5。
8 .显色：每孔先加入显色剂A50|J,再力口入显色剂B50W，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15分钟.
9 .终止：每孔加终止液50可，终止反响（此时蓝色立转黄色）。
10 .测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
准备试剂，样品和标准品

计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的0D值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。
考前须知.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。
1 .浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
2 .各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以防止试验误差。一次加样时间最好 控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
3 .请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值 大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（XnX5）。
4 .封板膜只限一次性使用，以防止交叉污染。
5 .底物请避光保存。
6 .严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7 .所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8 .本试剂不同批号组分不得混用。
9 .如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期.试剂盒保存：2-8℃o
1 .有效期：6个月