流式细胞仪在不孕诊断中运用学习.ppt

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,精子,DNA,碎片率检测方法介绍,（,SDFA,）,及流式细胞仪在不孕诊断中运用,ICSI(intracytoplasmic sperm injection),卵母细胞单精子显微注射技术,2.IUI(intrauterine insemination),3.IVF,4.ART,主要内容,1.SDFA,（精子,DNA,碎片率检测）,进一步的精液检查,2.,免疫性不孕,/,流产病因学诊断,自然杀伤细胞的检测,3.,自然杀伤细胞检测相关试剂,SDFA,检测方法背景,-,自从生殖领域不孕诊疗的不断发展，精液检查一直是,我们所关注的，但其评价的标准的确定，还尚未达成一致,-,许多检测声称是更优越的，并能给临床医生提供更多信息,-,我们仍然需要有统一的评价标准,精子,DNA,碎片检测,:,1980,开始,当初声称能预测,IUI,IVF,及,ICSI,的成功率,之后，碎片率的检测一直未标准化,新的数据证明：,碎片率的检测能提供,IUI,还是,IVF/ICSI,助孕方式选择的参考意见,不孕患者初诊筛查流程,ART,初诊患者,IUI,患者,不孕,患者,精液常规分析,已做碎片分析,未做碎片分析,80-90%,第一次,IUI,败,70-80%,总是失败,无精子碎片率检查,进行精子碎片分析,IUI,失败后,放弃,ART,更高的,IUI,成功率,大部分人在失败,后不会尝试,ART,更多婴儿 出生,IUI,失败的病人,将行,IVF/ICSI,首次,ART,患者,什么是,SDFA,？,SDFA,通过评估精子的健康状况,，,帮助不孕患者,选择更适合的,助孕方式,SDFA,能评估精子的,DNA,损伤程度，,而此异常有可能引起,IUI,助孕的失败,DNA,碎片指数,-DFI,精子经酸处理及染色后,1.DNA,完整的细胞染色,-,绿色,2.DNA,受损的细胞染色,-,红色,DNA,碎片指数,-DFI,基于荧光强度的差异,可用流式细胞仪分析,检测,DNA,碎片指数,-DFI,计算受损,DNA,细胞所占的比值,即患者精液标本的,DNA,碎片率指数,-,DFI,SDFA,检测文献支持,-1,大样本多中心临床研究结果证实,SDFA,检测结果,DFI,指数：,1.,能指导辅助生殖助孕方式选择,2.,能预测辅助生殖助孕的成功率,SDFA,检测文献支持,-2,已发表的文献中,SDFA,检测结果,-,DFI,指数,在不同人群中的异常发生率,自然杀伤细胞（,NK,）的检测,1.,自然杀伤细胞是淋巴细胞的一种,其细胞表面表达,CD56+,等,2.,在不孕或反复自然流产患者，其外周血或子宫内膜上,NK,细胞活性增加,3.,使用抗体荧光染色技术，通过,流式细胞仪可检测,NK,细胞,NK,细胞检测相关抗体,编号,品名,克隆,亚型,规格,349041,Mouse IgG1-FITC,X40,Mouse IgG1,k,100ug,349043,Mouse IgG1-PE,X40,Mouse IgG1,k,100ug,347202,Mouse IgG1-PerCP-Cy5.5,X40,Mouse IgG1,k,50ug,340442,Mouse IgG1-APC,ii,ii,100ug,349044,Mouse IgG-PerCP,ii,ii,100ug,347747,CD56-PE,MY31,Mouse IgG1,k,100tests,347617,CD16-PE,B73.1,Mouse IgG1,k,100tests,349201/340542,CD3-FITC,SK7,Mouse IgG1,k,50/250tests,347463,CD45-FITC,2D1,Mouse IgG1,k,100tests,347493/347497/333945,CD14-FITC/CD14-PE/CD14-APC-Cy7,MOP9,Mouse IgG1,k,100tests,340436,CD14-APC,ii,ii,25ug,340585,CD14-PerCP,ii,ii,25ug,340911/340912/340913,BD Multi-Check Control,