DB3415∕T 53-2023 金寨桑黄菌种及菌段制作技术规程(六安市).pdf

ICS 67.080 CCS B 31 3415 六安市地方标准 DB 3415/T 532023 金寨桑黄菌种及菌段制作技术规程 2023-11-07 发布 2023-11-07 实施 六安市市场监督管理局 发 布 DB 3415/T 532023 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由金寨县中药（西山药库）产业发展中心提出。本文件由六安市农业农村局归口。本文件起草单位：金寨县中药（西山药库）产业发展中心、金寨尚臻生物科技有限公司、安徽省食用菌技术协会、六安市食品药品检验中心。本文件主要起草人：陆本坤、秦绍新、杜继甫、王泰金、张英武、朱汉麟、邓传奇、万和炎、徐紫娟、宋宇、陆洋、王琨、魏新宇、周礼玲、张新芹、王雷。DB 3415/T 532023 1 金寨桑黄菌种及菌段制作技术规程 1 范围 本文件规定了桑黄栽培过程中菌种及菌段制作的术语和定义、菌种制作及菌段制作技术、接种的要求。本文件适用于桑黄各级菌种及段木栽培菌段的制作。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 26373 醇类消毒剂卫生要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 金寨桑黄 Jinzhai phellinus igniarius 以金寨县内野生桑黄作为原种，经过人工多年连续选育的菌株，金寨县内生产的桑黄。4 菌种制作 菌株来源 4.1 应使用经专业机构鉴定的锈革孔菌科桑黄孔菌属瓦尼桑黄，Sanghuangporus vaninii(Ljub.)L.W.Zhou&Y.C.Dai。生产用水 4.2 应符合GB 5749的要求。乙醇消毒剂 4.3 应符合GB/T 26373的要求。菌种制备 4.4 4.4.1 工艺流程 制作工艺流程见图1。DB 3415/T 532023 2 图1 工艺流程图 4.4.2 培养基配方 母种培养基配方、原种培养基配方和栽培种培养基配方见规范性附录A。4.4.3 分装 母种用试管分装，原种、栽培种用瓶或袋分装。4.4.4 灭菌 母种高压灭菌30 min，原种、栽培种高压灭菌4 h。4.4.5 冷却 灭菌结束后，趁热将母种试管摆放在操作台面上，斜面长度为试管的2/3，将原种、栽培种取出置于净化冷却区域冷却至室温。4.4.6 接种操作 4.4.6.1 母种 挑选生长两年、长势优良、形状规则、边缘有淡黄色组织的桑黄子实体做为种菇，用体积分数75%的酒精浸泡5 min后放置在洁净的培养皿中，点火灼烧至酒精燃烧完毕，将解剖刀在酒精灯上灼烧消毒，然后在桑黄子实体表面划一圈，深度1 cm2 cm，沿刀口掰开子实体，将解剖刀在酒精灯上灼烧消毒，冷却后挑取桑黄淡黄色组织的中心部位，切成3 mm3 mm小块后用接种针取一块接种于斜面试管。4.4.6.2 原种 接种前一天将母种检查准备好，接种时再核对确保无误。严格按照无菌操作要求，将接种工具在酒精灯灼烧灭菌，冷却后挑取试管中菌块10 mm10 mm到菌袋（瓶）中，每支母种接原种6至8袋（瓶）。4.4.6.3 栽培种 接种前一天将原种检查准备好，接种时再核对确保无误。严格按照无菌操作要求，将接种工具在酒精灯灼烧灭菌，冷却后挑取5 g6 g块状原种到菌袋（瓶）中，每袋（瓶）原种接栽培种60至80袋（瓶）。4.4.7 培养 4.4.7.1 母种培养 将斜面试管置于28培养2周，至菌丝布满培养基，选取无杂菌试管菌株。DB 3415/T 532023 3 4.4.7.2 原种和栽培种培养 接种后将菌种袋（瓶）置于282培养室内避光培养约50 d60 d，当菌丝长满袋（瓶）后继续培养5 d10 d，进入后熟阶段，菌丝轻微变黄方可用于生产。5 菌段制作 木段制备 5.1 取栎类、桑树等树木，锯成16 cm20 cm长度的短段木，并对尖锐部分以及树结进行修整，使之圆滑平整，选择直径12 cm22 cm的段木放入水槽中使用2%饱和石灰水浸泡3 d5 d，将浸泡完毕的段木捞出竖直放置在制段台面上，选择大小合适的栽培袋装入木段，袋口弯折一次，扎紧袋口，放入筐中。灭菌 5.2 5.2.1 高压灭菌 高压灭菌段木14 h16 h。灭菌结束后经自然冷却至50时出锅，搬运至冷却室或接种室备用。5.2.2 常压灭菌 常压灭菌段木40 h48 h。灭菌结束后经自然冷却至50时出锅，搬运至冷却室或接种室备用。接种 5.3 5.3.1 菌种选择 选用适龄菌种，菌丝淡黄色至黄色、粗壮、匍匐状、生长好、无杂菌、无萎缩离壁现象。5.3.2 接种方法 按照无菌操作方法进行接种。5.3.3 接种量 每袋栽培种接8至12袋段木。培养 5.4 避光，温度宜控制在2628，湿度50%RH60%RH，培养时间150 d。DB 3415/T 532023 4 A A 附录A （规范性）培养基配方 A.1 母种培养基配方 母种培养基配方见表A.1。表A.1 母种培养基配方 项目 用量 土豆粉 10 g 葡萄糖 20 g 桑树粉 20 g 琼脂 20 g 水 1000 mL A.2 原种培养基配方 原种培养基配方见表A.2。表A.2 原种培养基配方 项目 占比 木屑 78%麸皮 20%石膏粉 1%生石灰 1%A.3 栽培种培养基配方 栽培种培养基配方见表A.3.表A.3 栽培种培养基配方 项目 占比 木屑 78%麸皮 20%石膏粉 1%生石灰 1%