化妆品中二恶烷的检测方法(SFDA).doc

附件7：
化妆品中二噁烷的检测方法

1 适用范围
本方法规定了采用气相色谱-质谱法测定化妆品中二噁烷（1，4-二氧六环，CAS ：123-91-1）的方法。
本方法适用于膏霜、乳、液类化妆品中二噁烷含量的测定。暂无实验数据支持本方法适用于粉类、腊质类化妆品。
2 方法提要
样品在顶空瓶中经过加热提取后，用气相色谱-质谱法测定，采用离子相对丰度比进行定性，以选择离子监测模式进行测定，以标准加入单点法计算含量。本方法对二噁烷的检出限为2µg，定量下限为6µg；若取2.0g样品测定，本方法对二噁烷的检出浓度为1µg/g，二噁烷的最低定量浓度为3µg/g。
3 试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯。
3.1 二噁烷，纯度>99%。
3.2 二噁烷标准储备液：准确称取适量的二噁烷0.1g（准确至0.0001g），置100mL容量瓶中，用去离子水配制成浓度为1000µg/mL的标准储备液。
3.3 二噁烷系列浓度标准工作溶液：用去离子水将上述（3.2）储备液分别配成二噁烷浓度为0 μg/mL、4 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL，50 μg/mL、100 μg/mL系列浓度标准工作溶液。
3.4 氯化钠。
3.5 二噁烷定性标准：取50 μg/mL二噁烷标准溶液（3.3）1mL，置于顶空进样瓶中，加入1g氯化钠（3.4）固体，加入7mL去离子水，密封后超声，轻轻摇匀，作为二噁烷定性标准。
4 仪器
4.1 气相色谱仪，配有质谱检测器（MSD）。
4.2 顶空进样器，或气密针。
4.3 顶空瓶：20mL。
4.4 分析天平：感量0.0001g。
4.5 超声波清洗仪。
5 测定步骤
5.1 样品处理
准确称取样品2.0g，精确至0.001g，置于顶空进样瓶中，加入1g氯化钠（3.4）固体，加入7mL去离子水，分别精密加入二噁烷系列浓度标准工作溶液（3.3）1mL，密封后超声，轻轻摇匀，作为加系列标准工作溶液的样品。置于顶空进样器中，待测。
5.2 顶空进样器条件
汽化室温度：70℃；定量管温度：150℃；传输线温度：200℃；
振荡情况：振荡；
汽液平衡时间：40min；进样时间：1min。
5.3 气相色谱-质谱（GC/MSD）条件
50℃/min
色谱柱：交联5%苯基甲基硅烷毛细管柱【30m×0.25mm（内径）×0.25µm】或相当者；
色谱柱温度：40℃（5min） 150℃（2min），可根据实验室情况适当调整升温程序；
进样口温度：210℃；
色谱-质谱接口温度：280℃；
载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min；
电离方式：EI；
电离能量：70eV；
测定方式：选择离子检测（SIM），选择检测离子（m/z）见表1；
进样方式：分流进样，分流比10：1；
进样量：1.0mL。
5.4 定性判定
用气相色谱-质谱仪对加二噁烷标准浓度为0μg/mL的样品（5.1）、二噁烷定性标准（3.5）进行定性测定，如果检出的色谱峰的保留时间与二噁烷定性标准相一致，并且在扣除背景后样品的质谱图中，所选择的检测离子均出现，而且检测离子相对丰度比与标准样品的离子相对丰度比相一致（见表1），则可以判断样品中存在二噁烷。
表1 检测离子和离子相对丰度比
检测离子（m/z）
离子相对丰度比（%）
允许相对偏差（%）
88
100

58
应用标准品测定离子相对丰度比
±20
43
应用标准品测定离子相对丰度比
±25
5.5 定量测定
用加系列浓度标准工作溶液的样品（5.1）分别进样，以检测离子（m/z）88为定量离子，以二噁烷峰面积为纵坐标，二噁烷标准加入量为横坐标进行线性回归，建立标准曲线，其线性相关系数应 > 0.99。按“6 计算”，计算样品中二噁烷的含量。
5.6 平行实验
按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
6计算
6.1 确定标准加入单点法中用于计算的标准参考量
选择加标为0 µg/mL的样品作为样品取样量（m），根据样品（m）的峰面积（Ai），选择加入二噁烷标准品后二噁烷的峰面积（As）与2 Ai相当的加标样品（mi）作为计算用标准（ms），应用标准加入单点法对样品进行计算。
ms
6.2
(As / Ai ) — (mi / m )
ω（二噁烷）= （ ）/ m

式中：ω（二噁烷）—— 样品中二噁烷的含量，μg/g；
ms —— 加入二噁烷标准品的量，μg；
Ai —— 样品中二噁烷的峰面积；
As —— 加入二噁烷标准品后样品中二噁烷的峰面积；
m —— 样品取样量，g；
mi —— 加入二噁烷标准品的样品取样量，g。
7 精密度与准确度
多家实验室验证的平均回收率为84.9%-113%，相对标准偏差小于13.3%（n=6）。

8 质谱图与色谱图

图1 二噁烷标准质谱图

图2 空白样品加二噁烷的GC-MS提取离子图 （m/z 88）
二噁烷色谱峰（TR=4.27 min）