贵州八种林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长的影响.pdf

dible fungi生 理 生 化2023年第45卷第4期dible fungi摘要为初步研究不同林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长的影响。采用PDA平板培养法，考察贵州省地产桦槁木、杜仲木、青冈木、构树木、白杨木、樱桃木、核桃木以及硬杂木（对照）8种木屑的浸出液对红托竹荪菌丝生长的影响。结果表明，青冈木、杜仲木、构树木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有比较好的促进作用，在 PDA培养基中添加 27%桦槁木木屑浸出液、4%青冈木木屑浸出液、27%杜仲木木屑浸出液、27%构树木木屑浸出液为宜，红托竹荪菌丝浓密、生长均匀。关键词红托竹荪浸出液木屑生长速度菌丝长势中图分类号S646.9文章编号1000-8357（2023）04-0010-04红 托 竹 荪 Dictyophora rubrovolvata 属 竹 荪 属Dictyophora，是一种珍贵食用菌1-2，被称为“菌中皇后”3。红托竹荪是贵州特有的一种清香型竹荪4，其子实体洁白，具有裙伞，不仅外形优美且味道鲜美，营养丰富，含有大量的氨基酸、蛋白质、维生素和多糖等营养物质5，深受消费者青睐，而且也是目前国内外市场上价格比较高的一类食用真菌。红托竹荪全株由菌托、菌柄、菌盖构成6，菌托约占全株鲜重的25%30%，含有多糖、氨基酸、蛋白质等营养成分7-8。红托竹荪不仅食用价值高，还具有极高的经济价值和潜在的药用价值9。红托竹荪由于生长速度慢，因此，比其他食用菌更容易被杂菌侵染。林果木木屑浸出液含有多种营养物质，利用其浸出液培养食用菌，往往能促进其菌丝生长10。贵州省栽培红托竹荪已有30多年的历史，同时也有较为丰富的林果木木屑资源。为此，试验在PDA培养基中分别加入贵州地区比较容易获得的8种林果木屑浸出液，考察其对红托竹荪菌丝生长的影响，以期能够找到比较适合红托竹荪菌丝生长的木屑，为红托竹荪的生产和栽培提供理论支持。1材料与方法1.1供试材料供试木屑选择贵州省比较常见的林果木：樱桃木、核桃木、构树木、杜仲木、青冈木、桦槁木、白杨木，对照木屑选择金蟾大山生物科技有限责任公司发酵用的硬杂木屑。供试菌株：红托竹荪菌株为金蟾大山生物科技有限责任公司自主驯化选育的14-33（图1）。1.2试验方法PDA 培养基：土豆 200 g，葡萄糖 20 g，琼脂粉18 g，水1 000 mL。将土豆切片注水后，加入葡萄糖和琼脂粉，待全部溶解后定容至1 000 mL备用。将供试木屑于 50 烘箱中烘干至恒重，称取20.0 g，加入1 L水煮沸20 min，用纱布过滤，浓缩滤液至100 mL备用11。取8 mL、32 mL、54 mL木屑浸出液加入PDA培养基中，定容至200 mL，其体积分数分别为4%、16%、27%，空白组为0%。用蠕动泵分装培养基，每个培养皿分装22 mL，每个木屑处理组9个平皿。装好培养基平皿用报纸包好后，于121 灭菌30 min，待灭菌结束趁热置超净工作台，冷却后接种。用直径5 mm打孔器取供试菌株菌龄一致的菌丝块接种至培养皿中央，于22 培养。分别在接种后的10 d、17 d、20 d、24 d采用画线法测定菌落直径并计算菌丝生长速度。菌丝平均生长速度(mm/d)=（第 2 次 测 量 直径-第1次测量直径）（mm）2菌丝生长天数（d）。2结果与分析2.1供试林果木屑浸出液pH按照 1.2的试验方法获得林果木屑浸出液，用pH测定剂、糖度计等检测浸出液的理化指标，结果收稿日期：2023-04-10 一稿；2023-04-19修改稿。基金项目：纳雍县食用菌智能化种植项目（编号：P23520525-0002）。作者简介：陈翠翠，硕士，从事食用菌菌种选育及生产。联系电话：[phone]。E-mail：*通信作者：巩玉辉，硕士，农艺师，主要从事食用菌生产技术管理方面研究。E-mail：，2023，45（4）：1013；21陈翠翠，等：贵州八种林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长的影响贵州八种林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长的影响陈翠翠巩玉辉*宋雕刘亚雯（贵州金蟾大山生物科技有限责任公司，贵州毕节 553300）10dible fungi生 理 生 化2023年第45卷第4期详见表1。表1供试木屑浸出液理化指标木屑浸出液构树木青冈木杜仲木樱桃木核桃木桦槁木白杨木硬杂木（CK）pH4.274.775.055.545.625.726.246.74糖度（BR）0.81.00.60.20.40.20.40.1颜色棕褐色棕色棕褐色黄色，沉淀物较多褐色淡黄色，清澈棕色棕褐色，微微发红，清澈透光性不透光不透光不透光不透光不透光透光透光透光由表1、图2可知，桦槁木、白杨木、硬杂木木屑浸出液无沉淀物或较少，颜色清澈，可以透光，而构树木、青冈木、杜仲木、樱桃木、核桃木木屑浸出液颜色深浅不一且沉淀物较多；不同种类木屑的浸出液pH也有差异，青冈木、构树木、杜仲木木屑浸出液的糖度要高于其他木屑。2.2供试木屑浸出液对红托竹荪菌丝长势的影响含不同木屑浸出液培养基中红托竹荪菌丝生长状态见表2、图3。培养10 d、24 d，测定各木屑浸出液处理组红托竹荪菌丝菌落直径（表4）。由表 3、图 3可知，培养基添加 4%樱桃木木屑浸出液、4%白杨木木屑浸出液、16%白杨木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长没有促进作用，其他添加量有一定的促进作用。未添加木屑浸出液的菌丝均匀度较差，菌丝较稀疏，添加木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有不同程度的促进作用。由表3可知，菌丝培养24 d，供试木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长促进作用排序为桦槁木木屑杜仲木木屑青冈木木屑构树木木屑樱桃木木屑硬杂木木屑白杨木木屑核桃木木屑空白对照组。桦槁木木屑浸出液对红托竹荪生长具有明显促进作用，且随着添加量的上升，菌丝越浓密。杜仲木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有较好的促进作用，且随着添加量的上升，效果更明显。青冈木木屑浸出液添加量不可超过 16%，否则对菌丝生长促进作用减弱，且菌落不规则，其最适宜添加量为4%。构树木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长有促进作用，菌丝浓密，生长均匀，均一性好，但菌丝生长速度稍慢。添加16%樱桃木木屑浸出液有明显促进作用，菌丝生长快，且比较均匀，添加量为4%的菌丝生长状态很差，生长慢，添加量超过16%，菌丝生长旺盛，但菌丝生长速度要比添加量16%时略慢。添加27%硬杂木（CK）木屑浸出液，菌丝生长状态较好，菌丝洁白浓密，添加量为4%、16%促进菌丝生长作用弱，菌丝一致性较差。添加4%、16%白杨木木屑浸出液，对菌丝生长促进作用较弱，菌丝较浓密，但其均匀性、图1供试红托竹荪菌株子实体（右）及PDA培养菌种（左）从左往右依次为对照、桦槁木、构树木、白杨木、杜仲木、樱桃木、青冈木、核桃木的木屑浸出液图2供试木屑浸出液11dible fungi生 理 生 化2023年第45卷第4期表2含有供试木屑浸出液培养基中红托竹荪菌丝生长状态木屑种类空白对照组构树木青冈木杜仲木樱桃木核桃木桦槁木白杨木硬杂木（对照）红托竹荪菌丝生长情况4%浸出液添加量菌丝洁白，菌丝不太适应培养基，生长不整齐，长势不均匀菌丝浓密，气生菌丝浓密，长势好，生长均匀菌丝洁白浓密，适应性好，生长均匀，长势好菌丝较稀疏，部分菌丝适应培养基生长，长势不太均匀菌丝洁白，菌丝不太适应培养基，长势不均匀菌丝浓密洁白，菌丝生长不均匀，长势较好菌丝洁白浓密，适应性好，菌丝生长均匀，长势好菌丝洁白，菌丝不太适应培养基，长势不均匀菌丝洁白，部分菌丝适应培养基，整体不均匀，长势较好16%浸出液添加量菌丝浓密，气生菌丝较 4%处理浓密，长势好，生长均匀菌丝洁白浓密，适应性好，生长均匀，长势好菌丝浓密，洁白，长势好菌丝洁白，适应性良好，长势好菌丝浓密，洁白，菌丝不适应培养基，生长不均匀，长势较好菌丝洁白浓密，适应性好，菌丝生长均匀，长势好菌丝浓密，部分菌丝适应培养基，菌丝整体不均匀，长势较好菌丝洁白，部分菌丝适应培养基，整体不均匀，长势较好27%浸出液添加量菌丝浓密，气生菌丝较 4%处理浓密，长势好，生长均匀菌丝洁白浓密，部分菌丝适应，生长均匀性较差，长势较好菌丝浓密，洁白，适应培养基，生长均匀，长势好菌丝洁白浓密，均匀性较好，生长偏慢，长势较好菌丝浓密，洁白，不适应培养基，菌丝生长不均匀，长势较好菌丝洁白浓密，适应性好，菌丝生长均匀，长势好菌丝洁白，大部分适应培养基，整体较为均匀，长势较好菌丝洁白，大部分适应培养基，菌丝正常生长，长势较好表3各处理培养10 d、24 d红托竹荪菌落直径注：不同小写字母表示P0.05水平差异显著。木屑种类空白对照组硬杂木（对照）白杨木核桃木樱桃木青冈木杜仲木桦槁木构树木培养10 d菌落直径/cm4%浸出液添加量1.826 5 cd2.685 6 a2.298 7 ab2.325 ab1.661 1 d2.637 8 a2.088 9 bc2.474 4 ab2.33 2 ab16%浸出液添加量1.826 5 c2.603 8 ab2.232 9 bc2.383 3 b2.508 3 ab2.901 4 a2.474 4 ab2.38 b2.401 1 b27%浸出液添加量1.826 5 cd2.483 3 b1.881 8 cd2.597 2 b1.769 4 d2.87 a2.412 5 b2.423 8 b2.138 8 c培养24 d菌落直径/cm4%浸出液添加量6.171 9 de7.351 1 c6.146 2 e6.961 1 cd5.602 8 de8.511 1 a7.483 3 bc8.202 2 ab8.216 ab16%浸出液添加量6.171 9 e7.705 bc6.912 9 de7.083 3 cd8.111 1 ab8.128 6 ab8.288 9 ab8.464 3 a7.573 3 bcd27%浸出液添加量6.171 9 e8.054 4 bc6.959 1 d6.9 083 d7.744 4 c8.166 3 abc8.575 ab8.7 a8.013 8 bc从左往右依次为杜仲木、硬杂木（对照）、白杨木、青冈木、核桃木、桦槁木、樱桃木、构树木木屑浸出液培养基；从下往上依次为空白，木屑浸出液添加量4%、16%、27%；限于篇幅未给出全部平皿图3各处理培养基上红托竹荪菌丝生长状态12dible fungi生 理 生 化2023年第45卷第4期一致性差，与硬杂木木屑浸出液差异不明显，添加27%白杨木木屑浸出液，比空白组菌丝生长稍快。添加核桃木木屑浸出液，菌丝培养前期（10 d）对菌丝生长促进作用较好，后期（24 d）促进作用减弱，菌丝生长仅比空白组稍快，但菌落致密洁白。2.3供试林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长速度的影响分别在红托竹荪菌丝培养10 d、20 d时测定菌落直径，计算菌丝平均生长速度。由表 4可知，红托竹荪菌丝培养前期（10 d）主要为红托竹荪菌丝适应培养基的过程，是其适应性生长的过程12，菌丝平均生长速度较慢，空白对照组为0.7 225 mm/d，添加4%樱桃木木屑浸出液菌丝生长速度为 0.5 811 mm/d，慢于空白组，差异显著，表明其对红托竹荪菌丝生长没有促进作用；菌丝培养20 d，添加27%核桃木木屑浸出液菌丝平均长速最慢，为 1.421 1 mm/d，与空白组（1.8 231 mm/d）差异显著。菌丝培养20 d，对菌丝生长有明显促进作用的分别为添加16%樱桃木木屑浸出液、16%桦槁木木屑浸出液、16%杜仲木木屑浸出液，菌丝平均生长速度均快于空白组，且差异显著，可见上述处理对红托竹荪菌丝生长具有明显促进作用。由表4、图3可知，添加构树木木屑浸出液菌丝培养10 d内对其生长具有促进作用，与空白组差异显著，培养20 d内，菌丝平均生长速度与空白组差异不显著，但菌落浓密、均匀。3小结与讨论生产实践中发现经红托竹荪菌丝分解后的木屑会变得非常软，说明其对木质素的分解能力非常强。张晶等13研究表明，加入天然物质浸出液可以促进白腐真菌产酶，促进其菌丝生长，与笔者试验结果相符合。ROBBINS等14研究表明，木材浸出液对羊肚菌菌丝生长的刺激作用明显。向世华15认为大多数食用菌如用其自然发生的基质浸出汁能促进其菌丝生长，说明基质浸出液中含多种营养物质或者生长调节物质，但是生长调节物质并不能被同化为真菌自身组成物，而只是参与一些代谢反应，这些刺激物质具有热稳定性，不易挥发，但这些物质对真菌生长、发育至关重要。试验结果表明，贵州省桦槁木、青冈木、杜仲木、构树木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有比较好的促进作用，其适宜添加量分别为27%桦槁木木屑浸出液、4%青冈木木屑浸出液、27杜仲木木屑浸出液%、27%构树木木屑浸出液。参考文献 1 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cd1.421 1 d1.915 6 bc2.012 5 ab2.295 0 a2.290 0 a1.986 2 abc（下转第21页）13dible fungi资 源 调 查2023年第45卷第4期东科技出版社，1994.142 应建浙，臧穆.西南地区大型经济真菌M.北京：科学出版社，1994.143 陈康林.药用真菌肿瘤学M.北京：中医古籍出版社，2017.144 蔡爱群，宋斌，钟月金，等.粤北地区的抗肿瘤药用真菌资源研究J.Journal of Clinical Endocrinology&Metabolism，2007，27（5）：88-92.145 郭婷，杨瑞恒，汤明霞，等.黄山大型真菌的物种多样性J.菌物学报，2022，41（9）：1398-1415.146 张林平，胡少昌，彭维国.江西九连山自然保护区大型真菌物种多样性的研究J.江西农业大学学报，2007，19（7）：97-101；105.147 林海.真菌生物活性物质的研究概况J.海南大学学报（自然科学版），1991，9（1）：75-81.148 WU S H，LIN Y T，CHERN C L，et al.Inonotus taiwanensissp.nov.（Basidiomycota）from TaiwanJ.Mycoscience，2017，59（5）：325-330.149 VLASAK J，LI H J，ZHOU L W，et al.A further study onInonotus linteus complex（Hymenochaetales，Basidiomycota）in tropical AmericaJ.Phytotaxa，2013，124（1）：25-36.150 邓叔群.中国的真菌J.北京：科学出版社，1963.151 DAI Y C.Phellinus sensu lato（Aphyllophorales，Hymenochaetaceae）in East AsiaJ.Acta Botanica Fennica，1999，166：1-115.152 吴声华，戴玉成.药用真菌桑黄的种类解析J.菌物学报，2020，39（5）：781-794.153 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