喹硫磷原药分析方法-GB8204—87.docx

GB　8204—87
　　本标准适用于由O，O-二乙基硫逐磷酰氯与2-羟基喹啉合成的喹硫磷原药含量的测定。
　　有效成分：O，O-二乙基-O-〔喹啉2-基〕硫逐磷酸酯。
　　结构式：

　　分子式：C12H15N2O3PS
　　分子量：298.30（1983年国际原子量）
1　薄层-磷钼酸喹啉重量法（仲裁法）
　1.1　方法提要
　　喹硫磷原药在石油醚＋丙酮＝5＋1为展开剂时，经过薄层分离后的喹硫磷在氧化剂作用下，有机磷被氧化成无机磷酸，在酸性条件下，磷酸与喹钼柠酮试剂作用生成黄色的磷钼酸喹啉沉淀，此沉淀用重量进行测定，乘以换算系数，即可得出喹硫磷的含量。

　1.2　试剂和溶液
　　硅胶HF254+366或GF254：薄层层析用；
　　硫酸（GB 625─77）：分析纯；
　　高氯酸（GB 623─77）：分析纯；
　　硝酸（GB 626─78）：分析纯；
　　石油醚（HG 3─1003─76）：分析纯；
　　丙酮（GB 686─78）：分析纯；
　　钼酸钠（HG 3─1087─77）：分析纯；
　　柠檬酸（HG 3─1108─81）：分析纯；
　　喹啉（沪Q/HG 2─212─65）：分析纯；
　　钼酸钠-高氯酸-硫酸溶液：称取35g钼酸钠溶于150ml水中，缓缓加入250ml浓硫酸，冷却后加入70％～72％高氯酸200ml，摇匀备用。
　　喹钼柠酮溶液配制：
　　溶液Ⅰ：称取70g钼酸钠溶于150ml蒸馏水中。
　　溶液Ⅱ：称取60g柠檬酸溶于85ml浓硝酸和150ml蒸馏水中。
　　溶液Ⅲ：在不断搅拌下缓缓将溶液Ⅰ加到溶液Ⅱ中。
　　溶液Ⅳ：量取5ml喹啉溶于35ml浓硝酸和100ml蒸馏水的混合液中。
　　缓缓将溶液Ⅳ加入溶液Ⅲ中，混合搅匀放置过夜，过滤，收集滤液，加入280ml丙酮，用蒸馏水稀释至1L，摇匀备用。
　　展开剂：石油醚＋丙酮＝5＋1（使用前现制备）。
　1.3　仪器
　　层析缸；
　　干燥器；
　　层析玻璃板：200mm×200mm；
　　1ml注射器（配4号针头）；
　　刮刀；
　　500ml抽滤瓶；
　　30ml4号玻璃砂芯漏斗；
　　30ml4号玻砂坩埚；
　　254nm紫外灯。
　1.4　测定步骤
　1.4.1　薄层板的制备
　　称取5g硅胶HF254+366（或GF254）于50ml小烧杯中，加入14ml蒸馏水（视每批硅胶质量可适当增减）均匀地搅拌成糊状，立刻倒在清洁、干燥的层析玻璃板上，并轻轻地振动，使硅1胶在板上分布均匀无气泡，置板于水平处（在红外灯下或室温下固化）晾干，放于100℃烘箱中活化1h稍冷后取出，贮存于干燥器中备用。
　1.4.2 薄层分离与测定
　　取一块已活化好的薄层板，用1ml注射器吸取适量喹硫磷原药，用差减法称取约0.1g（精确至0.2mg）
在离薄层板底边2.5cm处成直线状点样（点样线两端离两边各1.5cm），风干除去溶剂后，置于盛有展开
剂的层析缸中展开（薄层板浸入溶剂约1cm），当溶剂前沿上升到距点样线约12cm时，把板取出，放入通
风橱中，在红外灯下（不超过 40℃），使溶剂挥发，在紫外灯下，用针尖划出喹硫磷的谱带的轮廓
（Rf≈0.72），用刮刀将喹硫磷谱带的硅胶刮入30ml玻砂漏斗中，并用少量丙酮湿润过的滤纸擦洗玻璃
板，把滤纸放入玻砂漏斗中。将玻砂漏斗连接克氏烧瓶及减压装置，用丙酮洗涤，抽滤5～6次，每次
5～6ml，然后把克氏烧瓶浸入热水中，把丙酮蒸发干。
　　取下克氏烧瓶，置于通风橱内，加入10ml浓硝酸，10ml钼酸钠、高氯酸、硫酸混和液，加热待大量冒出白烟后，取下冷却至室温，将溶液转入40ml烧杯中，加1＋1硝酸10ml，加热至沸再加入50ml喹钼柠酮溶液，加热至微沸取下，用恒重的30ml4号玻砂坩埚减压过滤，用水洗涤沉淀8～10次，将玻砂坩埚置于180℃烘箱中烘45min，取出放入干燥器中，冷却至室温称至恒重。
　　按式（1）计算样品中喹硫磷的百分含量X1（重量比）：
  Xi＝mi×0.1349/m2×100
………………………………………………（1）

式中：m2──
称取喹硫磷原药重量，g；
m1──
称得磷钼酸喹啉沉淀量，g；
0.1349──
磷钼酸喹啉换算为喹硫磷的系数。
　1.5　方法偏差
　　本方法的平行偏差不应大于1.0％。
2　气相色谱法
　2.1　方法提要
　　样品用丙酮溶解，以正二十一烷为内标，5％QF－1＋3％DC-200混合固定液涂于Chrom Q上为柱填充物，采用氢火焰离子化检测器，对喹硫磷进行分离和测定。
　2.2　试剂
　　丙酮（GB 686─78）：分析纯；
　　三氯甲烷（GB 682─78）：分析纯；
　　色谱固定液：QF-1和DC-200；
　　担体：Gas chrom Q（60～80目）；
　　内标物：正二十一烷（没有与喹硫磷分离不开的杂质）；
　　喹硫磷标准品：含量大于98.0％。
　2.3　仪器
　　气相色谱仪：氢火焰离子化检测器，并能配备玻璃柱。
　　记录仪或积分仪。
　　色谱柱：长80cm、内径2～3mm，聚四氟乙烯管或玻璃柱。
　　微量注射器：10μl。
　2.4　色谱柱制备
    2.4.1　固定液的涂渍
　　称取约20.0gGas chrom Q担体放入100℃烘箱中，烘2h。称取QF-11.00g；和DC-2000.60g，置于小烧杯中，在通风橱中用适量1＋1丙酮和三氯甲烷混合溶剂（正好浸没要涂的全部担体）在水浴上完全溶解，将烘好的10g担体一次倒入上述溶液中，轻轻搅拌，混合均匀，然后转入培养皿中，在红外灯下烘烤，使溶剂完全挥发，过筛，取60～80目。
　　2.4.2　色谱柱的填充
　　将色谱柱入口一端接玻璃小漏斗，另一端塞玻璃棉并用干净纱布包裹与真空泵连接，开启真空泵，从漏斗处徐徐加入已涂好的填充物，不断轻轻振动色谱柱，待填充物均匀紧密地填满后，取下漏斗，关闭真空泵，在入口端亦塞以玻璃棉。
　2.4.3　色谱柱的老化
　　将色谱柱的入口端与色谱仪的汽化室相接，出口端先不接检测器，以40ml/min的流速通载气，在柱温250℃老化24h，然后降温，将柱出口端与检测器相接，待仪器基线平稳后，进行测定。
　2.5　色谱操作条件
　　温度：柱室190±2℃；汽化室230℃；检测室230℃。
　　气体流速：载气（N2）140ml/min；氢气60ml/min；空气630ml/min。
　　灵敏度：1×104。
　　纸速：5mm/min。
　　喹硫磷保留时间约457s。
　　内标物保留时间约370s。
　　上述操作条件系典型操作参数。分析者可根据仪器的特点，对操作参数作适当调整，以获得最佳效果。
　2.6　测定步骤
　2.6.1　标准样品溶液的配制
　　称取0.5g（准确至0.2mg）标准样品置于25ml容量瓶中用丙酮稀释至刻度，摇匀，再称取0.32g（准确至0.2mg）内标物置于另一个25ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀。
　　用吸液管从上述内标稀释液中吸取2ml，分别放入四个清洁的样品瓶中，再用吸液管从上述标 准样品稀释液中吸取1.5、2、2.5、3ml，分别放入已装入内标稀释液的四个样品瓶中，摇匀。
　2.6.2　样品溶液的配制
　　称取含喹硫磷约0.5g（准确至0.2mg）原药样品置于25ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀，并用吸液管吸取2.5ml置于样品瓶中，再用吸液管从2.6.1内标稀释液中取2ml于该样品瓶中，摇匀。
　2.6.3　气相色谱标准曲线的绘制
　　在2.5条件下，待仪器稳定后，进标准样品溶液各1μl，测得标准品和内标的峰面积。以标准品与相应内标的质量比为横坐标，标准品与相应内标的峰面积比为纵坐标，绘出定量标准工作曲线（此工作曲线应经常进行校正）。
　2.6.4　样品的测定
　　在2.5条件下，待仪器稳定后，进样品溶液1μl，测定试样中喹硫磷对内标物质的峰面积。
　2.6.5　计算
　　样品中喹硫磷百分含量X2（质量比）按式（2）计算：
       X2=（ms·r/mi）×100
……………………………………………………（2）

式中：r──
在标准曲线上查得喹硫磷对内标的质量比；
mi──
称取喹硫磷样品量，g；
ms──
称取内标（正二十一烷）量，g；
　2.7　方法偏差
        本方法平行偏差不大于2.0％。