荧光原位杂交检测MDM2和...改变在诊断脂肪肉瘤中的价值_王微.pdf

论著荧光原位杂交检测 MDM2 和 DDIT3 基因信号改变在诊断脂肪肉瘤中的价值王微，李鑫，柳萍，董颖(北京大学第一医院病理科，北京100034)摘要目的:探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)法检测 MDM2 和 DDIT3 基因在各亚型脂肪肉瘤的临床诊断价值。方法:回顾性分析北京大学第一医院病理科 2015 年 1 月至 2019 年 12 月诊断的 62 例脂肪肉瘤的临床病理学特征，所有病例进行了 MDM2 基因扩增 FISH 检测，其中48 例进行了 DDIT3 基因断裂 FISH 检测，观察 MDM2 和 DDIT3 基因信号改变模式，并综合临床病理学特征确诊不同亚型脂肪肉瘤。结果:62 例患者以男性多见(男 女=1 75 1)，中位年龄 59(31 89)岁。脂肪肉瘤组织学亚型包括 20 例非典型脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤(atypical lipomatous tumour/well differentiated liposarcoma，ALT/WDLPS)、26 例去分化脂肪肉瘤(dedif-ferentiated liposarcoma，DDLPS)、13 例黏液样脂肪肉瘤(myxoid liposarcoma，MLPS)和 3 例多形性脂肪肉瘤(pleomor-phic liposarcoma，PLPS)，其中 23 例(23/26)DDLPS 和 8 例(8/20)WDLPS 位于腹膜后，而 MLPS 和 PLPS 则均不位于腹膜后。肿瘤发生部位在不同亚型脂肪肉瘤间的差异具有统计学意义(P 0 05)。组织形态学上，各亚型脂肪肉瘤均可见多少不等的黏液样间质，且差别具有统计学意义(P 0 05)。MDM2 基因扩增见于所有 ALT/WDLPS和 DDLPS(均为 100%，20/20 及 26/26);DDIT3 分离探针典型信号表现为基因断裂/易位，仅见于 MLPS(100%，13/13)，但值得注意的是，该探针还可出现非典型信号(端粒侧信号簇状扩增)，比较常见，包括绝大多数 DDLPS(96 2%，25/26)和 ALT/WDLPS(83 3%，5/6，探针只随机检测 6 例)。对照分析探针说明书上的设计图，DDIT3分离探针之红绿色探针并未覆盖 DDIT3 基因本身，而是跨越了 DDIT3 基因，且探针端粒侧红色探针覆盖了 CDK4基因，而 DDIT3 基因与 CDK4 基因距离很近，因此，当 DDIT3 分离探针端粒侧出现簇状扩增信号，提示 CDK4 基因扩增而非 DDIT3 基因断裂。随机挑选 10 例出现这种非典型信号的病例，以 FISH 法进一步应用 CDK4 和 DDIT3 计数探针进行验证，证实为 CDK4 基因扩增(100%，10/10)，其中 2 例同时检测到 DDIT3 基因扩增(20%，2/10);DDIT3 分离探针还存在另一种少见的非典型信号，即基因拷贝数增加(黄色融合信号数目3 个)，对应形态学表现为多形性和预后差，见于 1 例 DDLPS 和 2 例 PLPS。结论:利用 FISH 技术观察 MDM2 和 DDIT3 基因信号改变模式时，需要注意对非典型信号做出正确判读，并结合患者的临床病理学特征，才能对不同亚型脂肪肉瘤做出正确诊断，进一步指导临床治疗。关键词脂肪肉瘤;MDM2 基因;DDIT3 基因;原位杂交，荧光 中图分类号365 文献标志码A 文章编号1671-167X(2023)02-0228-06doi:10 19723/j issn 1671-167X 2023 02 005Clinical value of fluorescence in situ hybridization with MDM2 and DDIT3 probe indiagnosis of liposarcomaWANG Wei，LI Xin，LIU Ping，DONG Ying(Department of Pathology，Peking University First Hospital，Beijing 100034，China)Corresponding author s e-mail，dongying_999163 com网络出版时间:2023-2-1615:01:49网络出版地址:http:/kns cnki net/kcms/detail/114691 202302161046 002 htmlABSTACTObjective:To investigate the value of using MDM2 amplification probe and DDIT3 dual-color，break-apart rearrangement probe fluorescence in situ hybridization(FISH)technique in the diag-nosis of liposarcoma Methods:In the study，62 cases of liposarcoma diagnosed in Peking UniversityFirst Hospital from January 2015 to December 2019 were analysed for clinicopathological information Ofthese 62 cases of liposarcoma，all were analysed for MDM2 amplification and 48 cases were analysed forDDIT3 rearrangement using a FISH technique Our study aimed to evaluate the status of MDM2 andDDIT3 by FISH in liposarcoma and correlate it with diagnosis of different subtypes of liposarcoma Thesubtypes of liposarcoma were classified according to the FISH results，combined with the relevant clinico-pathological features esults:The patients aged 31 89 years(mean:59 years)with a 1 75 1 maleto female ratio Histologically，there were 20 cases of atypical lipomatous tumour/well-differentiated lipo-822北京大学学报(医学版)JOUNAL OF PEKING UNIVESITY(HEALTH SCIENCES)Vol55No 2Apr 2023sarcoma(ALT/WDLPS)，26 cases of dedifferentiated liposarcoma(DDLPS)，13 myxoid liposarcoma(MLPS)and 3 pleomorphic liposarcoma(PLPS)Tumors with DDLPS(23/26)and WDLPS(8/20)were localized retroperitoneally，while both tumours of MLPS and PLPS were localized extra-retroperitone-ally，and the difference of sites among the four subtypes of liposarcoma was statistically significant(P 0 05)Histologically，varied mucoid matrix could be observed in the four subtypes of liposarcoma，andthe difference was statistically significant(P 0 05)MDM2 gene amplification was demonstrated in allcases of ALT/WDLPS and DDLPS(100%，20/20 and 26/26 respectively);DDIT3 gene rearrangementwas noted only in MLPS(100%，13/13);most cases of DDLPS(96 2%，25/26)and ALT/WDLPS(83 3%，5/6，6 cases selected for detection)demonstrated the picture of amplification of the DDIT3telomeric tag According to the instructions of DDIT3 break-apart rearrangement probe，the 5 telomereprobe and 3 centromere probe spanned but did not cover the DDIT3 gene itself，on the contrary，the 5telomere probe covered the CDK4 gene，while the DDIT3 and CDK4 gene were located adjacent to eachother on chromosome，therefore，when the amplification signal appeared on the telomeric tag of theDDIT3 rearrangement probe，it indeed indicated the CDK4 gene amplification rather than the DDIT3 generearrangement Then the 10 cases with DDIT3 telomeric tag amplification were selected for CDK4 andDDIT3 gene amplification probe FISH tests，and all the cases showed CDK4 gene amplification(100%，10/10)and two of the 10 cases demonstrated co-amplification of CDK4 and DDIT3(20%，2/10);DDIT3 polysomy detected by DDIT3 gene rearrangement probe was found in 1 case of DDLPS and 2 casesof PLPS(66 7%，2/3)with morphology of high-grade malignant tumour and poor prognosis Conclu-sion:Our results indicate that a diagnosis of different subtype liposarcoma could be confirmed based onthe application of MDM2 and DDIT3 FISH，combined with clinicopathological findings It is also note-worthy that atypical signals should be correctly interpreted to guide correct treatment of liposarcomasKEY WODSLiposarcoma;MDM2 gene;DDIT3 gene;In situ hybridization，fluorescence脂肪肉瘤是成人最常见的软组织肉瘤，常见的4 种病理学亚型包括非典型脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤(atypical lipomatous tumour/well differentia-ted liposarcoma，ALT/WDLPS)、去 分 化 脂 肪 肉 瘤(dedifferentiated liposarcoma，DDLPS)、黏液样脂肪肉瘤(myxoid liposarcoma，MLPS)、多形性脂肪肉瘤(pleomorphic liposarcoma，PLPS)1。不同亚型脂肪肉瘤的形态学谱系广泛、也可交叉，仅凭组织学观察容易漏诊或误诊，尤其取材不充分或遇到穿刺标本时，诊断难度增加，免疫组化作用也十分有限2 3。分子生物学上，ALT/WDLPS 和 DDLPS 中最常见MDM2 基因扩增1，4 5;MLPS 最具特征性的基因改变为 DDIT3 基因断裂，并常与 FUS 基因易位融合，抑制脂肪前体细胞发育、导致 MLPS 形成;PLPS 基因改变极其复杂，缺乏 MDM2 基因扩增及 DDIT3 基因断裂/易位1，6 7，因此，通过荧光原位杂交(fluo-rescence in situ hybridization，FISH)技术检测 MDM2基因扩增和 DDIT3 基因断裂成为诊断脂肪肉瘤的最重要辅助手段2，6，8。然而 FISH 结果判读过程中还会观察到 DDIT3 基因非典型信号:5 端粒侧信号簇状扩增及拷贝数增加，后者表现为黄色融合信号数量增加(3 个)，因此，病理医师观察到探针的非典型信号时，应特别注意与 DDIT3 基因断裂信号进行区分，避免误诊。迄今为止，关于 DDIT3 基因非典型信号报道较少，对其相关的形态学及临床特点的研究有限，因此，本研究对北京大学第一医院诊治的62 例脂肪肉瘤患者病例资料进行回顾性分析，总结其临床病理学特征及 MDM2、DDIT3 基因不同信号改变特点，并复习相关文献，旨在探讨 MDM2、DDIT3 基因典型及非典型信号改变在不同亚型脂肪肉瘤诊断和鉴别诊断中的价值，以期提高临床诊治水平。1资料与方法1 1病例资料回顾性收集北京大学第一医院病理科 2015 年1 月至2019 年12 月最终诊断为脂肪肉瘤的62 例患者相关临床病理资料，包括年龄、性别、肿瘤发生部位及形态学上黏液样间质情况。1 2病理分析标本处理及常规制片:所有标本经 4%(体积分数)中性甲醛固定，石蜡包埋，常规制片，用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色。经两位软组织亚专科病理医师回顾复习病理切片，诊断标准参考2020 年版 骨与软组织肿瘤 WHO分类1。FISH:所有石蜡包埋标本经脱蜡、切片预处理、蛋白酶消化、固定、DNA 变性、杂交、原位杂交蓝染染液(4，6-diamino-2-phenyl indole，4，6-二氨基-2-苯基吲哚，DAPI)复染，通过荧光显微镜(Axio ImagerM2，蔡司公司，德国)观察肿瘤细胞核内杂交信号，进行结果分析。采用探针均为 DNA 双色探针，包括MDM2(12q15)基因计数探针、DDIT3(12q13)基因断裂探针、DDIT3(12q13)基因计数探针和 CDK4(12q14)基因计数探针，均购自广州安必平医药科922王微，等荧光原位杂交检测 MDM2 和 DDIT3 基因信号改变在诊断脂肪肉瘤中的价值技股份有限公司。所有探针均以 5端粒侧标记红色，第 12 号染色体 3着丝粒侧(CEP12)标记绿色。参照双色探针通行标准，计数典型病变区 100 个互不重叠的肿瘤细胞进行结果判读。判读标准:应用 MDM2、CDK4 和 DDIT3 计数探针检 测 时，若 10%以 上 的 肿 瘤 细 胞 核 内 红 色(MDM2/CDK4/DDIT3)/绿色信号(CEP12)比值2 0 定义为基因扩增，比值 2 0 则为基因扩增阴性2。应用 DDIT3 断裂探针检测时，有几种信号:黄色融合信号提示基因未发生断裂，判读为 DDIT3基因断裂/易位阴性;若 10%以上肿瘤细胞核内绿色和红色信号间距2 个信号点距离，判读为基因断裂/易位，为经典信号改变8 9;DDIT3 断裂探针还存在非典型信号:红色信号数目增加(5 个)定义为端粒侧信号簇状扩增;黄色融合信号数目增加(3 个)定义为基因拷贝数增加10。1 3统计学分析采用 SPSS 25 0 软件进行统计分析。计数资料(性别、年龄、部位、黏液样间质)用频数、百分比进行描述，其中性别、年龄、部位的比较采用校正卡方检验，黏液样间质的比较采用 Fisher 确切概率法检验，P 0 05 为差异有统计学意义。2结果2 1临床及病理学特征62 例脂肪肉瘤患者以男性多见(男 女=1 75 1)，中位年龄 59(31 89)岁，各亚型间性别及年龄的差异无统计学意义(P 0 05)。组织学类型以 DDLPS(26/62，41 9%)和 ALT/WDLPS(20/62，32 3%)最多见，其次为 MLPS(13/62，21 0%)，PLPS 最少见(3/62，4 8%)。发病部位上，31 例脂肪肉瘤位于腹膜后，包括 23 例 DDLPS(23/26)和 8例 WDLPS(8/20);MLPS 和 PLPS 均位于非腹膜后部位:MLPS 多位于下肢(10/13)，PLPS 则位于肩胛、前臂、下肢(各1 例)。肿瘤发生部位在各亚型脂肪肉瘤中的差异具有统计学意义(P 0001，表1)。表 14 种亚型脂肪肉瘤的临床病理学特征Table 1Clinicopathological characteristics of four subtypes of liposarcoma patientsCharacteristicsALT/WDLPS(n=20)DDLPS(n=26)MPLS(n=13)PLPS(n=3)Total(n=62)P valueGender0822Male12(600)16(615)10(769)2(667)40(645)Female8(40 0)10(385)3(231)1(333)22(355)Age/years01916010(500)16(615)3(231)2(667)31(500)6010(500)10(385)10(769)1(333)31(500)Location0 001etroperitoneally8(40 0)23(885)0(00)0(00)31(500)Extra-retroperitoneally12(600)3(115)13(1000)3(1000)31(500)Mucous stroma0001Yes8(40 0)19(731)13(1000)2(667)42(677)No12(600)7(269)0(00)1(333)20(323)Data are presented as n(%)ALT，atypical lipomatous tumour;WDLPS，well differentiated liposarcoma;DDLPS，dedifferentiated liposarcoma;MLPS，myxoid liposarcoma;PLPS，pleomorphic liposarcoma形态学上，ALT/WDLPS 均表现为分化好的脂肪肉瘤;DDLPS 表现为 ALT/WDLPS 向非脂肪源性的肿瘤成份转化，后者形态学多样;MLPS 突出特征为黏液样基质、特征性“鸡爪样”血管、形态一致的原始间叶细胞，并掺杂多少不等的印戒样脂肪母细胞，缺乏多形性细胞及梭形细胞;PLPS 的特征为含多少不等的多形性脂肪母细胞(图 1)。本研究中黏液样间质是脂肪肉瘤的一个重要形态特征，除MLPS 全部病例具有黏液间质(13/13，100%)外，40%(8/20)的 ALT/WDLPS、73%(19/26)的 DDLPS和 67%(2/3)的 PLPS 病例也存在黏液样间质，且黏液样间质在各亚型间的差异具有统计学意义(P 0 05，表 1)。2 2FISH 检测结果应用 MDM2(12q15)基因计数探针对62 例脂肪肉瘤进行检测，MDM2 基因扩增见于所有的 ALT/WDLPS 和 DDLPS，但不见于 MLPS 和 PLPS。应用 DDIT3(12q13)基因断裂探针对48 例脂肪032北京大学学报(医学版)JOUNAL OF PEKING UNIVESITY(HEALTH SCIENCES)Vol55No 2Apr 2023肉瘤(26 例 DDLPS、13 例 MLPS、3 例 PLPS 和 6 例WDLPS)进行检测，2 例(1 例 PLPS 和 1 例 WDLPS)为正常黄色融合信号，判读为 DDIT3 基因断裂阴性，其余 46 例脂肪肉瘤共观察到三种信号改变模式:(1)经典的基因断裂信号:仅见于 13 例 MLPS;(2)端粒侧红色信号簇状扩增的非典型信号:见于25 例 DDLPS 和5 例 WDLPS;(3)拷贝数增加的非典型信号:见于 1 例 DDLPS 和 2 例 PLPS(图 1，表 2)。A，well differentiated liposarcoma;B，dedifferentiated liposarcoma;C，myxoid liposarcoma;D，pleomorphic liposarcoma;E，MDM2 amplification;F，DDIT3 telomeric tag amplification;G，DDIT3 gene rearrangement;H，DDIT3 polysome(A，B，C，D，HE 200;E，F，G，H，FISH 100)FISH，fluorescence in situ hybridization图 14 种亚型脂肪肉瘤的组织学形态及 FISH 检测 MDM2 和 DDIT3 基因信号改变Figure 1Histopathological morphology of four subtype liposarcomas and status of MDM2 and DDIT3 by FISH表 2脂肪肉瘤 FISH 检测 DDIT3 基因信号改变结果Table 2Status of DDIT3 by FISH in liposarcomasStatus of DDIT3ALT/WDLPS(n=6)DDLPS(n=26)MPLS(n=13)PLPS(n=3)DDIT3 gene negativeYes1(16 7)0(00)0(00)1(333)No5(83 3)26(1000)13(1000)2(667)DDIT3-telomeric tag amplificationYes5(83 3)25(962)0(000)0(0 0)No1(16 7)1(38)13(1000)3(100 0)DDIT3 gene rearrangementYes0(00)0(00)13(1000)0(0 0)No6(1000)26(1000)0(00)3(100 0)DDIT3 polysomyYes0(00)1(38)0(00)2(667)No6(1000)25(962)13(1000)1(333)Data are presented as n(%)48 cases of liposarcoma were detected by DDIT3 gene break-apart rearrangement probe FISH FISH，fluorescence insitu hybridization;ALT，atypical lipomatous tumour;WDLPS，well differentiated liposarcoma;DDLPS，dedifferentiated liposarcoma;MLPS，myxoid lipo-sarcoma;PLPS，pleomorphic liposarcoma将 FISH 检测结果与形态学对比得到:(1)17 例脂肪肉瘤呈现 MLPS 样形态，其中 13 例检测到经典的 DDIT3 基因断裂信号，支持为 MLPS，其余 4 例虽未观察到 DDIT3 基因断裂，但存在 DDIT3 端粒侧信号簇状扩增，进一步检测到 MDM2 基因扩增，从分子水平上支持 DDLPS，进而排除 MLPS;(2)6 例具有 PLPS 样形态，其中 3 例检测到 DDIT3 端粒侧信号簇状扩增，同样检测到 MDM2 基因扩增，支持DDLPS，进而排除 PLPS;另外 3 例检测到 DDIT3 基因断裂探针的信号拷贝数增加(即黄色融合信号增加)，其中 1 例检测到 MDM2 基因扩增而归类于DDLPS，另 2 例未检测到 MDM2 基因扩增归类于PLPS。对照说明书上探针设计图，DDIT3(12q13)基因断裂探针的 5 端粒侧和 3 着丝粒侧探针分别标记红色和绿色信号，但实际上并未覆盖 DDIT3 基因本身，而是跨越了 DDIT3 基因所在区段，且探针 5 端粒侧红色信号覆盖了 CDK4(12q14)等基因，因此，132王微，等荧光原位杂交检测 MDM2 和 DDIT3 基因信号改变在诊断脂肪肉瘤中的价值应用 DDIT3 断裂探针时若观察到红色信号簇状扩增时，提示 CDK4 基因扩增而非 DDIT3 基因断裂。为了验证此结论，我们选取 10 例端粒侧红色信号簇状扩增的脂肪肉瘤病例，同时应用 DDIT3 基因计数探针及 CDK4 基因计数探针进行 FISH 检测，均检测到 CDK4 基因扩增(100%，10/10)，其中 2 例同时检测到 CDK4 与 DDIT3 基因扩增(20%，2/10)。3讨论3 1临床特点脂肪肉瘤组织学类型以 WDLPS 和 DDLPS 最常见，其次是 MLPS，而 PLPS 则罕见1。肿瘤发生部位以腹膜后及下肢最常见，有研究认为发生于腹膜后和 腹 腔 的 脂 肪 肉 瘤 几 乎 都 是 WDLPS 或DDLPS1，5。本组研究中组织学亚型以 DDLPS 最多见(41 9%)，其次为 WDLPS(32 3%)，PLPS 最少见(4 8%)。位于腹膜后的脂肪肉瘤共 31 例，只包括 DDLPS(23 例)和 WDLPS(8 例)，MLPS 和 PLPS均位于非腹膜后部位，与文献报道一致1，5。3 2病理学特征脂肪 肉 瘤 形 态 学 复 杂 多 样，具 有 异 质 性。WDLPS 分化较好，可伴发间质黏液样改变;DDLPS是由 WDLPS 向梭形细胞和多形性细胞的非脂肪源性肉瘤过渡形态，即去分化，间质也可出现黏液样变，不同病例在组织学上可表现为 MLPS 样或 PLPS样形态;MLPS 突出表现为黏液样基质、特征性“鸡爪样”血管、原始间叶细胞及多少不等的非多形性脂肪母细胞;PLPS 则以含多少不等的多形性脂肪母细胞为特征1。本研究中不同亚型脂肪肉瘤均可出现黏液样间质，且黏液样间质在不同亚型脂肪肉瘤间的差别具有统计学意义(P 0 05)，但黏液样间质在不同亚型脂肪肉瘤中发挥何种作用仍不清楚，有待进一步深入研究。3 3分子生物学特征脂肪 肉 瘤 分 子 遗 传 学 事 件 多 发 生 在 12q上1，6。12q13 q15 是扩增的核心区，包含 MDM2、CDK4 等多种癌基因和 DDIT3 等脂肪分化因子，其中 MDM2 和 CDK4 基 因 扩 增 是 ALT/WDLPS 和DDLPS 最常见的分子学异常，因此，FISH 检测MDM2 基因扩增对 WDLPS/DDLPS 的诊断具有重要辅助作用，尤其对于形态学不典型或标本有限的病例尤为重要1，5，8，11。本研究中所有的 ALT/WDLPS和 DDLPS 病例均检测到 MDM2 基因扩增(均为100%;20/20 及 26/26)，包括形态学表现为 MLPS样(4 例)、PLPS 样(3 例)及高级别肉瘤样(1 例)的病例，通过 FISH 检测到 MDM2 基因扩增，最终诊断为 DDLPS。DDIT3 基因在脂肪肉瘤中主要表现为断裂后与FUS 基 因 融 合，成 为 MLPS 特 征 性 基 因 改变1，7，12 14。与此认识一致，本研究中 13 例 MLPS均检测到 DDIT3 基因断裂/易位(100%)，另外4 例MLPS 样形态的病例未检测到 DDIT3 基因断裂/易位，排除 MLPS 诊断。实践工作中遇到 MLPS 诊断证据不够充分时，尤其是位于腹膜后或盆腹腔的病例，最好通过 FISH 检测 DDIT3 基因断裂/易位进行辅助诊断，以便指导临床正确处理肿瘤。本组 FISH 结果不仅观察到 MDM2 基因扩增和DDIT3 基因断裂的经典信号改变，还观察到 DDIT3断裂探针的非典型信号，即端粒侧信号簇状扩增及基因拷贝数增加。我们回顾分析 DDIT3 基因断裂探针设计原理图，发现探针端粒侧和着丝粒侧标记的片段并不涵盖 DDIT3 基因，而是跨越了 DDIT3 基因本身，且端粒侧标记的片段覆盖了 CDK4 基因，所以观察到的 DDIT3 端粒侧信号扩增高度提示 CDK4基因扩增，而非 DDIT3 基因断裂的非典型信号15。本研究中对 10 例 DDIT3 端粒侧信号扩增病例进行验证，均检测到 CDK4 基因扩增(10/10)，其中 2 例检测到 DDIT3 基因和 CDK4 基因共扩增(2/10)。这种真正 DDIT3 基因扩增病例少见，推测可能是12q13 区段基因多拷贝扩增串联形成，故与 MDM2和 CDK4 基因共扩增同时存在，但病例数太少，有待积累更多的病例进一步探讨。Mantilla 等4 的研究中，33%(16/48)的 DDLPS 病例检测到 DDIT3 端粒侧信号扩增。与其不同，本研究中 96 2%(25/26)的 DDLPS 检测到 DDIT3 端粒侧信号扩增，比例较高。形态学上，有研究认为 DDIT3 端粒侧信号扩增有助于 DDLPS 部分形态形成，以至于部分病例表现出 MLPS 样形态和/或 PLPS 样形态(即同源性脂肪母细胞分化)4，16 18。本研究未能证实这点，25 例具有 DDIT3 端粒侧信号扩增的 DDLPS 中，形态表现多样，仅 4 例表现为 MLPS 样形态，无 PLPS 样形态的病例。DDIT3 基因断裂探针的这种信号改变对应的形态学改变相关的报道目前存在争议，有待积累更多病例深入研究。本研究还提示，DDIT3 基因断裂探针的端粒侧红色信号扩增现象很常见，主要见于 DDLPS，但也可见于 WDLPS，因此，对 DDIT3 基因断裂探针检测结果的判读需要格外注意，不能误判为 DDIT3 基因非典型异常断裂信号而误诊 为MLPS，最好再通过 MDM2 基因扩增进行验证，进而提示 WDLPS/DDLPS15。与 DDIT3 基因探针的端232北京大学学报(医学版)JOUNAL OF PEKING UNIVESITY(HEALTH SCIENCES)Vol55No 2Apr 2023粒侧红色信号扩增不同，DDIT3 基因断裂探针的信号拷贝数增加，表现为黄色信号数量增加(3 个)，提示此染色体区段多体，而非某种特定基因片段扩增，通常是高度恶性肿瘤的常见现象15。与此一致，本研究中 3 例检测到 DDIT3 基因断裂探针的信号拷贝数增加，对应的形态学表现为高级别恶性肿瘤，结合肿瘤部位及进一步 MDM2 基因检测结果，1例归类于 DDLPS，另 2 例则归类为 PLPS。PLPS 作为高度恶性脂肪肉瘤，对应的遗传学改变最复杂，缺乏 MDM2 基因扩增及 DDIT3 基因断裂或端粒侧信号扩增，FISH 检测对其诊断缺乏特异性，但可以将其余形态类似的肿瘤(如 DDLPS)进行区分。脂肪肉瘤形态学具有异质性，除 PLPS 外，不同亚型具有独特的分子学改变，通过 FISH 技术观察MDM2 和 DDIT3 基因不同信号改变有助于区分各亚型脂肪肉瘤，已成为脂肪肉瘤精准诊断的重要辅助工具，但也要注意对非典型信号进行客观分析，从而做出正确判读，进而为临床正确处理肿瘤提供重要参考价值。参考文献1 WHO Classification of Tumours Editorial Board WHO classifica-tion of tumours of soft tissue and boneM5th ed Lyon，France:IAC Press，2020:34 462 Nishio J Contributions of cytogenetics and molecular cytogeneticsto the diagnosis of adipocytic tumorsJ J Biomed Biotechnol，2011，2011:5240673 Weaver J，ao P，Goldblum J，et al Can MDM2 analytical testsperformed on core needle biopsy be relied upon to 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