新药研发非临床毒理学评价.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,新药研发非临床毒理学评价,新药研发非临床毒理学评价,第1页,主要内容,定义,任务及,目标,毒性作用类别,相关,测定数据,新药临床前毒理学,新药研发非临床毒理学评价,第2页,毒理学定义,毒理学：,是研究毒性物质对机体有害作用及其发生、机制、结果以及危害原因科学。主要用于对外源性物质安全性评价和危险性评定。,早期毒理学,：研究不一样毒物使用，着重毒物对机体急性危害或致死作用,当代毒理学,：研究在特定情况下，生命有机体接触化学、生物或物理物质产生有害作用（毒性）科学。,药品毒理学：,是研究药品对生命有机体有害作用科学，用于新药临床前安全性评价、临床试验及临床合理用药。,新药研发非临床毒理学评价,第3页,任务及目标,药品毒理学任务：,包含临床毒理学、新药临床试验、药品流行病学研究任务。,药品毒理学基础目标：,认识并掌握药品毒性作用，为临床安全用药提供科学依据；,以在用药过程中防止或减轻这些有毒作用发生。,新药研发非临床毒理学评价,第4页,毒性作用类别,药品不良反应（,adverse reaction),：凡是不符适用药目标并为病人带来不适或痛苦有害反应统称为药品不良反应。,包含：副反应、后遗效应、停药反应、毒性反应、变态反应、特异质反应、致癌性、致畸性、致突变性；,新药研发非临床毒理学评价,第5页,毒性作用类别,药品不良反应,副反应,后遗效应,停药反应,毒性反应,变态反应,特异质反应,毒性作用,致癌性,致畸性,致突变性,药源性疾病,新药研发非临床毒理学评价,第6页,毒性作用类别,1,、毒性反应,(toxic reaction),在治疗剂量下不出现，仅在剂量过大、用药时 间过长或体内药品蓄积过多时才出现反应。,2,、变态反应,(allergic reaction),机体对药品不正常免疫反应，非肽类药品作为半抗原与机体蛋白结合后，经过敏化过程而发生反应。,特点：因药因人而异，与药品效应及剂量无关，用药理拮抗药解救无效。,新药研发非临床毒理学评价,第7页,毒性作用类别,3,、特异质反应（,idiosyncrasy,）,用药者有先天性遗传异常，对一些药品反应尤其敏感，出现反应性质可能与常人不一样。药理遗传异常所致。,特点：与药品固有药理作用基础一致、严重程度与剂量成百分比。,4,、致癌性（,carcinogenesis,）,属于长久用药产生毒性，包含遗传毒性致癌物、非遗传毒性致癌物。（能够是迟发效应）,新药研发非临床毒理学评价,第8页,毒性作用类别,5,、生殖毒性和发育毒性（,(reproductive and developmental toxicity,）,生殖毒性：针对育龄人群，用药后对生殖系统及与生育相关神经或内分泌系统产生毒性。,发育毒性：关注药品对胚胎影响，尤其是药品致畸毒性。,多代生殖毒性评价：包括药品对子代生殖系统影响。,新药研发非临床毒理学评价,第9页,毒性作用类别,6,、致突变与遗传毒性,(mutagenesis and genetic toxicity),药品损伤遗传物质而发生突变作用，产生对人类本身（致癌毒性）及后代影响（致畸毒性）。,新药研发非临床毒理学评价,第10页,相关测定数据,量效关系,：药品毒性效应与剂量在一定范围内成百分比，称为量效关系。,量反应,：毒性效应强弱呈连续增减量变，称为量反应。例：心率快慢等。,质反应,：毒性效应以全或无、阴性或阳性等表示，称为质反应。例：死亡与生存、惊厥与不惊厥。,新药研发非临床毒理学评价,第11页,相关测定数据,最大无毒性反应剂量,（,no observed adverse effect level,NOAEL),：指受试物在一定时间内，按一定方式与机体接触，用灵敏当代检测方法和观察指标未发觉损害作用最高剂量,最小毒性反应剂量,：出现毒性反应最小剂量,最大耐受量,（,maximal tolerance dose,，,MTD,）：不引发受试动物死亡最高剂量,新药研发非临床毒理学评价,第12页,相关测定数据,最小致死剂量,（,minimal lethal dose,，,MLD,）：引发个别受试动物出现死亡剂量,半数有效量,（,median effective dose,ED50,）：能引发,50%,动物或试验标本产生反应浓度或剂量。,半数致死量,（,median lethal dose,LD50,）：能引发,50%,动物死亡浓度或剂量。,新药研发非临床毒理学评价,第13页,相关测定数据,治疗指数,：,TI=LD50/ED50,药品试验动物,LD50,和,ED50,比值称为治疗指数（,therapeutic index,TI,），用以表示药品安全性。,安全范围,（,margin of safety,）：,ED99LD1,（或,ED95LD5,）之间距离。值越大越安全。,有效量曲线和致死量曲线斜率不一样时，以,TI,评价药品安全性并不可靠。,新药研发非临床毒理学评价,第14页,新药临床前毒理学,包括全身毒性和局部毒性研究。是为新药临床用药安全性提供试验依据，并为临床毒副反应监测提供主要信息。,新药研发非临床毒理学评价,第15页,新药临床前毒理学,目标,意义,不足,申报资料,评价程序,新药研发非临床毒理学评价,第16页,新药临床前毒理学研究目标,毒性剂量,Toxic,D,ose,安全剂量范围,S,afety margin,毒性反应,T,oxic reaction:,性质、程度、量毒关系、产生、达峰、连续时间及重复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、耐受性,寻找毒性反应靶器官,Target,O,rgan,毒性反应是否可逆,R,eversibility,解毒或解救办法,A,ntidote,确保临床用药安全,(,重点监测指标,),新药研发非临床毒理学评价,第17页,新药临床前毒理学研究意义,（,1,）经过动物试验以确立：出现毒性反应症状、程度、剂量、时间、靶器官以及损伤可逆性；安全剂量及安全范围。,（,2,）经过上述资料取得，到达预测人类临床用药可能毒性，并制订防治办法；同时推算临床研究安全参考剂量和安全范围目标。,新药研发非临床毒理学评价,第18页,新药临床前评价不足,1,、种属差异：假阳性或假阴性,2,、试验动物数量有限,3,、健康状态不一样,4,、研究方法局限,新药研发非临床毒理学评价,第19页,药理毒理研究申报资料,药理毒理研究资料综述，主要药效学试验，普通药理试验，急性毒性试验，长久毒性试验，过敏性、溶血性、刺激性等特殊安全性研究，复方制剂中多成份相互影响试验、致突变试验，生殖毒性试验，致癌试验，依赖性试验，动物药代动力学试验。,新药研发非临床毒理学评价,第20页,药品毒性临床前评价程序,1,、急性毒性试验,(acute),2,、长久毒性试验,(chronic),3,、特殊毒性试验,(,遗传、生殖、致癌,),4,、其它毒性试验,(,过敏、刺激,etc.),新药研发非临床毒理学评价,第21页,急性毒性试验,1,、说明药品毒性作用及强度、计算相对毒性参数,相对毒性参数：,治疗指数,TI=LD,50,/ED,50,越小越有效,安全系数,SF=LD,5,/ED,95,可靠或确实安全系数,CSF=LD,1,/ED,99,安全范围,SM=(LD,1,/ED,99,-1)X 100%,越大越安全,LD,5,基础无害量,ED,95,基础有效量,LD,1,必定无害量,ED,99,必定有效量,新药研发非临床毒理学评价,第22页,急性毒性试验,2,、了解毒性靶器官,3,、为长毒、特殊毒性试验剂量设计：很多试验参考,LD,50,主要药效学剂量程度、普通药理学和药动学剂量设计也要参考急性毒性,LD,50,;,短期致癌试验高剂量,=MTD,4,、为期临床试验起始剂量选择：细胞毒类抗癌药，,I,期临床起始剂量,=1/10 LD50,5,、为临床毒副反应监护提供参考：中毒症状,起始、连续、恢复时间；中毒靶器官；反抗试验为临床抢救提供依据,新药研发非临床毒理学评价,第23页,急性毒性试验,基础标准,:,执行,GLP,详细问题详细分析,随机、对照、重复,动物,:,取得尽可能多信息前提下，使用尽可能少动物,啮齿类,-,小鼠或大鼠 非啮齿类,-,犬或猴,二种动物,(,啮齿类及非啮齿类,),小鼠,18-22g;,大鼠,120-150g;,犬用成年犬,初始体重不应超出或低于平均体重,20%,各半,新药研发非临床毒理学评价,第24页,急性毒性试验,受试物,:,工艺稳定、,符合临床用质量标准,标明名称、起源、批号、含量（或规格）、保留条件及配制方法等，附质检汇报,辅料、溶剂、试剂等应标明批号、规格和生产厂家，符合试验要求,比如：,原料药,临床拟用剂型,复方制剂：复方,+,拆方,(,增毒？新毒？,),易降解：含降解产物量最高受试物进行急毒试验，并与临床样品急毒试验结果比较,新药研发非临床毒理学评价,第25页,急性毒性试验,给药路径：,临床拟用路径,+,原型药品较完全进入循环路径（如静脉注射）,啮齿类,ig,给药前应禁食,12h,，不禁水,剂量和分组,给药剂量：未见毒性量,严重毒性量,设空白和,/,或溶媒（辅料）对照,小动物,4-6,个剂量组,组距,0.65-0.85,求,LD,50,大动物可用,50%,等量递升法,(,近似致死剂量法,),求出,ALD,和,MTD,，无须到达致死量,新药研发非临床毒理学评价,第26页,急性毒性试验,给药容积,：,不等浓度等容量给药,动物,给药路径,给药量,小鼠,ig,0.2-1.0 ml/10g,iv,、,ip,、,sc,0.1-0.5 ml/10g,大鼠,ig,1.0-2.0 ml/100g,iv,、,ip,、,sc,0.5-1.0 ml/100g,静脉注射,(iv),；腹腔注射,(ip),；口服,(po),；皮下注射,(sc),；灌胃,(ig),新药研发非临床毒理学评价,第27页,急性毒性试验,观察指标及时间,药后,4h,内详观,后天天上下午各一,观察,14d,统计毒性反应、死亡情况,中毒症状、发生时间、连续时间、严重程度、恢复期及动物最短、最长死亡时间,其它指标：普通指标、体重改变等,新药研发非临床毒理学评价,第28页,急性毒性试验,急性毒性研究普通观察和指征,观,察,可能包括器官、组织、系统,.,鼻孔呼吸阻塞，呼吸频率和深度改变，体表颜色改变,CNS,，感官，神经肌肉等,.运动功效：运动频率和特点改变,CNS,，感官，神经肌肉等,.惊厥(抽搐)：随意肌显著无意识收缩或惊厥性收缩,CNS,呼吸衰竭,神经肌肉,自主神经,.,反射,感官，神经肌肉,.,眼检指征,自主神经；出血，感染,.,心血管指征,自主神经,CNS,心输出量降低等,.,唾液分泌,自主神经,.,竖毛,自主神经,.,痛觉丧失,感官，,CNS,.,肌张力,自主神经等,.,胃肠指征,自主神经，胃肠动力等,.,皮肤,刺激性，炎症，过敏等,新药研发非临床毒理学评价,第29页,急性毒性试验,结果处理：,试验资料用,Bliss,法计算,LD50,。必要时求不一样性别,LD50,剂量反应、时间反应关系,反应可能包括组织、器官或系统,肉眼病变和组织病检，初步判断毒性靶器官,病检汇报应附：病检者署名,+,单位盖章,+,病理照片,确定,NOAEL,、,MTD,、,ALD,etc,，初步判断受试物安全范围,新药研发非临床毒理学评价,第30页,急性毒性试验,综合评价,判断反应与药品作用相关性：,时间、发生率、剂量,-,反应关系,动物种属及背景数据,病理学检验结果,同类药品特点,安全范围、毒性严重程度及可恢复性,毒性作用靶器官,毒性可能包括部位,大致解剖和组织病理学检验结果,新药研发非临床毒理学评价,第31页,长久毒性试验,第一阶段,（,1,）两种品系、,35,天染毒、毒性量效曲线，推荐临床使用路径；,（,2,）器官毒性试验、死亡情况、体重改变、血液学、临床生化学、组织学检验；,（,3,）致突变活性第二阶段筛选；,（,4,）生殖毒性试验；,（,5,）受试动物药代动力学研究；,（,6,）行为试验；,（,7,）协同、增效、拮抗作用。,新药研发非临床毒理学评价,第32页,长久毒性试验,第二阶段,（,1,）动物长久毒性试验（六个月以上）；,（,2,）哺乳类动物致突变试验；,（,3,）啮齿类动物,2,年至癌试验；,（,4,）人类药代动力学试验；,（,5,）人类临床试验；,（,6,）短期和长久用药流行病学资料。,新药研发非临床毒理学评价,第33页,长久毒性试验,基础标准,执行,GLP,整体性,研究结果与其它药理毒理试验互为印证、说明和补充,详细问题详细分析,随机、对照、重复,新药研发非临床毒理学评价,第34页,长久毒性试验,动物,in vitro,体系筛选试验动物种属或品系,理想动物,对受试物生物转化与人体相近,对受试物敏感,已经有大量历史对照数据,二种动物，啮齿类首选大鼠，非啮齿类用,Beagle,犬,必要时用猴、猪等,符合等级要求,起源、品系、遗传背景清楚，有动物质量合格证,大鼠,6-9 w,，,Beagle,犬,6-12 m,体重,CV20,各半,必要时，可用疾病模型动物进行试验,Duration 6m,natural death(rat:1y-15%,1.5y-50%,2y-70-80%),新药研发非临床毒理学评价,第35页,长久毒性试验,给药路径,与临床用药路径一致,临床,iv,大鼠给药,1,月，,ip,代替,im,或,sc,应变换注射部位,必要时改变给药路径但应说明原因,分组,三个给药组,单位：,mg(ml,IU)/kg,或,/m,2,不等浓度等容量给药,低剂量组高于有效剂量，不出现毒性,中剂量组轻微或中等度毒性,高剂量组显著,/,严重毒性，或个别动物死亡,空白对照溶媒或赋形剂,溶媒或赋形剂有毒性时则增加正常对照组,阳性对照,新药研发非临床毒理学评价,第36页,长久毒性试验,测试次数,能反应动态改变,普通行为、食量天天观察统计,大鼠体重每七天一次,大动物生理指标每半月一次,大动物,ECG,导联，给药前、给药期间、停药及恢复期均要检测,发觉有阳性指标应加大观察密度,综合评价长毒结果,结合药学，药理学、,PK,、,TK,和其它毒理学研究,(+,临床研究,),，综合评价,找到：不良反应,(T&D&R),、毒性靶器官,(O),、安全范围,(S),、临床需重点检测指标,(,),及临床监护或解救办法,(A),新药研发非临床毒理学评价,第37页,特殊毒性试验,研究是否会引发畸胎、肿瘤，对遗传物质是否有损伤等；特殊毒性试验存在着种属差异性,致突变试验,(,遗传毒性试验,),生殖毒性试验,致癌试验,新药研发非临床毒理学评价,第38页,特殊毒性试验,致突变试验,微生物回复试验,(Ames,试验）,哺乳动物培养细胞基因突变试验,果蝇伴性隐性致死试验,染色体畸变试验,啮齿动物显性致死试验,精原细胞染色体畸变试验,动物微核试验,程序外,DNA,合成,(UDS),试验,SOS,显色试验,新药研发非临床毒理学评价,第39页,特殊毒性试验,生殖毒性试验,普通生殖毒性试验,致畸敏感期毒性试验,围产期毒性试验,致癌试验,短期致癌试验,哺乳动物培养细胞恶性转化试验,小鼠肺肿瘤诱发短期试验,长久致癌试验,新药研发非临床毒理学评价,第40页,特殊毒性试验,其它试验,皮肤给药毒性试验,皮肤给药急性毒性试验,皮肤给药长久毒性试验,皮肤刺激试验,皮肤过敏试验,皮肤光敏性试验,新药研发非临床毒理学评价,第41页,特殊毒性试验,腔道用药毒性试验,眼刺激试验,滴鼻剂和吸入剂急性毒性试验,滴鼻剂和吸入剂刺激试验,直肠、阴道用药急性毒性试验,直肠、阴道用药刺激试验,药品依赖性试验,身体依赖性试验,自然戒断试验,替换试验,催促试验,诱导试验,精神依赖性试验,新药研发非临床毒理学评价,第42页,特殊毒性试验,过敏性试验,皮肤过敏试验,豚鼠：,GPMT(Guinea Pig Maximization Test,用佐剂,),BT(Buehler Test),小鼠：,MEST,（,Mouse ear swelling test,）,LLNA,（,Local lymph node assay,）,注射给药过敏试验,全身主动过敏试验,(active systemic anaphylaxis ASA,豚鼠,),被动皮肤过敏试验,(passive cutaneous anaphylaxis PCA,大鼠,),新药研发非临床毒理学评价,第43页,特殊毒性试验,溶血性试验,制备,2%,红细胞悬液,(,兔,/,羊,/,犬,/,人,),加入不一样量临床浓度受试物，温育,1h,观察有没有溶血或凝集反应,区分判别真凝聚或假凝聚,受试物管,3h,内无溶血和凝聚，为合格,依赖性试验,身体依赖性试验,自然戒断试验,替换试验,催促试验,诱导试验,精神依赖性试验,本身给药试验,条件性位置偏爱试验,水迷宫试验,新药研发非临床毒理学评价,第44页,