四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系.pdf

第?卷?第?期年?月水生生物 学 报?卜?!?!?,?四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系?曹俊明林鼎薛华刘永坚关国强田丽霞毛永庆?中山大学鱼类研究室,广州?摘要采用?种添加不 同水平的蛋氨酸?、胆碱?、甜菜 碱?和大豆卵磷脂?仕?的饲料饲养初始体重约?的草鱼,研究了它们 降低草鱼肝胰脏脂质积累的相互替代关系。?一种饲料 中这四种 物质的含量分别 为?陇?,?旅?坎?权?找?,?仁?气?气?此?,?玫?和?”?玫?。?后测定草鱼的相对生长率、饲料转化率和蛋白质效率,分 析肝 胰脏的脂质含量、组成和脂肪酸构成,测定血清脂蛋 白和脂质含量以及全鱼和肌肉的营养成份组成。实验 结果表明,?与摄食含?蛋氨酸和?胆碱饲料的第?组草鱼相比,第?组一第?组这?组草鱼的相对生长率升高?一?,并且第?组显著高于第?组。?草鱼 肝胰 脏的脂质含量以第?组最高,增加蛋氨酸含量和添加胆碱、甜菜碱或大豆卵磷脂使肝胰脏脂质含量下降?一?。在摄食蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和大豆卵磷脂组合不同的一些饲料 组草鱼之间,肝胰脏脂 质含量存在显著差异,表现 出四种物质间存在相 互加强和替代关系。?试验草鱼肝胰脏总脂 中甘油三酷的百分比与总脂含量之间存在显著的正相关关系?相关系数?住?,血清脂质水平随肝胰脏脂质含量的降低而升高?一?,?,血清前?一脂 蛋 白和?一脂蛋白相对含量之 和与肝胰 脏脂质含量呈相反 的变化趋势?一?!?,?,这表明蛋氨酸、胆碱和大豆卵磷脂对草鱼肝胰 脏脂质积累的降低作用可能主要是通过提 高肝脏 中甘油三醋 向肝外组织的转运实现的,而后者又依赖于相 应血清脂蛋 白生物合成的增加。关健词蛋氨酸,胆碱,甜菜碱,大豆卵磷脂,肝脏脂质,草鱼蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和卵磷脂是 哺乳动物的“抗脂肪 肝”因子,补 充 这些物质有利于脂蛋白转运 出肝脏脂肪。在水产动物,胆碱缺乏可导致虹缚、大鳞大 马哈 鱼、斑点叉 尾如、鲤鱼、日本鳗 鲡、红 海鲡、湖鳍、白鳃和草 鱼等鱼类出现 生 长不 良、肝脏脂 质积 累增加甚 至?国家 自然科学基金资助项目?本文承赎中国科学院水生生物研究所崔奕波研究员审阅,谨致谢意?闭?司?收到?一?修回?期曹俊明等?四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系?出现“脂肪肝”等 营养缺乏症?一?,而 甜 菜碱在 虹缚可以提 供 胆碱需 要量 的?,蛋氨酸在斑点叉 尾如对胆碱具有 节 约作用?,向草 鱼 饲 料 中添加一定量 的蛋 氨 酸可以明显 降低肝胰脏的 脂质积累”。卵磷脂参与肝脏中甘 油三 醋 向肝 外 的转运?,对水产动 物具有促 进生 长、提 高饲 料转化率、促进脂质 吸 收和转运等营 养功 能?。近 年来,对草 鱼“营养性 脂 肪肝”的病理 发 生进行了研究?,观察了饲 料 中添加蛋 氨 酸和氯化 胆碱等对草鱼肝胰脏脂 质积累 的影响?,但有 关这些物质在这方面的相互影响和替代关系 尚缺乏系 统研究。为 此,本实验观察了蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和大豆 卵磷脂在降低草鱼肝胰脏 脂质 积累 的相 互替代关 系 并初步探讨了作用机理,以便为 防治草鱼“营养性 脂肪 肝”提供有 关 理论依据和实 用饲料。材料与方法?试验鱼和 饲料试验草 鱼?脚?由本 实验 室 鱼场提供,平 均体重 为?士?饲养试 验 在 室 内循环流水过 滤 水 族 箱 中进 行?,每种饲料设?个平 行,每个平行放鱼?尾。水源为经曝气去氯后 的自来水,水温 平均 为?士?,水中溶氧大于?,?值为?士?,氨氮为?。每天光照 时 间为?。按鱼体重 的?确定 投饲 量,每天上 午?和 下午?分?次投喂,按日增重?测算总体重,每?调整一次投饲量,试验期为?采用酪蛋白、糊精、玉 米油、鱼肝 油、无机盐混合物和 维生素混合物等配成基 础饲 料,然后 添加不 同水平的蛋 氨 酸、胆碱、甜菜碱和 大豆 卵磷脂 配制?种 试验饲 料。本实验 结果表明,饲料中添加?蛋氨酸使草鱼肝脏脂质含量降低最明显”,由于 基础 饲料中蛋氨酸表?基础饲料的组成?!?成份?飞?!?含量?成份?吧?山?含量?酪蛋白?鱼肝油Rsh l iver 0111.5明胶 曰e t in3.0复合无机盐杨n.m ix,.8刀糊精氏xt nn40刀复合维生素v i:而x.bl,5a一淀粉a一StaI Ch3刃纤 维素C el l u lose10.0玉米油Cor n0111.5维生素C V itC0.5粗蛋白Cr udeprot ein33.5蛋氨酸旅面。川n eo 名9粗脂肪Cr udef at27 7胆碱Chol ineo刃8水分Mo一st ur eg名2“肠nm ix.(%):磷酸二氢钙122 9,乳酸钙4 74 2,磷酸二氢钠4.加,抓化钠32 3,硫酸钾16.3 8,氯化钾6.5 8,硫酸亚铁1.07,柠檬酸铁3 83,硫酸镁44 2,硫酸锌04 7,硫酸锰0刀33,硫 酸铜0刀22,氛化钻0.043,碘化钾0刀2 2bV itm ixt(%):氯化胆碱5,55,肌醇22 2,VitC1.11,泛 酸钙0名3,VitBI022,VitB20石6,vitB60刀6,v一tKO06,叶酸0刀2,VitB120刀 12,生物素0刀0 6,醋酸a一生育酚0,44,纤维素88名71)薛华.草鱼鱼种阶段对蛋氨酸需要量研究.硕士研究生论文,199 5,中山大学2)王玮.草鱼鱼种营养性脂肪肝发生及控制 的研究.硕士研究生论文,199 3,中山大学水生生物学报2 3卷含量为0.8 9%,因此设计最低添加量 为0.2%。基 础饲 料 的组 成和1 1种试 验饲料 中四种物质的含量分别见表1和表2。表2试验饲料 中蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和大豆卵磷脂的含t(%)TabZ以et a r ylevelofMe面on ine(Met),ehol ine(Ch),b e油ne(Bet)a ndsoyb eanlec,面n(比e)I n exp er iment a ld iet s(%w t)饲料号公etNO.添加水平supplementar ylevel蛋氨酸 Met胆碱Ch甜菜碱Bet卵磷脂L ee00.080.100.12饲料中的总水平Tot a llevelof d iet1.IMet0.0 8C h1.1入 let0 3 3 C】11.3Met0 2 3 C】11.SMet0.1 3 C h1 3Met0.1 3C h1.3Met0.1 3(110 乃S Bet1.3Met0.1 3 C h0.10 Bet1.3Met0.13 C h0.12 Bet1.3Met0.13 C ll4刀比e1.3Met0.13Ch 6刀比e13Met0.13Ch 8.0玫en UO日络U O 八凡气 1气一、气曰气、J r l0之1 刀刀乃刀刀刀刀刃nUU八Un曰nno八U n U 八U,一464 4 44 4刀咔4.八曰onno八“n U C U 八1 1n Unl23456789l 0l lLZ样品采集和分析试验结束时,称量每箱 鱼 的总体重,随机从每箱中取 鱼l尾 制备全鱼样品,另取1尾用MS一2 22麻醉解 剖,静脉窦采 血,室温 下 放置 约2 h,离心(IO00 0r/而nx巧而n)分 离血清。再从每箱中取1尾 鱼,取 出内脏,剥离肝胰脏样品,并去鳞制备两侧背肌样品。采用琼脂糖凝胶电泳 分析血清脂 蛋 白组 成;分别采用10 5烘 干法、凯氏定 氮法和乙醚抽法测 定 全鱼和肌 肉的水分、粗蛋 白和 粗脂 肪 含量;采 用 甲缩醛一甲醇混合液提取 肝胰脏脂质;用硫磷酸香草醛法 测定血清总脂;采用分溶抽提一乙酞丙酮显色法 和乙醇抽提、高铁一醋酸一硫酸显色法分别测 定样 品的甘 油 三醋和总胆 固醇 含量,并通过总脂计算磷脂等成份 的含量;采用 甲醇钠直接酩化法l 9 制备脂肪 酸 甲醋混合物并加人 十七酸 甲醋作为内标物进行气相 色谱分析。色谱分 析 条件为:色谱仪,H P589O;记 录仪,H P3392A积分 仪;色谱柱,5%苯甲基硅 酮 毛细管柱帅0.Zm mx2 5m);检 测器,氢 火焰离子 检测 器(HD);温度参数,柱 温18 0一26 0程序 升 温(5/而n),HD温 度28 0,进样口温度28 0;载气,高纯氮(4 0耐/而n);燃气,高纯氢。L3试验结果的统计分析实验结果 用 平 均数士标 准 差表示。采用Lhmca nS多重比较 法 分析 平 均数 的差异 显著性,在每个平均数的右上方标上 小 写英文 字 母,凡具有不同英文字母 的 即 为差 异 显著(P0.05)。2结果2.1试验草鱼的生长率、饲料转化率和蛋白质效率从表3可以看 出,草 鱼 的相对生长率以含1.1%蛋氨酸和0.0 8%胆碱的第1组为最低,期曹俊明等:四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰 脏脂 质积 累的替代关系1 0 5添加胆碱、甜菜碱和大 豆 卵磷脂后,草鱼 的相对生 长率升高1 7一7 3%,但由于 一些组 的标准 差 较 大,因此仅在第1 0组(11 3.9%)和第1组(“.0%)之间的 差异 达 到显著 水平(p0.0 5)。在饲料中添加不 同水平 蛋氨酸和胆 碱 的3组草鱼(第2、第3和第4组)之间的相对生 长率逐渐升高,但相 互 间没 有 显著差 异。第5组一第1 1组 饲 料具有 同 样的蛋 氨 酸(1.3%)和胆碱(0.1 3%)水平,但甜菜碱或大 豆卵麟脂 的添 加量不同。与第5组草 鱼 的相对生 长率比较发现,在摄食添加有甜菜碱饲料的3组草鱼 中,第6组草鱼 的数值基本接近,后2组有所升高,但差 异 不显著;在摄食添加大豆 卵磷脂的3组草鱼 中,每组 的 升幅 较高(最高为48%),但与第5组 间的差 异也未 达到 显著水平。1 1组草鱼 的饲料转化率和蛋 白质效率均 较接 近,相互 间没有 显著 差 异。表3试验鱼52 d 的相对生长率、饲料转化率和蛋白质效率*Ta b.3砒lat ivegr o wt hr at e(RG R),f eedcon ver sion(1)a ndPr ot einef f ic,e n cyr at io(PER)ofgr a sse ar p组别相对生 长率饲料转化率蛋白质效率众叨p N O.o ff i shRG域%)R义%)P E R1 1.1欣to.08C h66刃士2一b39.2士7.1“1.16士0.17.2l.IMeto.33C h8 4.8士1 1.4曲4 2.5士6 3a1.2 5土0.13a31.3旅to23C h89.0士14.8曲4 3 3土7.2a1 2 6士o.14a4l.SM et0.13C h9 7.0士2一曲4 5.6士1.1.1 3 3士。刀351.3硫to.13C h77刃士1.3比3 9一士13a1.15土。刀261.3旅to.13C ho刀s Bet7 8.5土6乡曲3 9 7士4,Za114士0.1 1.7l.3Meto.1 3C ho.10 Bet8 6石士10夕曲4 3石士l.4a1 2 6士0刀6,8l.3M eto.13C ho.12Bet894士5俨43名士7石a1.27士0.14,9l.3M eto.13C h4.0此e572士2 1.6曲4 3.6士3 2a1 2 6士。刀91 0l.3Met0.13!h6 刀玫e113.9士1.1.52,6士5.7alt5 4士0.10a1 1l.3M et0.13C hs乃此c98名士2 3俨47石士2.1.1 4 0士0.0 7a*表中同一栏 内,右上角标有不同英文字母的数据之间的差异具有显著性(P 住05)。2.2草鱼肝胰脏的脂质含t和组成表4的数值表明,草鱼肝胰脏的脂质含量以第1组为最高,其余1 0组草鱼 的肝胰脏脂质含量 下降 2 6一7 4%,组 间差 异显 著。第2组一第4组 草鱼 的肝胰脏脂质 含量 差异不显著,但均分别与第1组 有 显著差异。第5种饲料 的蛋 氨 酸水平比第1种高1 8%(1.3%对1.1%)并含 有0.1 3%胆碱,摄食该 饲料 草鱼 的肝胰脏脂 质含 量 较第1组下降约2 6%。当以第5组饲料的蛋氨 酸和胆 碱 含量 为基础,向饲料 中添 加不同水平的甜 菜碱 时,相应 组(第6、第7、第8组)草鱼肝胰脏脂质含 量比第5组下降1 1一2 3%,但4组之 间差 异不显著;当向饲料中添加不 同水平 的大豆卵磷脂(第9组一第1 1组),肝胰脏脂质含 量大 幅度降低,比第5组下降 5 7一6 5%,具有显著差异。当以肝胰脏总脂含量作为基 础计算甘 油 三醋、胆 固醇和磷脂的相对百分含量 时,可以发现,甘 油 三醋 的百分比在各组 间有一定差 异,但由于一 些组 的标准差较 大,因此 没有 达到显著水平,然而1 1组草鱼肝胰脏总脂水平 与甘油 三 醋含 量之间存在显著的正相关 关系(相 关 系数r=0.8 55 4,p0.01)。胆 固醇的百分含 量在 一些 组 间存在显著差异,与肝 胰脏总脂之 间存在极显著 的负相 关关 系(r=一0.9 13 4,p0.01)。磷脂占总脂 的百分比在1 1水生生物学报23 卷106水生生物字狠名j仓组间没有显著差 异,但与总脂水平呈显著 的负相 关关系(r=一0.726 3,p0.05)。表4试验草鱼肝脏的脂 质含t及组成*Tab碑L ip idco nt enra ndeomP osit io nof gr a ss c抑hepat opa ncr ea s组别脂质组成LlpldCom因slt ion(%oftot a ll i p,ds)G r。叩N o.o ff is h肝脏脂质 含量Liverl i P一de o nt enr(%wetwt)甘油三酷Tngl yeer i des磷脂P hosPhollPzds1 l.IMeto.08C h2 l.IMeto.33C h3 l.3Meto一23!h4l.SMeto.13 C h5l.3Meto l3 C h6l.3Meto.13 C llo.0 8 Bet7l.3Meto l3 C llo.10 Bet8l.3Meto.13 C llo.12 Bet9l.3Meto.13 C ll4.O Lee1 01 3Met0.13 C h6.O Lec1 1l.3Met0.13 C h8.0 1e9 48士l.6 5a3.2 6士1.6 9d4乡2士1.2 6be d4 46士一18b己7刀4士0.59曲5.3 9土0.4 6bc d6.2 7士0.3 5吮5 45土0 4 3b已2乡4士0.1 gd2.4 4士03 0d3 0 6土。一6e d7 0.8士2 0,259.2士1 7.66 1.0士12.86 2.0士1 5.06 6刀士5.6a6 00士10.36 1.0士1.7.6 0刀士12名55,8士3.1.4 6.8士6乃a4 5 7土14.9总胆 固醇C holest er ol44士0了11.1士l,sa6.2士0 4bC8.2士。.4曲6.1士0.5b6乡士0 2b64土0.sb c6月士0.6伙1 1.1土0.9a1 3.0土0 9.1 1.2土0.8.2 4名士7.3a2 9.7士14.2a3 2名士6夕82 9.8士53a2 7.9士8.8a3 3.1士13.6a3 2.6土13983 3.1士1 5.sa3 3.1士18.1.4 0 2土17 7a4 3.1土1 1.3,2.3表中同一栏内,右上角标有不同英文字母的数据之间具有显著性差异(P O.05).草鱼血清脂质含t和脂蛋白组成从表5可见,1 1组草鱼 血清 的脂 质含 量以第1组 为最低,其余1 0组 的数值有所 升高,但差 异 未达 到 显著水平。比较1 1组 草鱼 肝胰脏的脂 质水平与血清脂质 含量 之 间的关系,得到 相 关系数r=一0.7 80 4,负相 关关 系显著。1 1组 试验草 鱼血清的前p和p一脂蛋 白二者之和 占总脂蛋 白的百分比 比较接近,差异不显著,但与肝胰脏总脂 水平之 间存在 显著的负表5试验草鱼肝胶脏和血清的脂质含 t以及脂蛋 白组成*T ab.5H ePatoPa ner e a sa nd组别ser u ml i pi deont entands er u z nl ip opr ot ein eomp onent sof gr a ss car p肝脏脂质含量L一 v e rliPlde o nt ent(%wetwt)血清总脂前p+p一脂蛋 白6rouP No.of f lshSer t i ml iP ideont ent(m g八 Oom l)阮一p+p一11因pr ot ein s(%oftot a lllp oPr ot el ns)1 l.IMeto.08C h2 l.IMet03 3C h3 l.3Met02 3C h4 1SMet0.13Cll5l.3Meto.13Ch6l.3Meto.13Cllo.08Bet713MetO.13Cho.10Bet813Meto.13(110.12Bet9l.3Meto.13Ch4.0玩e10 l.3Met0.13Ch 6 0玫e11 13Met0.13Ch 8.0伙c94 8士1.6 5.3 26士1 6 9e d4.9 2士 12 6b cd4 46士l.18b cd7.0 4土0.59汕53 9士0.4 6网6 2 7士0 3 5b C5.4 5士0 4 3bcd2月4士0.1gd2冲4土0 3 0d3 0 6士0.16比9 8 8 22士12 57 7.1 12 7名8士12 0 35a10 4 9.5 9士18 1.3 3a10 9 7 34士9 1.7 7a1 17 7.0 7士8 3.9 6a1 16 6 21士9 17 111 88.42士7 6.6 8a1 2 70.6 3士2 30.4 8a1 2 50.5 3土3 64刀oa1 39 0.10士4 1.8 4a1 3 7 1.9 8士1 2 0.6 8a1 3.9 7士2 43.1 5 3 9士3.1 1“巧.52士l.1 9B14.2 1士3.8 6a14.2 6士2.6 2a14.7 6士3.5 58巧52土2 31“15.27士3.6 7a1 6,67士1.2 3a1 7.19士5.4 0818.5 6士3.12a,表中同一栏内,右上角标有不同英文字母的数据之间具有显 著性差异(P O刀5).期曹俊明等:四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系107相 关关 系(r=一0.6 9 5 7,p0.05)。2.4草鱼肝胰脏脂质的脂肪酸组成在本试验测定条件下,1 1组草鱼 的肝 胰脏总脂含 有 1 2 种 主要 脂肪 酸,其中饱和脂肪酸(sa tur at ed f at t ya ci d,sF A:14:0,16:0,18:0)的相对含量 在添加大豆 卵磷脂 的3组草 鱼(第9、第1 0和第1 1组)为最高,但所有1 1组之 间均没有显 著差 异。与此相反,单不饱和脂 肪酸(Monou nsat u r at ed f at t ya cid,MUFA:16:In一7,15:In一9,20:In一9)的相对含 量在 添加大豆卵磷脂的3组草鱼比第l组分别下降2 8%、40%和4 3%,且差 异达 到显著水平;其余各组 中除第5组外,均 与第1组的差 异不 显著.在 MU EA中,油 酸(18:In-9)的含量 最丰富,其变化趋势与总MU EA基本一致,其中在添 加大豆 卵磷脂 的3组草 鱼比第1组下降2 3一4 0%。多不饱和脂肪 酸(P olyu nsat u r at ed f at t ya cid,ptJ FA:18:Zn一6,18:3n一3,20:4n一6,20:sn一3,2 2:5二3,2 2:6n-3)的相对含量占总脂肪酸 克分子数 的巧一33%,其变化 趋势与 MUFA相反,即在添加大豆 卵磷脂的3组草鱼,PIJFA比第l组分别升高 6 2%、8 3%和9 3%,差 异显著.除第5组外,其余各组 的PL正A与第1组相接近,且各组间的变 化规律不 明显。表6试验草鱼肝胰脏脂质的脂肪酸构成(%m o l).Ta b.6F a t t ya cideomp osit ion ofh e娜t o Pa ncr e a sl i Pid singr a ss ear p(%mol)脂肪酸组别(汁。叩N o.o fgr a ss ca r p凡t tya cid1234567891011饱和脂肪酸s队(l)14:032.3刀.32.2 9.24.34.3刀.3 2.2 刀bl.4bl 6b16:02 l.4.2 l.l.2 l.2.2 l.6.2 2.l.2 2.4a2 2.l.2 2.l.2 3 2a2 3 2a2 3石a18:03.8b45b3名b3名b4.8b4.lb4 3b4 4b6,6曲7 7as刀.单不饱和脂肪 酸 MuF A(2)16:In一71 3.9,一 2.6tl 3 3.一 4 6.10乡心1 4万,13乃.13 石.7 7七6 3bs碑b一 8:1l le sg3 8.4 0 3t4 0 5,373.3 0巧3 8,35 3t374,293七2 4.Ib2 3刀b2 0:1n-90 8.0乡ao 名.0刀.0 4.0 4.0 9.0 7,0乡.1 0.l.oa多 不饱和脂肪酸P U FA(”1 5:Zn币24七24b2乡b2.9b3.2七2 2b3,l七3 3b7,l,62,5.620:4n e s64名七4刀b5.2b4 3bs 万曲3巧b6 万七5 4bs.ga七1 1.7,116,20:sn一3一6b1.6bl.4bl.6b一70l.Zbl.4b一4b2名22曲2石助2 2:5犷31 51.4一20133.lbl.7231.534b4,54名b22:6n-31.6cl.scl.6cl,9c4刀曲l.scZ刀c1.23乃b4 4a4 石a总饱和酸习S FA28,4.28.6.282.283.293.29名.2 9 3.2 9,7a31,8.323.33.lt总单不饱和酸名MU F A52.5.53.5,54.6.526,41.5七5 3.549.75一737名b3 一602 9,总多不饱和酸习P U FA一 7 315石。1 5.701 640247b1 3.601 8,。1 6一c2 5.1比3 1.6,334*表中同一栏内,右上角标有不同英文 字母 的数据之间具有显著性差异(P 0.05).(1)SF A,s atur at edf at t乡a cid s;(2)MLJF A,mon ou n satur at edf at t ya cid s;(3)PUF A,p ol yu n satur at edf att ya ci ds.3讨论3.1蛋氮酸、胆碱、甜菜碱和卵磷脂对草鱼生长性能的影响蛋氨酸对鱼类生 长 的影 响已经在虹缚等一 些鱼类得以研究证 实。一 7,发现饲料 中添水生生物学报2 3卷加 蛋氨酸特别是强化蛋氨酸可以提高 生 长和饲料 利用。胆 碱对许多 鱼类 有 明显的促生长效应,而 甜菜碱则 被 认为 在某 些鱼 类可以部 分替 代 胆碱 发挥 作用。本 实 验以1.1%蛋氨酸作 为 饲料 的基础含 量,按 一定 梯度添加不同水平 的胆碱、甜菜碱和大豆卵磷 脂配 成 同时含多种因子 的饲料,结 果 草鱼 的相对生 长率虽有一定程 度的升 高,但仅在 添加6%大豆磷 脂的实 验组 出现显著差 异。进 一步比较分 析可以发现,第l种 饲料和第2种饲 料含有相同水平的蛋氨酸(1.1%),但2组 的胆碱含量不同(0.0 8%对0.3 3%),结果摄食后 一种饲料组草鱼的相对生 长率较前者 升 高约 2 8%,说明向饲料 中添加 胆碱对草鱼有 较强的促生长作 用,这与王道尊等在草鱼 的报道 相一致。第2、第3和第4种 饲料 组 中 的蛋氨酸从1.1%升高到1.5%,而 胆碱的添加量 则从0.3 3%下降到0.1 3%,结果发现,虽然摄 食相 应 饲料 的3组草鱼之 间相对生长率差 异不显 著但呈逐渐 升高的趋 势,似乎 表现出蛋 氨酸比胆碱对草 鱼具有 更强 的促生 长作用。在1.3%蛋氨 酸和0.1 3%胆碱基础 上再添加一 定量 的 甜菜 碱,草 鱼的相对生长率 有一 定程 度升 高,但 升幅很 小,差异不显著。如果以大豆磷脂 取代 甜菜碱,则 草鱼的相对生 长率升幅 较大,其中6%卵磷脂 组与第1组相比有 显著差异。因此,上述 结果 表明,蛋 氨酸、胆碱、甜菜碱和卵磷 脂对促进 草鱼 生 长似 乎存在 一定的替代关系,但相互 协同作用表现不甚 明显。3.2蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和卵磷脂降低草鱼肝胰脏脂质积累的相互替代关系蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和卵磷脂是代谢间联 系非 常密切 的四种 物 质,蛋 氨酸和胆碱之间在 某 些鱼类可以互 相转化,通过 不 同 的代谢途 径合成 卵磷脂,而 卵磷脂又是脂 蛋 白的 主要组 成成份,甜 菜碱则可参与胆碱的中 间代谢,它们 均具有降低鱼 类肝脏脂质 积 累 的作用。如 在 草鱼,向饲 料 中添 加0.6 5%蛋氨酸可使肝 脏脂 质含 量降 低 约3 0%”。在日本鳗鲡和真绸、鲤鱼 18等鱼类,当饲料 中缺乏胆 碱 时,会诱发脂 肪肝病 变。由于 这四种物质均与鱼类肝脏脂质代谢具有密 切关系,因此 研究它们之间的相互 替代关系,对于防治鱼类“营养性 脂肪肝”有重要 的理论意 义和实际价值。本实验室在对草鱼蛋氨酸营养需要 量 的研究中曾发现,饲料 中蛋氨酸水平为1.1%时肝脏脂质含量最低。由于本实验 的基 础饲料中蛋氨酸含量为0.8 9%,因此以0.2%蛋 氨酸作为饲料的基础添加水平。实验结果表明,与摄食含1.1%蛋氨酸和0.0 8%胆碱饲料的草鱼(第1组)相比,其余1 0组草 鱼 肝胰 脏 的脂 质含 量有 较 大 幅度 的下降,一些组间的 差 异显著。当增加蛋氨酸 添加 量而降低胆碱 添加量 时(第2、第3和第4组),草鱼肝 胰脏脂 质含量在第2组(1.1%蛋 氨酸+0.3 3%胆 碱)最低,但与另外2组没有 显著差异,表明在降低草 鱼肝脏脂质 含量 方面,蛋 氨酸 能 部分 替代 胆 碱,但其作用比胆 碱低,这与RLl l llse y囚在 虹蹲 得到 的结果 相 一致。当在 含1.3%蛋氨酸和0.1 3%胆碱 的饲料 中添 加不同水平的甜菜碱 时,草鱼肝胰脏脂质 含量 平 均下降约2 0%,其结果与摄食含1.3%蛋 氨酸 和0.2 3%胆碱饲 料 的草鱼 相 接近,说明甜菜碱亦能替代部分胆碱起到降低 草鱼肝脏脂质积累 的作 用,这同于甜菜碱在虹鳍的作用 5。当向饲料中添加一定 量 的大豆卵磷脂 时,草鱼肝脏的脂质含 量大 幅度降低,与第1组(1.1%蛋氨酸)和第5组(1.3%蛋氨酸+0.1 3%胆碱)相比均具有 显 著差异,但与第2组(1.1%蛋氨 酸和 0.3 3%胆碱)的结果比较 接近。这说明,大豆 卵磷脂降低草鱼 肝胰脏脂质 的作用最强,但这 种作用也可以基 本 被能满足草 鱼正 常需 要量(0.3%)川的胆碱所替代,胆碱和 卵磷脂 在“抗脂肪 肝”方面最有应用前景。期曹俊明等:四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系1 3蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和卵磷脂对草鱼肝胰脏脂质脂肪酸构成的影响M o sc on i一Ba c”曾报道,当人工颗粒饲料引起幼 龄 海 妒(D l“nt ra r动u:la br a x)肝 功能障碍、肝内脂肪积累 增 加、出现脂肪滴逐渐 增 大 时,肝 内积累 大量油酸(18:In一9)。比较 本实验1 1种 不 同饲料组草鱼肝 脏胰脂 质脂 肪酸 的组 成 时发现,油酸和棕 搁油酸(16:In-7)的含量 在 添加 大豆 卵磷脂的3组最 低,在其它8组 草鱼,除第5组较 低外,各组 间的差 异不 显著,规律性 变化不强,这不完全同于 M o sc on i一Ba c的报道,可能 与试验 饲料 组成 和试 验 时间等因素有 关。另外,在本实验条件下,向饲 料 中添 加大 豆 卵磷脂可使草 鱼肝 胰脏脂 质多不饱和脂肪酸含 量大 幅度升高,其中n-3系 列高度不 饱和脂肪 酸含 量 的升高对于通过饲料途径改 变鱼类体脂脂肪 酸组 成、提高鱼类的营养价值将是 有益 的探索。关于大豆 卵磷 脂在这方 面 的作用机 理 尚不清楚,可能与其能提供和保护 多不饱和脂肪 酸有关 2 0,对此 有待深人探讨。3.4蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和卵磷脂降低草鱼肝脏脂质积累的作用机理初探据认 为,象在 哺乳动 物 一 样,大 多数鱼类肝脏中的 甘油三 醋通过 极低密 度 脂 蛋 白(VLDL,相当于 电泳 法 的 前p一脂蛋 白)形式 向肝 外 组织 转 运,其中卵 磷脂 是v LDL的重要组成成份I 6。王道尊等I 4 在 草鱼 发现,饲料 中缺乏 胆碱时,草鱼 肝脏脂 质 积累 增加,而血浆总脂、甘 油三 醋和磷脂 含量降低.L in eta l 8 曾报道,“脂肪肝”草鱼 肝脏的脂质含量 与血清甘油 三酷含量 呈反相 变化趋势。本实验 结果 亦表明,草鱼 肝脏脂质 中甘油 三酷 所 占的相对比值随总质含 量 的降低而降低,存在正相 关关 系,而血清总脂 含 量则 与肝 脏总脂含 量之间存在显著 的 负相关关系。这 些结 果说明,草鱼 肝脏脂质含 量 的升高与肝脏中脂 质 向血 液 中的转运有 关。为此,本实 验分析了各组 草鱼 血清 的脂 蛋 白相对含量,考虑到 前p一脂 蛋 白和p一脂蛋 白的功 能特 点和代谢关系,特别是 基于在草鱼 这二 种脂蛋 白电泳分析时 的分离情 况,作 者将 前p一脂 蛋 白和p一脂蛋 白一起 分 析。结 果这 二种 脂蛋 白在 总脂 蛋 白 中的百 分比与肝脏脂质含 量呈显著的负相 关关系,其中在添 加大 豆卵磷脂 的三组 草鱼肝脏脂 质含量 最低,但前p一脂蛋 白十p一脂蛋白的相对含 量最高,说明 卵磷脂和胆碱等对草鱼 肝脏脂质 积累 的降低作用是通过它们直 接或 间接参与血清脂 蛋 白的生 物合成 而实 现的。参考文献肠1 1,k inMRQu al itatl v ea ndqua nt it at iv en utr ie ntr eq山r e me nt soff ish:ar ev,ew.F sh.B ull19 8 2,80655一686Wi lson民Po cW.C hol一 n en ut r it io noff inge rlingcha l lllele at f ish19 8 8,Hung50.匆ua,1 989Chol一 n er equir eme ntofhat Che卿一Pr对u cedju v e n lle匆uae,w比t estllrgeo n6 8:6 5一71(Acl Pensert ransm,nl ar Z“s)7 8:1 8 3一19467【8王道尊、赵亮、谭玉钧.草鱼鱼种对胆碱需要量的研究.水产学 报,199 5,1 9:13 3一13 9Runl sey GL.C holl ne一b et a jn er eq山r e me n朽of仙nb owt r out(Oncor协,nchus。,幼s).Aquq、。1 991,95:107一116Sher idanMA.LIPi d dyna mies rnf ish:a sp eet sofabsor pt ion,tr ansp or t at ion,dep os一t io na ndmob i lzz at io nC O尹彬,.Bioehem.月引,5101.,1988,90B:679一690王渊源、刘佳 英、孙微涛.鱼虾需要的脂肪酸、胆固醇和磷 脂.水产学报,199 1,1 5:177一18 4Ll nD,MaoY气,Ca iF-S.Nutnt iona lllPldllverdls ea seofgr a ssea甲Ct eno pha朴,ngod onid ellus(C.etV.C hin.JOceanol.口m nol,1 990,8:363一374 -l,、月片气r.L一.L r,L l胜.Lr.L水生生物学报2 3卷9伽ydouE,R旧soa J 忿ho n aJ,Bia n ch in iJP.Am ier omet ho df ort h eest imat ionofo一1e o nt enta ndf a铆a cdeo mp osit io nins e edswi t hsp eei a lr ef er en cet oeyeloPr op en o 一 ea ci ds.J及1.F ood奄rie,1 983,3 4:1130一113610称i川t zGL,Or meLE,L er n mCA,比t zol F N.F u ll一f ats oyb ea nmea l,n仙nbow t routdl et s.F eed efd f s,1978,50:23一2411 儿mKJ,众yesT B.R eq山r e me nt sf or su lf ura n un oa cldsa ndut i llz at io nofD-me面or uneby佃nbowt r out(Oncor勺nd us柳肠s).构uae,1 992,101:95一10312MT,eta l.SuPPlement a t ionofme面on in eto soy f lourd iet sf orf inger i,ngea r P.沟uae1989,77:373一38513WO J da民ost a szewskaT.卫le ef f eetof d if f er entlevels of lysine andmet h jor une In伴l let edf eedstu f fo nUler esu lt sin ear pPr浏uet ion.N ut r.肋sr.伦v.(及ries句,1993,63:155114T hebau】tHP l a s mae ssent i a la min oa cideha nge sins eabas safte rf eed ingd iet sd e f f iele nta ndsup plement edinL-n let h iomn e.C o即.刀衣,ehem.刀Usiol,1 985,82A:233一23715拓d川90F,A lliotE,丁 heb au ltHMet h ion in ea ndeyst in esup p leme nt edd iet sf orJu v en i lese ab a ss(D ie ent ra ehu s山brax).肉uae,1 987,6 4:209一21716E卜L饱h ha rAA,EL-Sha Zl yKEff eetofessent ia la n unoa ci d(Met h ion in ea ndl ysine)a nd011,nf lshd ieto ngr owt hp er f or ma n cea ndf eedut il iz at io nof两let ila P ia万l a Pia nit o t ica.N u介.肋st s.,1994,6 4:20717Mo onHY,G at iin0MT ot a lsu lf ura n unor e卿r emen tofJuven iler ed dr u m,&i aen叩5 oeel l aI Us.A quae,1991,95:97一10615o ginoC,LJ kiN,Wat anab eT,Tid a乙AndoKBvit别mlnR eq u ir eme nt sofe抑.r V.R eq山r e me nt sf oreholin e.B ull.J Pn.肠e.&1.厂比h.,1 970.36:1140一114619 Moscon i一Ba cNH epa t ied ist urba n e e