南京中医药大学大学生实践创新训练计划项目申请表.docx

南京中医药大学大学生实践创新训练计划项目申请表
项目名称
食用真菌中醌还原酶诱导活性成分的提取及其癌症预防功能的研究
项目所属
一级专业门
医学
项目所属
二级专业类
中医学类
项目类型
（） 个人项目 （√） 团队项目
项目实施时间
起始时间： 2009 年 4 月 完成时间： 2010 年 10 月
申请人或申请团队

姓名
年级
学校
所在院系
/专业
联系电话
E-mail
主持人
俞莹莹
07
南京中医药大学
药学院
药物制剂
15850532506
camera159753@
尤剑杰
07
南京中医药大学
药学院
中药学
15850536507
Louis_89@
成 员
徐秋芳
07
南京中医药大学
药学院
药物制剂
13913908362
xqf048007111@
赵金龙
07
南京中医药大学
药学院中药学
15305166336
1069651571@
导 师
姓名
李祥
年龄

单位
药学院
行政职务/专业技术职务
教授
主要工作简历
1982.3～1983.3 南京中医学院植物化学教研室见习助教
1983.4～1987.10 南京中医学院植物化学教研室助教其间于
1985.2～1985.9在北京医学院药学系植物化学教研室进修）
1987.11～1995.4 南京中医学院中药化学教研室讲师（其间于1992.9～1993.9在南京中医学院中药学专业硕士学位课程班学习至结业）
1995.5～2001.4 南京中医药大学中药化学教研室副主任、副教授（其间于1995.9～1999.7 攻读南京中医药大学中药炮制学专业博士研究生，1999.7获博士学位）
2001.5～2004.6 南京中医药大学药物化学教研室主任、教授、博导2004.7～至今
南京中医药大学药物化学系主任兼药物化学教研室主任、教授、博导正在承担的其他科研项目（请列明任务来源、课题名称、研究起止年月、本人在该课题中承担的任务和分工）1、国家科技部“十一五”支撑计划：“中药资源可持续利用与产业共性技术研究 -中药饮片煅制技术及相关设备的研究”（课题编号2006BAI09B06-04）第一（并列）。2、 桃红四物汤活血调经的物质基础研究（2006-2008），江苏省方剂研究重点实验室开放课题，化学，排名第一）
以往研究工作成果（论文、著作目录及获学术奖励或已经研究开发的上市新药、获得的专利等情况）
1、与本课题相关的研究成果
1）刘元芬，李祥*. 石膏的不同含量测定方法的比较.时珍国医国药，2005，16（2）：93
2）刘元芬，李祥*. 煅石膏应用沿革及现代研究述要.中医药学刊，2005，23（1）：47
3）陈建伟，李凡，刘元芬，等. 生、煅石膏的扫描电镜观察.中南药学，2006,8(4)：253
4）李祥，刘元芬，周一彪，等.石膏炮制前后的生肌药效比较研究.中西医结合学报2006，4（6）：624-627
5）李祥，李凡，刘元芬，等.中药石膏X射线衍射分析及指纹图谱的确定.世界中西医结合学报，2006，1（2）：91
6）李祥*，刘元芬，高锦飚. 石膏炮制前后红外光谱的特征分析与鉴定. 内蒙古中医药,2007,(5)
7）李祥，刘元芬，高锦飚. 石膏炮制前后微量元素分析. 现代中药研究与实践,2007,(3).
8）高锦飚 陈建伟 刘元芬 李祥*. 石膏炮制工艺研究.中成药,2007,(2)
9）高锦飚，李祥*，陈建伟 花蕊石炮制前后红外光谱分析.时珍国医国药, 2007,(4).
10）高锦飚，李祥*，陈建伟.花蕊石止血作用物质基础研究. 吉林中医药,2007,(3).13.
11）李祥，陈建伟.白虎汤液中活性成分的研究.中成药，1991，13(2):32
12）陈建伟，李祥.水煎煮对石膏晶形和Ca/S值的影响.中国中药杂志，1993，16.(10):602 （被美国CA 1994;120:86204及美国权威ROM-CD收录）
13）陈建伟，李宁.石膏，透明石膏与方解石.中药材，1991，14(2):23～24
*为通讯作者
2、其他领域的研究成果
(1)“明党参有效成分及炮制机理研究”获1999年度江苏省科技进步二等奖，排名第一。
(2)“江苏地产中药材明党参化学成分与药理研究” 省教委自然科学基金课题.获1996年度获国家中医药管理局中医药基础研究三等奖 ，排名第三
(3)“辛温类中药HSGC—MS谱库及其HSGC标准图谱的研究” 省教委自然科学基金. 获1996年度江苏省科技进步三等奖，排名第三
(4)“胃血宁冲剂治疗消化性溃疡出血的研究”国家中医管理局课题，获1997年度江苏省科技进步三等奖，排名第四。
(5)“荆芥炭活性成分研究”江苏省教委自然科学基金课题，获1997年度江苏省教委科技进步二等奖，排名第二。
(7)“强效眩痛停治疗偏头痛作用机理研究”2004年度江苏省科技进步三等奖，排名第四。
(8)石膏炮制工艺及质量标准规范化研究（2001BA701A55-32），国家科技部“创新药物与中药现代化”专项，2006年通过国家验收，排名第一。
(9)光叶番荔枝抗肿瘤研究，江苏省科技厅重大项目，2006年通过省级验收，评为优秀，排名第四。
姓名
何立巍
年龄
35
单位
南京中医药大学
行政职务/专业技术职务
讲师
主要成果
主持课题：
2005年国家青年自然科学基金获得者（主持），“甜菜碱的多甲基供体作用及机理研究”，30400352。
2007年江苏省高校自然科学基金获得者（主持），“板蓝根中苯丙素类成分抗病毒活性评价及药材质量标准研究”，07KJD360165。
2009年 校级“十一五”教学规划课题（主持）：面向应用型人才培养的中药化学教学课程体系的创建。
新药：
国家新药“复方鱼腥草软胶囊”发明者，研究人员，国药证字Z20050725。
专利：
“板蓝根抗病毒提取物和提取方法及用途以及含量测定方法”,申请号200610098034.4。
专著3部（计500万字）：
《中药抗肿瘤有效成分药理与应用》，副主编，120万字。
《抗癌中药药理与应用》，副主编，200万字。
《执业药师资格考试复习用书》，编委，180万字。
论文：23篇，第一作者 11篇。
1．何立巍，李祥，陈建伟,等.板蓝根水提取物中的化学成分[J].药学学报,2006,41(12)：1193-1196 （CA、CSA 、BA、IPA 、CBS、AJ收录）
2．何立巍,李祥,陈建伟,等.板蓝根水溶性化学成分的研究[J].中国药房,2006,17(3)：232-234（CA、IPA收录）
3．何立巍,李祥,陈建伟,等.板蓝根抗病毒有效成分的研究进展[J].中医药信息,2005,22(9) ：124
4. Xiang Li a,, Dong-Dong Sun a, Jian-Wei Chen , Li-Wei He .New sphingolipids from the root of Isatis indigotica and their cytotoxic activity. Fitoterapia 78 (2007) 490–495(SCI收录)
5．何立巍，李祥，陈建伟,等. 板蓝根抗病毒有效部位的筛选，中国药房，2008，19（33）：2565-2566
6．何立巍，李祥，陈建伟,等.'HPLC测定板蓝根中落叶松脂素－4,4’－二－O－B－D－二葡萄糖苷，中草药，2008，39（12）：1895-1897
7．何立巍，季宇彬，孙东东.海嘧啶对细胞膜功能及细胞凋亡影响的研究，天津中医药，23（2）：149-152
8．何立巍，李详.也谈中药化学课程教学改革，2008，13：19
9 何立巍，李祥，高锦飚，等.中药花蕊石炮制前后宏微量元素分析，2008，12(4):26-27
10 何立巍，李祥，李凡，等.中药石膏炮制品的X射线衍射分析及纹图谱的建立，天津中医药，2008，25（12）：515-517
11 何立巍，李祥，高锦飚，等.中药花蕊石的X射线指望图谱研究，现代中药研究与实践，2008，22（6）：25-27
一、申请理由（包括自身具备的知识条件、自己的特长、兴趣、已有的实践创新成果等）
1、立项依据
（一）癌症预防的重要性
对人们的健康、生命构成相当严重威胁的癌症，被WHO列为危害人类健康的“三大杀手”之一。在不到２０年的时间里，中国癌症发病率上升了６９％，死亡率增长了２９．４％。尽管医疗技术不断进步，但预防癌症无疑是控制癌症最佳且最根本的途径。医学专家曾呼吁，癌症预防要从生活的每一天开始。癌症的饮食预防不仅应尽量减少事物中的致癌物质摄入量，而且膳食结构要合理，并要有意识地增加保护性的营养，如维生素、胡萝卜素、膳食纤维等。研究证实，许多膳食成分可诱发细胞凋亡，某些食品中的抗氧化剂可抑制细胞自发性突变，大约有三分之一的癌症死亡可以用实际可行的膳食方法避免。
（二）醌还原酶的作用机制
醌还原酶(quinone reductase, QR)是致癌代谢中一种主要的阶段2诱导酶，可使阶段1酶产生的活化中间产物解毒而形成解毒产物。各种抗癌化合物一般通过诱导QR 等酶而发挥抗癌作用，因此Q R 活性可作为衡量抗癌活性的指标之一。传统认为，苯醒还原酶(QR)属于phaseⅡenzyme 一类能够增加机体对致癌物质抵抗能力的酶。QR分为QRI和QRⅡ两类，生物体内广泛存在，能够催化对苯醌的双电子还原反应，使之还原为对苯二酚且不形成伤害细胞的自由基半醌。很多证据表明QR能保护细胞免受亲电子物质和活性氧的伤害，并诱导细胞抵抗致癌物质，因而，具有诱导QR产生的活性物质可能成为癌症预防作用新的靶点。
（三）食用真菌的防癌作用
食用真菌是一类高蛋白低脂肪食品，营养价值和药用价值均很高，对癌症具有预防和治疗作用，有“健康食品”的美称。以往研究结果表明，真菌食品中含有多糖物质和干扰素诱导剂，能抑制肿瘤。香菇对胃癌、食道癌、肺癌、宫颈癌有一定的疗效。金针菇也具有同样的功效，对肿瘤有抑制作用。猴头菇对胃癌有疗效，可延长病人的生存期，提高免疫力。银耳对癌瘤有抑制作用；茯苓中90％的B茯苓聚糖可增强免疫功能，有抗癌瘤的作用。最新研究结果表明，中药某些真菌中分得许多羊毛甾烷型三萜类化合物，氯仿粗提取物对培养的肝癌细胞中醌氧化还原酶的活性具有诱导作用。
（四）项目研究的意义
综合以上研究结果表明，真菌的防癌作用除了与多糖成分的免疫促进作用之外，还可能与三萜成分的醌还原酶诱导作用有关。以醌还原酶诱导作用的活性成分的研究为靶点，开发具有防癌作用的保健型食品，既可保证作健康食品的安全性，又能保证防癌的确切功能。目前市场没有相关产品和专利报道，可形成具有知识产权的专利成果。
我们此次研究的课题将大家平时的食品作为研究对象，有很好的操作性，希望通过从食品中提取出防癌活性物质，为人类的健康增加一份保障。本课题以研究提取真菌食品中醌还原酶 诱导活性成分来预防癌症为目的，通过研究真菌中的有效成分，进行提纯、分离、活性筛选等，最终确定起预防癌症作用的醌还原酶诱导成分，为新的保健食品的研制与开发奠定基础。

2、团队成员
团队成员由南京中医药大学本科生导师制培养对象及对科研感兴趣并愿付诸实践的学生组成。申请人俞莹莹、尤剑杰、徐秋芳、赵金龙，都掌握一定的有机化学、物理化学、生物化学、分析化学、生理学、药理学、药物合成等方面的知识，并做过了基础的实验，对药物的提取、分离、分析等过程有较强的兴趣，希望通过此次项目的研究获得提升，也希望能对癌症的预防做一些贡献。
我们是一群来自不同城市的学生，为了共同的理想走到了一起，希望通过各自的分工与团队的协作，创造出不菲的价值。我们都怀着对中医药事业的热爱，关注生活，关爱生命，注重实践，为了人类的健康不懈努力。相信通过我们自身的努力和指导老师的帮助，我们能够克服困难，在制定的计划下完成任务，同时在这样的实践中，真正的提升自己，也为医药事业作出一定的贡献。

二、项目方案（包括项目的训练目标、前期准备、组织实施、过程管理、实践环节、教师指导、项目结题等
训练目标：
以具有防癌作用的食用真菌为研究对象，提取、分离结合活性筛选其中具有醌还原诱导活性的成分，着重研究其中的三萜类成分的防癌功能。
设计合理的提取分离工艺，得到食用真菌中的防癌活性部位，评价其防癌功能，建立质量评价标准，为防癌型保健食品的开发奠定基础。

前期准备：
1、查阅文献书籍，确定防癌真菌的筛选范围。
2、建立醌还原酶诱导作用药理筛选方法。
3、人员分配，分工明确
4、材料准备：新鲜真菌、试剂、仪器
5、掌握中药化学成分提取分离各项技术。
6、具体实施方案
组织实施及过程管理：
在老师的指导下，以学生团队为主体进行立项申请和项目研究实施，学校教务处提供研究经费、药学院实验中提供各项实验条件。整个研究过程实行阶段考核制，由学院组织专家评审组对项目进行监督和指导，确保项目的顺利实施。
实践环节（实验方案）：
1、食用菌的确定
由文献及书籍的查阅，选择可能含有防癌活性成分较高的食用菌。
2、活性部位（成分）的提取
化学部位、成分的分离与醌还原酶诱导活性体外筛选相结合，逐步分离和筛选具有防癌功能的部位和单体成分。
新鲜食用菌 溶剂提取 提取物 系统溶剂法部位分离 各提取部位
药理筛选 活性部位 色谱分离 单体成分 药理筛选 活性成分
3、质量研究
以三萜类成分总含量和活性成分为指标，建立定性定量方法，建立保健食品质量标准。
4、功能评价
以化学致癌剂诱导的癌症发生为模型，建立防癌功能动物体内评价体系。

技术路线
防癌功能评价
质量标准
保健食品
建立含测方法
优化提取工艺
结构测定
活性成分
有效部位
醌还有酶诱导作用筛选
活性成分追踪
食用真菌

项目创新性
1、首次提出从食用真菌中寻找具有预防癌症功能的活性物质，无毒副作用。
2、以醌还原酶作为靶点进行研究，癌症预防功能和机制明确。
3、可形成功能确切的保健产品，具有独立知识产权。
教师指导：
(1)指导教师与课题组成员对实验方案
(2)教师指导课题的具体实施过程和实验技能的强化；
(3) 教师指导在课题的总结和成果的汇报。
项目结题
实验结果与分析总结整理成项目的结题报告。
申请相关专利1项目。
发表科技论文1-2篇。
成果参加省、国家级创新训练竞赛。

三、学校提供条件（包括项目开展所需的实验实训情况、配套经费、相关扶持政策等）
实验实训情况：
目前已经确定具有防癌作用的食用真菌5种，建立了醌还原酶诱导活性的体外筛选方法，提取分离方法进行了系统训练。
所需仪器：
药学院药化、分析、药理实验室可提供果胶常规提取分离和结构分析的实验条件，并配有HPLC、IR、UV、柱色谱等仪器，可保障课题的顺利完成。
相关扶持政策：
学校教务处和团委提供实验所需经费、
有具有经验的专职老师的帮助与指导。
四、预期成果
该项目可发明产生一种在食用真菌中提取具有防癌功能成分的提取方法，该提取物具有确切的醌还原酶诱导活性。由于国内外没有相关专利发表，因而可申报发明专利。并有望开发成具有防癌功能确切，作用独特的新型保健食品。具体成果包括：
（1）项目的结题报告。
（2）申请相关专利1项目。
（3）发表科技论文1-2篇。
（3）成果参加省、国家级创新训练竞赛。

五、经费预算
1． 原料及试剂 1700元
2． 分析测试费用：2000元
3． 实验动物：1300元
总计：5000元
六、导师推荐意见

该课题注意到了食用真菌的防癌功能，并以与癌症发生密切相关的醌还原酶为作用靶点；提取分离和活性筛选密切结合，旨在开发出新型无副作用具有癌症预防作用的保健功能食品。
该项目立题新颖并注重社会生活实际，实验方案严谨可行，目标明确且具有重要的应用前景。
推荐该项目立项进行系统研究。

签名：
年 月 日
七、院系推荐意见

院系负责人签名： 学院盖章：
年 月 日
八、专家委员会推荐意见：

签名：
年 月 日
注：表格栏高不够可增加。