涂片找抗酸杆菌的标准操作规程.doc

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*******医院 * 检验科作业指导书版本号：1.0 文件号：JY-JY-CZ-JH-120 页码：第1页共6页涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日编制人：审核人：批准人：目录 1：目录 …………………………………………………1 2：修改记录…………………………………………… 2 3：员工培训记录……………………………………… 3 4：年度审核记录……………………………………… 3 5：涂片找抗酸杆菌的标准操作规程………………… 4 检验科作业指导书第 1 页 *医院 * 检验科作业指导书版本号：1.0 文件号：JY-JY-CZ-JH-120 页码：第2页共6页涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日修改记录修改页码原内容修改后内容修改人及日期批准人及日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 注：管理手册必须由作者修改。修改处应用“星号”做标识，修改后的文字应用下划线标识。修改超过十处，该管理手册应更换版本。检验科作业指导书第 2 页 *医院检验科作业指导书版本号：1.0 文件号：JY-JY-CZ-JH-120 页码：第3页共6页涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日员工培训记录签名日期签名日期年度审核记录编制人审核人批准人签名及日期：签名及日期：签名及日期：签名及日期：签名及日期：检验科作业指导书第 3 页 *医院检验科作业指导书版本号：1.0 文件号：JY-JY-CZ-JH-120 页码：第4页共6页涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 1 检验目的检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。 2 原理结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色）。 3标本要求（1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等（2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。）（3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。 4 容器和添加剂类型痰盒、试管等 6 试剂（1）试剂名称：结核菌染色液（2）试剂生产厂家：贝索（3）包装规格：4X250ML （4）试剂盒组成：试剂1：石碳酸复红液检验科作业指导书第 4 页 *医院检验科作业指导书版本号：1.0 文件号：JY-JY-CZ-JH-120 页码：第5页共6页涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日试剂2：酸性酒精溶液试剂3：亚甲基蓝溶液 7仪器设备：奥林巴斯CX-21显微镜 8 校准程序送无锡市计量质量检测研究所校准 9操作步骤 1、取待检标本1-2ml置于玻璃管中，加入3ml0.5%NAOH溶液。 2、将玻璃试管放入试管架并用水煮沸灭菌30min。 3、等冷却经4000转/min离心20分钟后取沉淀涂片检查。 4、涂片经火焰固定，加石碳酸复红液染色5分钟或更久（需加温）。 5、水洗（之后尽可能将水沥干）。 6、加酸性酒精溶液，脱色1-2分钟。 7、水洗（假如标本面还可以看到残存红色时，再加酸性酒精溶液脱掉红色为止）。 8、加亚甲基蓝溶液染色30秒，水洗，干燥。 9、镜检。 10质量控制：参加我科质量管理组的质量控制活动。 11干扰和交叉反应麻风菌可能对检验结果产生影响。检验科作业指导书第 5 页 *医院检验科作业指导书版本号：1.0 文件号：JY-JY-CZ-JH-120 页码：第6页共6页涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日 12生物参考区间涂片未见抗酸杆菌 13患者检验结果的可报告区间涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌阴性：全视野未找到抗酸杆菌＋：全视野发现3－9个抗酸杆菌＋＋：全视野发现10－99个抗酸杆菌＋＋＋：每视野发现1－9个抗酸杆菌＋＋＋＋：每视野发现10个以上抗酸杆菌（全视野发现1－2个抗酸杆菌时，报告抗酸杆菌个数） 14临床意义：结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力，细菌成分与其代谢产物引起免疫反应（Ⅳ型）导致一系列组织学上的意义。检验科作业指导书第 6 页

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