利多卡因调节HMGB1_TLR4信号通路对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用.pdf

广 东 药 科 大 学 学 报Journal of Guangdong Pharmaceutical UniversityJul,2023,39(4)收稿日期：2023-04-17基金项目：四川省卫生和计划生育委员会科研课题（21PJ128）作者简介：冯昌盛（1973），男，博士，副主任医师，主要从事麻醉及疼痛分子生物学机制研究，Email：。利多卡因调节HMGB1/TLR4信号通路对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用冯昌盛，钱朵，耿媛（川北医学院附属医院，四川 南充 637000）摘要：目的 探讨利多卡因调节高迁移率族蛋白B1（HMGB1）/Toll样受体4（TLR4）信号通路对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用。方法 将大鼠分为正常组、模型组、利多卡因低剂量组、利多卡因高剂量组和EP（HMGB1抑制剂）组，采用异丙肾上腺素皮下注射制备慢性心力衰竭大鼠模型。超声检测各组大鼠心功能；ELISA试剂盒测定血清心钠肽（ANP）、脑钠肽（BNP）、白细胞介素-1（IL-1）和肿瘤坏死因子-（TNF-）水平变化；HE染色和Masson染色观察大鼠心脏组织病理学变化；RT-qPCR检测HMGB1 mRNA和TLR4 mRNA表达；Western blot检测HMGB1、TLR4、NF-B、p-NF-B、Bcl-2、Bax相关蛋白表达。结果 正常组大鼠HE染色结果显示心肌细胞形态结构正常，Masson染色结果显示心肌组织致密有序排列，组织间没有胶原蛋白沉积。与正常组相比，模型组大鼠心肌细胞褶缩，形态结构排列不规则，有较多炎性细胞浸润，组织间有大量胶原蛋白沉积，心肌纤维化程度较重，大鼠左室舒张末期内径（LVEDD）和左室收缩末期内径（LVESD）水平、心钠肽（ANP）、脑钠肽（BNP）、IL-1 和 TNF-水平、HMGB1 mRNA和TLR4 mRNA水平、HMGB1、TLR4、p-NF-B/NF-B、Bax蛋白表达水平显著升高，左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）水平、Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P0.05）；与模型组相比，利多卡因低、高剂量组和EP组大鼠心肌细胞损伤显著改善，心肌组织中胶原蛋白显著减少，心肌纤维化程度显著减轻，大鼠LVEDD、LVESD、ANP、BNP、IL-1 和 TNF-水平、HMGB1 mRNA 和 TLR4 mRNA 水平、HMGB1、TLR4、p-NF-B/NF-B、Bax蛋白表达水平显著降低，LVEF和LVFS水平、Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P0.05）。结论 利多卡因可抑制HMGB1/TLR4信号通路，降低慢性心力衰竭大鼠的炎症损伤，改善其心功能。关键词：利多卡因；HMGB1/TLR4信号通路；慢性心力衰竭中图分类号：R965文献标识码：A文章编号：2096-3653（2023）04-0026-06DOI：10.16809/ki.2096-3653.2023041701Study on the cardioprotective effect of lidocaine on chronic heart failure in rats by regulating theHMGB1/TLR4 signaling pathwayFENG Changsheng*,QIAN Duo,GENG Yuan（Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College,Nanchong 637000,China）*Corresponding author Email:Abstract:Objective To investigate the cardioprotective effect of lidocaine on chronic heart failure in rats byregulating the high mobility group B1(HMGB1)/Toll like receptor 4(TLR4)signaling pathway.Methods The ratmodel of chronic heart failure was established by subcutaneous injection of isoproterenol.The rats were groupedinto normal group,model group,low-dose lidocaine group,high-dose lidocaine group and EP(HMGB1 inhibitor)group.Ultrasound was applied to detect the cardiac function of rats in each group.ELISA was used to measure thelevels of serum atrial natriuretic peptide(ANP),brain natriuretic peptide(BNP),IL-1 and TNF-.HE stainingand Masson staining were applied to observe the histopathological changes of rat heart.RT-qPCR was applied todetect the expression of HMGB1 and TLR4 mRNA.Western blot was applied to detect the expression of HMGB1,TLR4,NF-B,p-NF-B,Bcl-2,and Bax related proteins.Results HE staining showed normal morphology and广东药科大学学报第39卷structure of myocardial cells in the normal group,while the Masson staining showed dense and orderlyarrangement of myocardial tissue,with no collagen deposition between tissues.Compared with the normal group,the myocardial cells of the model group rats were convoluted,irregularly arranged in morphology and structure,with more inflammatory cell infiltration,a large amount of collagen deposition between tissues,and a heavierdegree of myocardial fibrosis.Meantime,the levels of LVEDD and LVESD,the levels of ANP,BNP,IL-1 andTNF-,the levels of HMGB1 and TLR4 mRNA,the expression of HMGB1,TLR4,p-NF-B/NF-B,and Baxproteins in rats were obviously increased,but the levels of LVEF and LVFS,and the expression of Bcl-2 proteinwere obviously reduced in the model group(P0.05).Compared with the model group,the myocardial celldamage in the low-dose,high-dose lidocaine groups,and EP group was obviously improved,the collagen proteinin myocardial tissue was clearly reduced,and the degree of myocardial fibrosis was obviously reduced.Meantime,the levels of LVEDD and LVESD,ANP,BNP,IL-1 and TNF-,the levels of HMGB1 and TLR4 mRNA,and theexpression of HMGB1,TLR4,p-NF-B/NF-B,and Bax proteins were obviously reduced,while the levels ofLVEF and LVFS,and the expression of Bcl-2 protein were obviously increased(P0.05).Conclusion Lidocaine can inhibit the HMGB1/TLR4 signaling pathway,reduce inflammatory damage,and improve cardiac function in rats with chronic heart failure.Key words:lidocaine;HMGB1/TLR4 signaling pathway;chronic heart failure慢性心力衰竭指由于心脏损害后收缩和舒张功能障碍，导致心脏结构改变，供血功能降低，各类心血管疾病最后都会导致该结果，严重威胁人民生命健康安全1。随着人们生活方式的改变及老龄化人口的增加，心血管疾病的发病率呈逐年升高的趋势，同时也给社会带来严重的经济压力2。慢性心力衰竭过程中往往伴随着严重的炎症反应，因此，如何降低炎症反应成为治疗慢性心力衰竭的研究方向3。利多卡因是临床上常用的麻醉药物，随着对利多卡因的深入研究，发现其在炎症反应中发挥重要作用4。张雯等5研究表明利多卡因通过抑制炎症反应可减少神经元凋亡，实现对脓毒症模型大鼠的大脑保护作用。刘庆文等6研究表明利多卡因可降低缺血再灌注大鼠炎症因子的释放，发挥对肾损伤的保护作用。高迁移率族蛋白B1（HMGB1）与其受体Toll样受体4（TLR4）结合后，可激活其下游核转录因子（NF-B），从而产生大量炎症因子释放而对机体造成损伤7。李柏新等8研究表明克雷伯菌引发肺炎，激活HMGB1/TLR4/NF-B信号通路，促进炎症因子释放，蓝萼甲素通过抑制其信号通路可改善炎症损伤。冷晓雪等9研究表明牛蒡子苷元通过抑制 HMGB1/TLR4/NF-B 信号通路，可减轻炎症反应，从而减少炎症引起的神经元凋亡。推测HMGB1/TLR4/NF-B信号通路在炎症反应中发挥关键作用。本研究就利多卡因调节HMGB1/TLR4信号通路对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用进行研究，以期为临床用药提供实验参考。1 材料与方法1.1 实验材料、试剂和仪器选取180200 g的SPF级SD雄性大鼠60只，购于上海懿尚生物科技有限公司，生产许可证号：SCXK（粤）2022-0011，自由进食饮水，环境条件（222），湿度（605）%，光照为 12 h 光-暗循环（AM7：00-PM7：00）。实验过程在川北医学院附属医院基础医学实验室进行，已通过川北医学院附属医院动物伦理委员会审核批准（伦理批号：202204119）。利多卡因（6108-05-0）购自西南药业股份有限公司；异丙肾上腺素（HY-B0468/CS-2582）购自MedChemExpress 公司；HMGB1 信号通路抑制剂-丙酮酸乙酯（EP）（E47808）购自 Sigma 公司；Trizol试剂（15596-026）购自上海乔羽生物科技有限公司；蛋白提取试剂盒（XY-MY-1049）购自济凡生物科技有限公司；ANP、BNP、IL-1 和 TNF-（E-EL-R0017c、E-EL-R0126c、E-EL-R0012c、E-EL-R2856c）试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司；NT-proBNP（FY-A014908）购自上海富雨生物科技有限公司；RT-PCR试剂盒（PR2552）购自广州威佳科技有限公司；总 RNA 提取试剂盒（K3101）购自上海奥陆生物科技有限公司；HMGB1、TLR4、NF-B、p-NF-B、Bcl-2、Bax一抗及二抗（ab18256、ab22048、ab141406、ab235502、ab14152、ab32503、ab150113）均购自英国Abcam公司；荧光定量PCR仪（Lepgen-96）26第4期冯昌盛，等.利多卡因调节HMGB1/TLR4信号通路对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用购自南京贝登医疗股份有限公司；CX41显微镜购自上海笃玛生物科技有限公司；RM2245病理切片机购自德国 Lecia公司；超声多普勒仪 A8200S2购自上海聚慕医疗器械有限公司；RZ-VEVO 3100超声心电图仪购自上海然哲仪器设备有限公司。1.2 造模与分组给药造模：采用异丙肾上腺素皮下注射制备慢性心力衰竭模型大鼠，皮下多点位注射剂量为5 mg/kg/d的盐酸异丙肾上腺素，连续注射7 d，继续喂养14 d，眼眶取血后ELISA法检测NT-proBNP、超声心电图检测心功能，确认慢性心力衰竭大鼠造模成功10。分组给药：将 60 只 SD 大鼠随机分为正常组、模型组、利多卡因低、高剂量组和EP组，每组12只，除正常组外其他组进行慢性心力衰竭造模。利多卡因（低、高）剂量组于造模成功后分别腹腔注射 5、10 mg/（kgd）11的利多卡因，EP 组腹腔注射40 mg/（kgd）的EP12，正常组和模型组注射等量生理盐水，治疗14 d。1.3 超声检测大鼠心功能给药结束后，用3%戊巴比妥钠麻醉大鼠，采用超声多普勒检测大鼠心功能。根据心室波群的M型曲线测量大鼠左室短轴缩短率（LVFS）、左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）、左室射血分数（LVEF）数值，连续检测 3 个心动周期，取平均值，评价大鼠心脏功能。1.4 ELISA检测血清心钠肽（ANP）、脑钠肽（BNP）、IL-1和TNF-水平取大鼠主动脉血，离心收集上清，按照 ELISA试剂盒说明书步骤检测 ANP、BNP、IL-1、TNF-水平。1.5 HE染色和Masson染色观察大鼠心脏组织病理学变化腹主动脉取血后，处死大鼠，于大鼠心尖处剪取适量心脏组织，清洗之后用 4%（）多聚甲醛固定，乙醇脱水，石蜡包埋，切片。然后分别进行HE染色和Masson染色，观察心肌组织病理变化和心肌纤维化情况。1.6RT-qPCR检测 HMGB1 mRNA和 TLR4 mRNA表达取左心室组织低温研磨匀浆，提取总RNA，用逆转录试剂盒将 RNA 逆转录为 cDNA，然后对cDNA 进行荧光定量 PCR 扩增。以 GAPDH 为内参，使用 2-Ct方法计算 HMGB1 mRNA 和 TLR4mRNA 的相对表达量。HMGB1 mRNA：正向：5-GGCGGCTGTTTTGTTGACAT-3；反向：5-ACCCAAAATGGGCAAAA GCA-3；TLR4 mRNA：正向：5-GGCTTCTAACCTCAACGACCT-3；反向：5-AGTATTCTTTGCCTGAGTTGCTT-3；GAPDH：正向：5-ACAGCAACAGGGTGGTGGAC-3；反向：5-TTTGAGGGTGCAGCGAACTT-3。1.7 Western blot检测相关蛋白的表达取左心室组织匀浆，提取总蛋白质，BCA检测组织中蛋白表达量，蛋白变性后进行电泳然后转膜，封闭液中封闭后加入HMGB1、TLR4、NF-B、p-NF-B、Bcl-2、Bax（稀释 1 1 500）一抗 4摇床过夜，清洗后再分别添加相应二抗（稀释1 5 000）孵育后，加入ECL显色，最后用Image-Pro Plus软件进行定量分析蛋白（GAPDH为内参蛋白）。1.8 统计学分析数据分析采用SPSS 25.0软件，实验数据以（xs）表示。多组间的比较用单因素方差分析，SNK-q检验用于组内两两比较。P0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 超声心动图分析与正常组相比，模型组大鼠LVEDD、LVESD极显著升高，LVEF和LVFS极显著降低（P0.01）；与模型组相比，利多卡因低、高剂量组和 EP 组大鼠LVEDD、LVESD显著降低，LVEF和LVFS显著升高（P0.05）。见表1。2.2 血清ANP、BNP、IL-1和TNF-水平比较与正常组相比，模型组大鼠 ANP、BNP、IL-1和 TNF-水平极显著升高（P0.01）；与模型组相比，利多卡因低、高剂量组和EP组大鼠ANP、BNP、IL-1和 TNF-水平显著降低（P0.05）。见表2。2.3 大鼠心脏组织病理学变化HE染色结果表明，正常组心肌细胞形态结构正常，模型组大鼠心肌细胞褶缩，形态结构排列不规则，有较多炎性细胞浸润。与模型组相比，利多卡因低、高剂量组和EP组大鼠心肌细胞损伤显著改善。见图1。Masson染色结果表明，正常组大鼠心肌组织致密有序排列，组织间没有胶原蛋白沉积。模型组大鼠心肌组织排列不规则，组织间有大量胶原蛋白沉积，心肌纤维化程度较重。利多卡因低、27广东药科大学学报第39卷高剂量组和EP组大鼠心肌组织中胶原蛋白显著减少，心肌纤维化程度显著减轻。见图2。2.4各组大鼠心肌组织 HMGB1 mRNA 和 TLR4mRNA表达比较与正常组相比，模型组大鼠HMGB1 mRNA和TLR4mRNA水平极显著升高（P0.01）；与模型组相比，利多卡因低、高剂量组和EP组大鼠HMGB1 mRNA和TLR4 mRNA水平显著降低（P0.05）。见表3。2.5 各组大鼠心肌组织相关蛋白表达比较与正常组相比，模型组大鼠 HMGB1、TLR4、p-NF-B/NF-B、Bax 蛋白表达水平极显著升高，Bcl-2蛋白表达水平极显著降低（P0.01）；与模型组 相 比，利 多 卡 因 低、高 剂 量 组 和 EP 组 大 鼠HMGB1、TLR4、p-NF-B/NF-B、Bax蛋白表达水平显著降低，Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P0.05）。见图3和表4。正常组模型组利多卡因低剂量组利多卡因高剂量组EP组图2 Masson染色结果Figure 2 Masson staining results(200)正常组模型组利多卡因低剂量组利多卡因高剂量组EP组图1 HE染色结果Figure 1 HE staining results（200）表2 血清ANP、BNP、IL-1、IL-6和TNF-水平比较Table 2 Comparison of serum levels of ANP,BNP,IL-1,IL-6 and TNF-(x s,n=12)组别正常组模型组利多卡因低剂量组高剂量组EP组（ANP）/（ngL-1）35.635.7471.269.38#62.578.72*48.767.83*￥49.428.23*（BNP）/（ngL-1）124.6822.56266.4228.93#217.8321.64*165.6218.53*￥168.7417.6*（IL-1）/（pgmL-1）26.586.1254.749.46#43.675.73*31.463.28*￥33.824.37*（TNF-）/（pgmL-1）6.881.1417.261.87#11.531.26*8.321.53*￥8.141.38*与正常组比较：#P0.01；与模型组比较：*P0.05，*P0.01；与利多卡因低剂量组比较：￥P0.05。表1 各组大鼠超声心动图结果Table 1 Results of echocardiography in each group(xs,n=12)组别正常组模型组利多卡因低剂量组高剂量组EP组LVEDD/mm4.520.478.720.32#7.840.53*6.120.43*￥6.480.56*LVESD/mm3.510.236.920.41#6.140.33*4.780.26*￥4.870.17*LVEF/%84.572.6343.752.47#58.361.41*76.481.87*￥74.532.16*LVFS/%48.722.8628.432.57#34.383.12*43.643.26*￥42.592.73*与正常组比较：#P0.01；与模型组比较：*P0.05，*P0.01；与利多卡因低剂量组比较：￥P0.05。28第4期冯昌盛，等.利多卡因调节HMGB1/TLR4信号通路对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用3 讨论慢性心力衰竭心功能损伤主要是由炎症反应引起，炎症反应可促使心脏组织发生病变导致心功能受损。因此，如何降低炎症反应对治疗心力衰竭具有重要意义13。本研究通过皮下注射异丙肾上腺素制备慢性心力衰竭大鼠模型，结果表明，与正常组相比，模型组大鼠HE染色结果显示心肌细胞褶缩，形态结构排列不规则，有较多炎性细胞浸润，Masson染色显示心肌组织排列不规则，组织间有大量胶原蛋白沉积，心肌纤维化程度较重。大鼠LVEDD和LVESD水平显著升高，LVEF和LVFS水平显著降低，提示大鼠心肌功能受损，射血功能受损，造模成功。ANP、BNP是心脏分泌的多肽类激素，正常生理状态下分泌量很少，当心功能发生损伤后心肌细胞合成并释放大量该激素，IL-1 和TNF-为炎症因子是炎症发生的标志物。本研究结果表明模型组大鼠 ANP、BNP、IL-1 和 TNF-水平、Bax蛋白显著升高，提示慢性心力衰竭引发炎症反应和心肌组织损伤。利多卡因是一种局部麻醉药物，用于降低注射疼痛、插管反应、治疗室性心律失常等14。随着对该药物研究的不断深入，发现利多卡因可通过抑制炎症相关丝裂原活化蛋白激酶/NF-B通路，从而减轻炎症发生15。刘瑞莲16研究发现利多卡因可降低脂多糖诱导的炎症因子 IL-1和 TNF-释放，改善急性肺损伤。张喜洋17研究表明利多卡因可降低炎症因子 IL-1和 TNF-的表达，从而减轻致敏原所激发的哮喘大鼠气道炎症反应。本研究结果表明利多卡因可降低LVEDD、LVESD、ANP、BNP、IL-1和TNF-、Bax蛋白表达水平，提高LVEF、LVFS和Bcl-2蛋白表达水平，有效减轻慢性心力衰竭大鼠炎症损伤和细胞凋亡。病理学结果也表明大鼠心肌细胞损伤显著改善，Masson染色说明心肌组织中胶原蛋白显著减少，心肌纤维化程度显著减轻。提示利多表3 各组大鼠心肌组织HMGB1 mRNA和TLR4 mRNA表达比较Table 3Comparison of HMGB1 and TLR4 mRNA expressionin myocardial tissue of rats in each group(xs,n=12)组别正常组模型组利多卡因低剂量组高剂量组EP组HMGB1 mRNA0.480.041.180.12#0.920.08*0.640.06*￥0.640.06*TLR4 mRNA0.350.031.070.09#0.860.07*0.520.04*￥0.520.04*与正常组比较：#P0.01；与模型组比较：*P0.05，*P0.01；与利多卡因低剂量组比较：￥P0.05。HMGB1TLR4NF-Bp-NF-BBcl-2BaxGAPDHABCDEA.正常组；B.模型组；C.利多卡因低剂量组；D.利多卡因高剂量组；E.EP组。图3 各组大鼠心肌组织相关蛋白表达Figure 3Expression of related proteins in myocardial tissueof rats in each group表4 各组大鼠心肌组织相关蛋白表达比较Table 4 Comparison of related proteins in myocardial tissue of rats in each group(xs,n=12)组别正常组模型组利多卡因低剂量组高剂量组EP组HMGB10.410.041.370.16#1.080.12*0.680.06*￥0.630.05￥*TLR40.320.031.040.09#0.820.07*0.520.04*￥0.560.05￥*p-NF-B/NF-B0.370.030.820.07#0.660.05*0.430.04*￥0.470.04￥*Bcl-20.820.070.280.03#0.410.03*0.650.05*￥0.620.04￥*Bax0.330.020.840.07#0.680.06*0.470.04*￥0.450.03￥*与正常组比较：#P0.01；与模型组比较：*P0.05，*P0.01；与利多卡因低剂量组比较：￥P0.05。29广东药科大学学报第39卷卡因可减轻慢性心力衰竭大鼠炎症损伤，改善组织病理学变化，保护心功能。大量研究表明，HMGB1/TLR4/NF-B信号通路参与细胞炎症反应，当HMGB1释放到细胞质后与其受体TLR4结合，之后激活其下游核转录因子NF-B，从而导致大量炎性因子释放18。黄淑敏等10研究表明参附注射液通过抑制HMGB1/TLR4/NF-B信号通路可降低慢性心力衰竭大鼠炎症因子释放减轻炎症损伤，改善心功能。张春玲等19研究表明大黄素通过抑制HMGB1/TLR4/NF-B信号通路而降低炎症因子IL-6、TNF-、IL-1水平的表达，从而减轻大鼠急性脑出血。本研究结果表明，模型组大鼠 HMGB1 mRNA 和 TLR4 mRNA 水平、HMGB1、TLR4、p-NF-B/NF-B蛋白表达水平与正常组相比显著升高，表明慢性心力衰竭与 HMGB1/TLR4/NF-B 信号通路有关。利多卡因干预后 HMGB1mRNA和TLR4 mRNA水平、HMGB1、TLR4、p-NF-B/NF-B蛋白表达水平显著降低，提示利多卡因可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-B信号通路实现保护心脏功能。EP是HMGB1抑制剂，利多卡因高剂量组大鼠与EP处理组大鼠各检测指标达到相同水平。提示利多卡因与EP处理慢性心力衰竭大鼠可以达到相同效果，抑制 HMGB1/TLR4/NF-B 信号通路，实现保护心功能。综上所述，利多卡因可抑制HMGB1/TLR4信号通路，减少炎症因子释放，降低慢性心力衰竭大鼠炎症损伤，从而改善其心功能。本研究只对一种通路进行探讨，其具体的分子机制还需深入探究。参考文献：1 MCDONAGH T A,METRA M,ADAMO M,et al.2021 ESCGuidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronicheart failureJ.Eur Heart J,2021,42(36):3599-3726.2 PINAR J,PINAROV L,VTOVEC J.Pathophysiology,causes and epidemiology of chronic heart failure.Patofyziologie,piny a epidemiologie chronickho srdenho selhnJ.VnitrLek,2018,64(9):834-838.3 BRENNAN E J.Chronic heart failure nursing:integratedmultidisciplinary careJ.Br J Nurs,2018,27(12):681-688.4 YANG Xi,WEI Xinchuan,MU Yi,et al.A review of themechanism of the central analgesic effect of lidocaineJ.Medicine(Baltimore),2020,99(17):e19898.5 张雯,张宇轩,李瑞轩,等.利多卡因调控Apelin/APJ系统对脓毒症相关性脑病大鼠的脑保护作用J.现代药物与临床,2023,38(2):249-256.6 刘庆文,吴学东,林春榕.利多卡因对幼鼠小肠缺血-再灌注致肾损伤的保护作用J.医学理论与实践,2013,26(19):2521-2523,2531.7 SUN Zhezhe,NYANZU M,YANG Su,et al.VX765 attenuatespyroptosis and HMGB1/TLR4/NF-B pathways to improvefunctional outcomes in TBI miceJ.Oxid Med Cell Longev,2020,2020:7879629.8 李柏新,冷晓雪,陈之光.蓝萼甲素调节HMGB1/TLR4/NF-B信号通路对克雷伯菌肺炎大鼠炎性损伤的影响J.中国病原生物学杂志,2022,17(12):1387-1391.9 冷晓雪,李柏新.牛蒡子苷元抑制HMGB1/TLR4/NF-B信号通路对肺炎链球菌脑膜炎大鼠神经元凋亡的影响J.中国病原生物学杂志,2022,17(10):1150-1154,1159.10 黄淑敏,廖晓倩,范星宇,等.基于HMGB1/TLR4/NF-B信号通路探讨参附注射液对慢性心力衰竭大鼠的保护作用J.中国中药杂志,2022,47(20):5556-5563.11 ZHENG Binbin,YANG Hongbo,ZHANG Jianan,et al.Lidocaine alleviates sepsis-induced acute lung injury in mice bysuppressing tissue factor and matrix metalloproteinase-2/9J.Oxid Med Cell Longev,2021,2021:3827501.12 尚立芝,李耀洋,季书,等.二陈汤加味通过HMGB1/RAGE/NF-B信号通路对COPD大鼠细支气管炎症的影响J.中国实验方剂学杂志,2023,29(6):44-54.13 DI PALO K E,BARONE N J.Hypertension and heart failure:prevention,targets,and treatmentJ.Heart Fail Clin,2020,16(1):99-106.14 BERK T,SILBERSTEIN S D.The use and method of actionof intravenous lidocaine and its metabolite in headachedisordersJ.Headache,2018,58(5):783-789.15 BLOW M,BEST N,BRUGGER S,et al.The effect of lidocaineiontophoresis for the treatment of tinnitus:A systematicreviewJ.EurArch 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