石榴提取物鞣花酸乳膏剂的制备工艺初探.pdf

基金项目：安徽省高校自然科学研究重大项目（）通讯作者：范高福【技术与方法】石榴提取物鞣花酸乳膏剂的制备工艺初探刘月，范高福，姚琪琪，胡婷，郑斌（合肥职业技术学院生物工程学院，安徽 合肥 ；合肥师范学院化学与化学工程学院）摘要 目的：筛选石榴提取物鞣花酸的乳膏制剂的处方工艺。方法：以基质成型性影响最大的单硬脂酸甘油酯、白凡士林和液体石蜡的用量为因素，采用正交实验法优化石榴提取物鞣花酸乳膏剂的制备工艺。结果：优化后的乳膏基质处方是硬脂醇 ，白凡士林 ，液体石蜡 ，单硬脂酸甘油酯 ，十二烷基硫酸钠 ，丙三醇 和纯化水 ；采用熔合法所制得的乳膏剂稳定性好，色泽均匀，细腻润滑，无刺激性。结论：本乳膏剂制备工艺简便可行，质量稳定可靠，适用于石榴提取物鞣花酸乳膏剂的制备。关键词 石榴；鞣花酸；乳膏剂；制备工艺；质量研究 ：，（，；，）：，：，；，：，；石榴属于石榴科植物，不仅作为水果食用，也有极高的药用价值，其根、果皮、叶、花、籽均可入药。文献报道石榴中存在 种以上生物活性化合物 ，其中果皮富含多酚类、生物碱类和单宁类等成分，其中有效成分之一鞣花酸，具有消炎、抗氧化、保护肾脏、抗肿瘤、抗敏、止血等药理作用，已有石榴皮鞣花酸片剂等固体制剂剂型的开发应用 。据药品监督管理局公开数据显示外用制剂中乳 年第 卷第 期 膏剂占约 ，表明乳膏剂深受患者接受。伴随中医讲究“内病外治”，软膏剂外用治疗，也备受认可 。乳膏制剂具有制剂成型稳定，不良反应少，无肝脏首过效应，胃肠道破坏较小及携带使用方便等优势广泛用于临床。但乳膏剂需在皮肤上涂抹给药，对其基质要求应细腻润滑，且易于涂布，尚需对其基质配方及制备工艺进行筛选 。本文以自制的石榴皮提取物鞣花酸为原料，对制备软膏剂的制备工艺及质控标准进行初步探讨。材料与方法 实验仪器 紫外可见分光光度计（上海仪电分析仪器有限公司）；型电子天平（天津天马衡基仪器有限公司）；型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；台式离心机（湖南凯达科学仪器有限公司）；数显恒温水浴锅（常州丹瑞实验仪器设备有限公司）；（）循环式真空泵（河南省予华仪器有限公司）等。实验试药自制石榴皮提取物鞣花酸（纯度为 ）；鞣花酸对照品（）；药用级别阿拉伯树胶粉；白凡士林；其他分析纯试剂有液体石蜡；硬脂醇（十八醇）；单硬脂酸甘油酯；十二烷基硫酸钠；丙三醇；尼泊金；吐温 等。实验方法 基质的筛选（）乳化剂的筛选：乳化剂是制备乳膏剂重要成分，常用有 型乳化剂，包括十二烷基硫酸钠、吐温 和阿拉伯树胶粉。根据离心实验、耐寒耐热实验、肤感及外观等结果来评判。具体步骤如下：离心稳定性实验：称取 石榴皮提取物鞣花酸软膏成品置于 离心管中，低速离心 （转速为 ），考察分层、破乳及变粗等现象，并记录打分。耐热耐寒实验：称取 石榴皮提取物鞣花酸软膏成品置于离心管中，恒温烘箱干燥，观察 ，考察分层、破乳及变粗变软等现象，并记录打分；取 石榴皮提取物鞣花酸软膏成品置于压盖离心管中，置于恒温冰箱冷冻，中观察 ，考察分层、破乳及变粗变软等现象，并记录打分。肤感：取适量的乳膏剂均匀涂在皮肤上，比较其铺展难易性。外观；取适量的石榴皮提取物鞣花酸软膏成品，考察其外观颜色是否均匀或有变化。（）正交筛选基质配方比例：在预实验基础上，参考相关文献 ，选择以硬脂醇（十八醇）、白凡士林、单硬脂酸甘油酯、液体石蜡、十二烷基硫酸钠、丙三醇和纯化水作为常用基质处方成分，以单硬脂酸甘油酯、白凡士林和液体石蜡作为乳膏剂成型性影响的关键因素进行基质配方比例筛选，建立三因素三水平正交实验。然后参照 （）正交设计表，制作种乳膏，观察种乳膏的外观性状及稳定性，按照基质筛选评分标准进行评分。见表 、表 。表 因素水平设计表（）水平因素单硬脂酸甘油酯（）白凡士林（）液体石蜡（）表 基质筛选评分标准指标分值延展性（分）细腻润滑，无颗粒（分）涂布较难，无颗粒感（分）有粗糙感（分）颗粒结块，涂布难（分）外观（分）色泽非常均匀（分）色泽均匀（分）色泽较均匀（分）色泽不均匀（分）离心性（分）无分层，外观不变（分）轻微分层（分）明显分层，油水分离（分）破乳（分）耐热耐寒（分）无变化（分）轻微油水分离（分）油水分离（分）严重油水分离（分）制备方法一般在制备乳膏剂时应根据乳膏剂的类型、制备用量和环境条件来选择合适的制备方法。常用制备方法有熔合法和乳化法，均需要通过加热辅助，利于制剂成型 。通过稳定性实验对上述两种方法的可行性进行对比研究，结果表明熔合法制备可行性好，其具体操作方法是：先称取熔点最高的十二烷基硫酸钠置于烧杯中加热熔化，依次加入单硬脂酸甘油酯、白凡士林和硬脂醇，搅拌促使加热熔化，等全部熔化混匀后，再滴入液体石蜡、丙三醇、纯化水和尼泊金乙酯，充分搅拌，使其完全反应，混合均匀。再加入研细的适量主药石榴皮提取物鞣花酸，同一方向搅拌，直至冷凝成膏状，最终制得含药量为 的乳膏。质量检测（）质量检查参考标准：参照文献 检查。粒度按 中国药典 年版三部 年第 卷第 期 通则第一法检查。装量差异按 中国药典 版三部通则重量法检查。微生物限度按 中国药典 版三部通则微生物计数法检测。（）质量检查具体方法：含量测定采用紫外可见分光光度计法，对乳膏剂中的石榴皮提取物鞣花酸进行含量测定。对照品溶液制备：精密称取对照品鞣花酸 ，于 棕色容量瓶中，用 甲醇溶解，并定容至刻度，摇匀，配制成 的对照品溶液。供试品溶液制备：称取乳膏剂供试品约 （约相当于鞣花酸 ），置入具塞锥形瓶中，精密加入 甲醇 ，密塞，称定重量，超声提取 ，提取次，取出后置冰箱中放置，然后取出放置室温，再称定重量，用甲醇补足重量，摇匀，抽滤 次，即得。标准曲线的制作：精密量取鞣花酸对照品溶液 、分别置于 棕色容量瓶中，后用 甲醇溶液加至规定刻度，摇匀静置一段时间后，在紫外波段 范围内进行扫描，测得鞣花酸对照品溶液及供试品溶液在 处有最大吸收峰，所以选择以 为测定波长。其中以 的对照品溶液为空白溶液，测定各浓度的对照品溶液的吸光度值。以吸光度（）为纵坐标，浓度（，）为横坐标，制作标准曲线。供试品的含量测定：精密量取准备好的供试品溶液 、，分别置于 棕色容量瓶中，加 甲醇至刻度线，摇匀后放置室温 ，采用紫外可见分光光度计 处测定吸光度。实验结果 乳化剂的筛选结果十二烷基硫酸钠，吐温 ，阿拉伯胶 个不同乳化剂制备乳膏剂，乳化效果依次为十二烷基硫酸钠 吐温 阿拉伯胶。见表 、表 。正交实验筛选基质配方比例的结果从直观分析 值来看，对乳膏剂的成型性影响因素主次顺序为 ，最 佳 基 质 处 方 配 比 为，即为硬脂醇 、白凡士林 、液体石蜡 、单硬脂酸甘油酯 、十二烷基硫酸钠 、丙三醇 和纯化水 。见表 、表 。表 乳膏剂的离心、耐热耐寒试验结果乳化剂离心 （）耐热试验（）耐寒试验（）十二烷基硫酸钠无变化微微乳化微微变硬吐温 油水分离变色、表面液化分层阿拉伯胶分层变粗变色、破乳分层表 乳膏剂的肤感、外观结果乳化剂肤感外观十二烷基硫酸钠细腻润滑、无颗粒感色泽均匀、无异味、吐温 有轻微颗粒感、易涂布色泽均匀、黏稠阿拉伯胶有颗粒感、易涂布色泽均匀、黏稠性差表 正交实验结果实验号细腻性延展性稳定性评分 表 方差分析结果变异来源 （误差）注：（，），（，）。乳膏剂制备工艺稳定性实验结果按照正交实验优化的制备方法进行石榴皮提取物鞣花酸乳膏剂的制备，通过实验验证表明，采用熔合法制备的乳膏剂稳定性更好，作为本次实验优选制备方法。见表 。表 乳膏剂的制备方法稳定性实验结果制备方法离心 耐寒 耐热 肤感外观熔合法无变化微微变粗微微乳化细腻、易涂布灰色、黏稠、均匀、无异味乳化法分层、表面有晶状体析出变粗、分层微微乳化细腻、易涂布灰色、黏稠、均匀 乳膏剂质量检测的结果 粒度结果石榴皮提取物鞣花酸乳膏剂个供试品均未发现 的粒子。装量差异结果石榴皮提取物鞣花酸乳膏 年第 卷第 期 剂 个供试品装量差异符合中国药典 年版要求。见表 。表 石榴皮提取物鞣花酸乳膏剂装量差异检查实验号（）（且 ）（）（）（）含瓶重量（）空瓶重量（）每个容器内装量标示装量 标示装量 标示装量 标示装量 标示装量 平均装量标示装量标示装量标示装量标示装量标示装量 微生物限度结果按 中国药典 版三部通则微生物计数法，供试品均未检查出金黄色葡萄球菌。含量测定结果 标准曲线结果求得方程为：，相关系数 ，结果表明鞣花酸在 时有良好的线性关系，结果见图 。图 鞣花酸标准曲线图 含量测定结果含量测定前对不同浓度的甲醇 溶 剂 进 行 筛 选，精 密 称 取 对 照 品 鞣 花 酸 分别在 甲醇、甲醇和 甲醇溶解后，实验结果表明 甲醇进行溶解吸光度最大，即本实验用 甲醇作为溶剂。在 甲醇为溶剂的基础上选择了 组石榴皮提取物鞣花酸供试品溶液（、）进行吸光度测定，测得吸光度 的平均值为 ，依据标准曲线 ，求得供试品平均含量为 。见表 、表 。表 不同浓度的溶剂处理石榴提取物鞣花酸软膏剂吸光度比较（）浓度组最大吸收波长（）吸光度（）甲醇 甲醇 甲醇 表 甲醇中供试品紫外测定结果组别吸光度（）浓度（）平均值 讨论乳化剂是促进乳膏剂稳定的重要组成部分。根据亲水疏水平衡值，即 值（，），乳化剂分为水包油型（型）和油包水型（型），型基质能够与大量水融合，释药速度和透皮吸收快，但因含水量高，应加入防腐剂防止霉变。型外相是油，不易清除，也不能与水融合，在制备软膏剂时相对应用少，因此本实验乳膏剂选择 型乳化剂；此外，实验中对常用 型乳化剂十二烷基硫酸钠、吐温 和阿拉伯胶进行离心、耐寒耐热及外观等稳定性实验考查，结果表明十二烷基硫酸钠所制得的乳膏剂稳定性最佳。本次实验在对乳膏剂中主药进行含量测定时，选择了个不同浓度（，）的甲醇作为溶媒，并对其进行紫外可见分光光度计测量，根据测得数据结果绘制标准曲线，结果发现浓度为 甲醇所制作的标准曲线的相关系数 为 ，可信度好。因此，通过熔合法制备的石榴皮提取物鞣花酸乳膏剂制备工艺简便可行，质量稳定可靠。与朱朋艳等 研究相比，在乳化法常用制备乳膏方法的基础上增加稳定性考察，且验证研合法制备乳膏剂质量可行，选择常见的紫外可见分光光度法进行含量测定，快速准确。至于石榴提取物鞣花酸乳膏剂的药理作用尚待进一步研究。参考文献 蔡霞，刘悦，张芳芳，等 石榴的化学成分与质量控制研究进展 世界科学技术 中医药现代化，（）：（下转第 页）年第 卷第 期 （）：，（）：，（）：，：，（），（）：，（）：，（）：，（）：，：，：（收稿日期：櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂）（上接第 页）陈建雯，杨剑兵，吴双凤，等 石榴皮中化学成分及其生物学活性研究进展 化工设计通讯，（）：何宇鸿，梁敏桐，刘璐群，等 鞣花酸药理作用综述 化学工程与装备，（）：，（），（）：范高福，胥振国，刘修树，等 植物提取物鞣花酸的药理作用及制剂研究进展 基因组学与应用生物学，（）：，（）：王佳鸾，赵俸艺，张春红，等 鞣花酸提取、纯化及其生物活性研究进展 食品工业科技，（）：王恒，赵雪芹，刘欣欣，等 软膏剂常用优化方法的研究进展 中国民族民间医药，（）：彭雪花，张莎莎 中医外治法临证验案举隅 浙江中医杂志，（）：喻超，软膏剂制备及含量测定的研究进展 广东化工，（）：刘彤，王雪萌，刘黎瑶，等 当归提取物软膏剂的工艺处方研究 天津农学院学报，（）：，祁金玉，李娜坤，刘黎瑶，等 紫苏叶提取物乳膏剂的处方研究 天津农学院学报，（）：曾亚没食子乳膏的制备、质量控制及抑菌活性的研究 乌鲁木齐：新疆医科大学，国家药典委员会中华人民共和国药典 一部：年版 北京：中国医药科技出版社，：朱朋艳，乔妙，刘海杨，等铁皮石斛多糖软膏制备工艺及其质量标准研究 中国民族民间医药，（）：（收稿日期：）年第 卷第 期