基于HPLC-ICP-MS的海螵蛸中不同砷形态含量及其转移率研究 (1).pdf

第42 卷 第 8 期2023 年8 月Vol.42 No.810001006分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO（Journal of Instrumental Analysis）基于HPLCICPMS的海螵蛸中不同砷形态含量及其转移率研究李康1，2，李丽敏2，程益清2，周如洁2，胡青2，毛秀红2，季申1，2*（1上海中医药大学 中药学院，上海 201203；2上海市食品药品检验研究院，国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室，上海 201203）摘要：建立了高效液相色谱电感耦合等离子体质谱（HPLCICPMS）测定海螵蛸药材中多种砷形态的分析方法，并研究了海螵蛸药材煎煮后砷及砷形态的转移率。样品采用0.02 mol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA2Na）溶液超声提取60 min，以Dionex IonPac As7阴离子交换柱为色谱柱，2 mmol/L和100 mmol/L碳酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱。结果显示，27批海螵蛸药材中均检出砷甜菜碱（As B）和砷胆碱（As C），其中26批检出二甲基砷（DMA），10批检出一甲基砷（MMA），1批检出微量亚砷酸（As），并发现3个未知砷形态；海螵蛸药材水煎煮后砷及砷形态的平均转移率均大于50%，且存在个体差异。该方法准确度高，专属性好，明确了海螵蛸药材中砷形态的分布规律，并揭示了海螵蛸药材在煎煮过程中砷及砷形态的转移规律，可为海螵蛸药材的安全性评价奠定基础。关键词：海螵蛸；砷形态；高效液相色谱电感耦合等离子体质谱；含量测定；转移率中图分类号：O657.63；R917 文献标识码：A 文章编号：1004-4957（2023）08-1000-07Investigation on Content and Transfer Rate of Different Arsenic Species in Sepiae Endoconcha Based on HPLCICPMSLI Kang1，2，LI Li-min2，CHENG Yi-qing2，ZHOU Ru-jie2，HU Qing2，MAO Xiu-hong2，JI Shen1，2*（1School of Pharmacy，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 201203，China；2National Medical Products Administration Key Laboratory for Quality Control of Traditional Chinese Medicine，Shanghai Institute for Food and Drug Control，Shanghai 201203，China）Abstract：A high performance liquid chromatographyinductively coupled plasma mass spectrometry（HPLCICPMS）was established for the determination of arsenic species in Sepiae EndoconchaResearch on the transfer rates of arsenic and arsenic species in Sepiae Endoconcha after decoction was carried outAll samples were extracted with 0.02 mol/L EDTA2Na solution by ultrasonic extraction for 60 min，and the arsenic species were separated on a Dionex IonPac As7 anion exchange column by gradient elution，with 20 mmol/L and 100 mmol/L ammonium carbonate as the mobile phasesThe results showed that As B and As C were detected in total 27 batches of samples，in which DMA was detected in 26 batches，MMA was detected in 10 batches and trace As was detected in only 1 batchMoreover，3 kinds of unknown arsenic species were found in Sepiae EndoconchaThe average transfer rates for arsenic and arsenic species were more than 50%，which varied in different batchesWith high accuracy and specificity，the method clarified the distributions of arsenic species in Sepiae Endoconcha，revealing the transformations of arsenic and arsenic species，and it could lay a foundation for the safety evaluation of Sepiae Endoconcha.Key words：Sepiae Endoconcha；arsenic species；high performance liquid chromatographyinductively coupled plasma mass spectrometry；content determination；transfer rate海螵蛸（Sepiae Endoconcha）是常用海洋中药之一，始载于 神农本草经1，列为中品，为乌贼科动物无针乌贼或金乌贼的干燥内壳，味咸、涩、温，归脾，肾经，有收敛止血、涩精止带、制酸止痛、doi：10.19969/j.fxcsxb.23042806收稿日期：20230428；修回日期：20230612基金项目：上海市中药和保健食品品质与安全检测专业技术服务平台（21DZ2290200）；2023年度国家药品标准提高项目（2023Y14）通讯作者：季申，博士，主任药师，研究方向：中药、天然药物及保健食品质量控制和安全性检测方法研究，E-mail：第 8 期李康等：基于HPLCICPMS的海螵蛸中不同砷形态含量及其转移率研究收湿敛疮等功效2，药用价值较高。但有研究表明，海螵蛸中总砷的含量普遍较高3，其砷总量与砷形态间并非呈简单的正相关4；有害元素煎煮后的转移率与药材安全性密切相关，而海螵蛸经水煎煮后，药材中砷元素是否完全进入汤剂，不同砷形态的转移率及煎煮过程中砷形态是否发生转化等研究未见报道，因此限制了对海螵蛸中砷元素安全风险的科学评价。砷元素（As）是一种具有明确致癌性的类金属元素，其生理活性和生物毒性与形态密切相关，其毒性依次为亚砷酸（As）砷酸（As）一甲基砷（MMA）二甲基砷（DMA）砷胆碱（As C）、砷甜菜碱（As B）5，目前未知砷糖、砷脂及其他未知砷逐渐被发现6，对于未知砷形态的毒性也逐步开展研究78，因此研究海螵蛸中的砷形态分布对明确药材毒性十分必要。高效液相色谱电感耦合等离子体质谱（HPLCICPMS）是砷形态分析的成熟技术，具有灵敏度高、专属性强、耐用性好等优势，已广泛应用于环境、食品、药品等领域9。本文建立了HPLCICPMS同时分析海螵蛸中多种砷形态的方法，研究了海螵蛸中砷形态的含量及分布规律，进一步通过分析海螵蛸水提取物，明确海螵蛸在煎煮过程中不同砷形态的转移规律，可为全面合理评价海螵蛸药材及其水提取物的用药安全提供参考，为其安全性评价奠定基础。1 实验部分 1.1材料1.1.1 仪器与试剂 8800型电感耦合等离子体质谱仪、1260型高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；Dionex IonPac As7阴离子交换柱（4 mm 250 mm，美国Thermo Fisher公司）；Mars6微波消解仪（美国CEM公司）；Elmasonic E300H型超声仪（德国Elma公司）；Mettler Toledo XSE205DU型十万分之一天平、Mettler Toledo XS204型万分之一天平（德国Mettler Toledo公司）；5920R型离心机（德国Eppendorf公司）；纯水仪（美国MilliQ公司）。总砷标准溶液（批号：GBW08611）购自中国计量科学研究院；亚砷酸（批号：J14N53）和砷酸（批号：L19P58）购自 Asfa Aesar 公司；一甲基砷（批号：40617）和二甲基砷（批号：41001）购自 Dr.Ehrenstorfer公司；砷胆碱（批号：DSM7387）和砷甜菜碱（批号：AWM0904）购自Wako公司；乙二胺四乙酸二钠（EDTA2Na）、碳酸铵、硝酸均为优级纯；去离子水（电阻率为18.2 M cm）；高纯液态氩气（纯度99.99%）和氦气（纯度为99.99%）由上海成功气体工业有限公司提供。1.1.2 样品 27批海螵蛸药材经上海市食品药品检验研究院杨新华主管药师鉴定为乌贼科动物金乌贼（Sepia esculenta Hoyle）和无针乌贼（Sepiella maindroni de Rochebrune），详细信息见表1。其中炒海螵蛸（金乌贼）药材（HPX29 HPX30）分别由海螵蛸（金乌贼）药材（HPX27 HPX28）炒制而成；炒海螵蛸（无针乌贼）药材（HPX17，HPX18 HPX20）分别由海螵蛸（无针乌贼）药材（HPX16，HPX21 HPX23）炒制而成。1.2仪器工作条件1.2.1HPLC条件色谱柱为Thermo Dionex IonPac As7（4 mm 250 mm）；以2 mmol/L碳酸铵为流动相A，100 mmol/L 碳酸铵为流动相 B；梯度洗脱条件为：0 2.1 min，100%A；2.1 3.3 min，100%0%A；3.3 7.0 min，0%A；7.0 8.0 min，0%100%A；8.0 10.0 min，100%A；流速为1.0 mL/min；进样量为20 L。1.2.2 ICPMS仪器参数 以具同轴雾化器和碰撞反应池的电感耦合等离子体质谱进行检测；测定时选取同位素为75As，选择碰撞池反应模式；采用铂金截取锥和采样锥；射频功率为1 450 W，射频电压为1.79 V，载气（高纯氩气）流速为1.0 L/min，蠕动泵流速为0.4 r/s，采样深度为8.0 mm。1.3实验方法1.3.1 总砷测定 精密称取样品粉末0.2 g于微波消解罐中，加入5 mL硝酸，加盖密封，轻轻振荡后混匀置于微波消解仪中，190 微波消解30 min；消解完成后取出，冷却至室温，加少量去离子水润洗表1样品信息Table 1Sample informationsSample name海螵蛸（金乌贼）药材炒海螵蛸（金乌贼）药材海螵蛸（无针乌贼）药材炒海螵蛸（无针乌贼）药材Batch17244NumberHPX1 HPX15，HPX27 HPX28HPX29 HPX30HPX16，HPX21 HPX23HPX17，HPX18 HPX201001第 42 卷分析测试学报并转移至50 mL聚四氟乙烯量瓶中，定容至刻度线，即得。1.3.2 砷形态测定 精密称取样品粉末（过三号筛）0.5 g，加入20 mL 0.02 mol/L EDTA2Na溶液，振荡使溶解，超声提取60 min，冷却至室温，离心，取上清液过一次性0.45 m滤膜，取续滤液，即得。同法制备空白溶液。2 结果与讨论 2.1提取溶剂的优化元素形态分析应保证提取过程中各砷形态分布不发生变化1011，故应尽量选择温和的提取溶剂。分别考察了水、EDTA2Na、硝酸人工胃液、人工胃液和硝酸溶液等不同提取溶剂的提取效果。结果表明，EDTA2Na、硝酸人工胃液、人工胃液3种提取溶剂的砷形态提取率均在95%以上，提取效果相差不大，且各砷形态的加标回收率均在90%110%之间。由于EDTA2Na具有稳定作用12，因此选择提取溶剂为EDTA2Na。2.2色谱条件的优化2.2.1色谱柱的选择比较了 Hamilton PRPX100（250 mm 4.1 mm，10 m）、Dionex IonPac As7（4 mm 250 mm）、Dionex IonPac As19（4 mm 250 mm）不同色谱柱的分离效果，结果见图1。由图1可知，Dionex IonPac As7色谱柱对6种砷形态的分离效果最佳，峰形较好，因此选择Dionex IonPac As7色谱柱进行分离。2.2.2流动相的选择分别考察了 25 mmol/L 磷酸二氢铵溶液和水、2 mmol/L碳酸铵和100 mmol/L碳酸铵、60 mmol/L硝酸铵和水3种流动相体系的分离效果。结果表明，2 mmol/L和100 mmol/L碳酸铵体系的灵敏度较高、分析时间短、分离效果好、操作简便，且可在10 min内使海螵蛸中各砷形态（包括未知砷形态）实现基线分离，因此选择该体系作为流动相。优化条件下，标准溶液和样品溶液的色谱图见图2。2.3方法学考察2.3.1线性关系、检出限与定量下限分别配制0、1、5、10、20、50、100 g/L 的 6 种砷形态混合标准溶液，采用本方法进行测定。以各砷形态的质量浓度为横坐标（x），对应色谱峰峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线。6种砷形态在0 100 g/L范围内线性关系良好，相关系数为 0.999 8 1.000 0。以3倍和10倍信噪比计算各砷形态的检出限和定量下限分别为 0.002 0.005 mg/kg 和0.006 0.017 mg/kg（见表2）。2.3.2 精 密 度 取 6 种砷形态混合标准溶液（10 g/L），连续进样6次，各砷形态测定结果的相对标准偏差（RSD）均小于3.0%，表明进样精密度良好。2.3.3重复性取 1 批海螵蛸药材，按照供试品溶液制备一式 6 份，未检出砷形态，然后按照“2.3.6”制备中浓度加标溶液一式6份，采用本方法进行测定。结果显示，各砷形态的RSD均小于5.0%，表明方法重复性良好。图1不同色谱柱对砷形态分离效果的影响Fig.1Effect of different chromatographic columns on separation of arsenic speciesA：Hamilton PRPX100；B：Dionex IonPac As7；C：Dionex IonPac As19图2优化条件下标准溶液（A）和样品溶液（B）中砷形态的色谱图Fig.2Chromatograms of arsenic species of standard solution（A）and sample solution（B）under optimized conditions1002第 8 期李康等：基于HPLCICPMS的海螵蛸中不同砷形态含量及其转移率研究2.3.4中间精密度在不同时间由不同人员按照本方法分别对供试品溶液和加标供试品溶液进行分析，考察方法耐用性。结果表明，各砷形态的RSD均小于10%，表明方法耐用性良好。2.3.5稳定性取“2.3.3”的第1份供试品溶液和第1份加样供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、16、24 h进样分析。24 h内溶液中砷形态测定结果的RSD均小于10%，表明各砷形态在24 h内基本稳定。2.3.6准确度精密称取海螵蛸药材0.25 g，一式12份，分别精密加入适量6种砷形态混合标准溶液，进行低、中、高3个水平的加标回收实验（见表3）。结果表明，6种砷形态的加标回收率为91.2%110%，RSD均小于5.0%，说明方法准确度好。2.4样品测定按照2020年版 中国药典 四部通则232113对样品进行总砷测定；以建立的HPLCICPMS方法对样品进行砷形态分析（见表4）。结果表明，27批海螵蛸药材的总砷含量为1.359 7.697 mg/kg，均符合2020年版 中国药典 限量规定（10 mg/kg）14；27批海螵蛸药材中均检出As B和As C，其中26批检出DMA，10批检出MMA；仅有1批检出微量As （含量为0.008 mg/kg），其余均未检出无机砷形态；发现3个未知砷形态（未知砷形态1 3，保留时间分别为3.308、5.017、9.301 min），其平均占比为10.49%。表427批海螵蛸药材的测定结果Table 4Determination results of 27 batches of Sepiae Endoconchaw/（mgkg-1）HPX1HPX2HPX3HPX4HPX5HPX6HPX7HPX8HPX9HPX10HPX11HPX12HPX13HPX14HPX155.8125.1664.6851.2221.0112.0424.5740.9625.4443.7443.3582.3301.5912.2352.308-*-0.008-0.1630.2400.2590.1200.1310.1230.3020.085-0.0590.4380.1380.0490.4181.2710.1990.4060.4180.2070.3360.3450.6950.241-0.1050.3140.6550.0320.4020.869-0.0330.0200.0230.0080.0070.0120.0140.0070.0280.0170.0150.0130.0080.0160.020-0.043-6.2075.8335.3851.5581.4842.5215.5841.2975.4723.9254.1253.1861.6803.0714.4686.3386.5595.5971.7351.8652.7536.0871.3595.6263.9324.7783.9651.6583.7885.950NumberAs BAs DMAUnknown arsenic 1Unknown arsenic 2As CMMAAs Unknown arsenic 3TotalspeciesTotal arsenic表2各砷形态的保留时间、线性关系、检出限和定量下限Table 2Retention times，linear relationships，detection limits and quantitation limits of arsenic speciesArsenic speciesAs BAs DMAAs CMMAAs Retention time/min1.2892.2753.0025.4575.7716.547Linear equationy=7 657.63x-2 433.77y=6 959.81x+326.060y=7 155.26x+1 766.58y=6 534.57x-3 281.56y=7 302.80 x-781.570y=7 209.17x+5 831.56Correlation coefficient0.999 90.999 80.999 90.999 91.000 01.000 0Detection limit/（mg kg-1）0.0030.0040.0050.0020.0020.002Quantitation limit/（mg kg-1）0.0090.0130.0170.0070.0070.006表3各砷形态的回收率与相对标准偏差Table 3Recoveries and relative standard deviations of arsenic speciesArsenic speciesAs BAs DMAAs CMMAAs Original/g1.426 1.4570.0000.040 0.0410.0080.0000.000Added/gLow1.0800.1090.1110.1070.0950.099Medium1.3500.1630.1670.1610.1430.148High1.6190.2170.2220.2150.1900.197Found/gLow2.569 2.6040.102 0.1050.148 0.1510.116 0.1200.0980.091 0.098Medium2.764 2.9100.149 0.1540.199 0.2110.168 0.1770.147 0.1550.151 0.161High3.025 3.1080.200 0.2051.055 1.0900.224 0.2340.199 0.2090.200 0.207Recovery/%98.9 10891.2 96.394.8 10399.5 105103 11092.4 108Average recovery/%10393.698.9102105103RSD/%2.71.62.31.92.34.61003第 42 卷分析测试学报HPX27HPX28HPX29HPX30HPX16HPX21HPX22HPX23HPX17HPX18HPX19HPX201.3815.4580.6210.5467.3662.4652.9372.3780.5750.5910.5440.584-0.2130.1060.3230.3000.1090.8021.0020.8150.5320.6620.7240.7390.2410.1600.2180.1960.2040.9161.1290.7390.1710.2490.2260.186-0.0120.028-0.0110.0380.0350.0530.0080.0281.4801.2400.0150.0130.0170.0211.6380.9720.8690.863-0.0030.005-0.0090.0110.0080.0070.0110.0070.012-0.0350.058-0.0140.0520.0630.0661.8445.7512.6912.3727.6944.2055.0963.9612.9492.5762.4682.5021.8725.8642.8952.9957.6974.6315.3074.4212.5643.0142.6852.837（续表4）NumberAs BAs DMAUnknown arsenic 1Unknown arsenic 2As CMMAAs Unknown arsenic 3TotalspeciesTotal arsenic*：not detected2.5转移率研究根据 医疗机构中药煎药室管理规范15对海螵蛸药材进行煎煮，得到海螵蛸水煎液，浓缩，冷冻干燥，最终得到海螵蛸水提取物（编号为STW1 STW10，分别由海螵蛸（金乌贼）药材（HPX1 HPX10）制成），测定其总砷及砷形态的含量，并计算总砷及砷形态的转移率。结果表明，10批海螵蛸水提取物中均检出As B、DMA、As C，且均发现2个未知砷形态（未知砷形态1和2），其中3批检出MMA，4批检出As，含量为0.007 0.044 mg/kg（见表5）。海螵蛸水提取物中主要砷形态仍为As B；与药材相比，部分海螵蛸水提取物中检出微量的MMA和As，且发现1个新的未知砷形态（未知砷形态2），可能是在煎煮提取过程中由其他砷形态转化而成1617。总砷和砷形态总量及As B的转移率一致，均在40%以上；受其生长环境和自身生长特性影响18，DMA、As C及未知砷形态1的转移率存在个体差异（见表6）。表510批海螵蛸水提取物的测定结果Table 5Determination results of 10 batches of Sepiae Endoconcha aqueous extract w/（mgkg-1）ExtractSTW1STW2STW3STW4STW5STW6STW7STW8STW9STW10As B78.883108.991114.86842.42846.08953.014103.22116.35684.062103.176As-*-DMA5.0246.2001.6674.7394.7404.4653.8852.9310.3211.488Unknown arsenic 18.3159.7662.69612.48814.83013.0978.4446.5760.5553.200Unknown arsenic 20.2000.2530.1600.2110.2300.2440.1460.0780.0980.165As C0.1340.2780.0990.1990.4870.1550.0920.0360.2120.386MMA-0.0510.0420.061-As-0.0190.044-0.007-0.009-Unknown arsenic 3-Totalspecies92.558125.507119.53460.11666.42471.036115.79725.97885.249108.415Total arsenic90.099100.012103.40061.60669.09872.036124.64527.18681.148108.164*：not detected表6转移率结果Table 6Results of transfer rate/%ExtractSTW1STW2STW3STW4STW5STW6STW7STW8STW9STW10AverageAs B68.4187.34112.28113.15122.2378.4263.4247.2548.3378.8281.96DMA155.12106.8929.51128.5397.01109.5836.2095.37-72.5192.30Unknown arsenic 1210.1199.5129.56196.44118.40114.8034.1375.75-87.11107.31As C20.5657.0719.8682.55179.3739.8418.8613.5723.7263.3251.87Total species75.1589.08101.67125.81119.9385.1058.2755.7048.7678.9983.85Total arsenic71.6563.1384.61115.7399.2879.0357.5455.6345.1578.6775.041004第 8 期李康等：基于HPLCICPMS的海螵蛸中不同砷形态含量及其转移率研究2.6海螵蛸中砷及砷形态分布规律不同品种的海螵蛸药材之间砷及砷形态的含量和种类无显著性差异；两种海螵蛸药材中的主要砷形态均为As B，平均占比在70%以上。不同批次间海螵蛸药材中检出的砷形态种类存在微小差异，推测是由于不同批次间样品受生长环境及自身生长特性的影响所致18。海螵蛸（金乌贼）药材和海螵蛸（无针乌贼）药材炮制后，总砷和砷形态总量呈下降趋势，可能是在炒制过程中温度高，砷元素蒸发所致19，但有1批样品的总砷含量增加，可能由于在炮制过程中受到外界污染；两种海螵蛸药材经炮制后，As B的含量降低，As C的含量增加，As C为As B的代谢前体，两者之间可互相转化20，推测在炮制过程中As B转化为As C。因此，两种海螵蛸药材炮制后主要砷形态由As B转变为As C，其平均占比在40%以上；炮制后发现两个未知砷形态（未知砷形态2和3），其结构尚不明确，且均未出现无机砷形态（见图3）。不同品种海螵蛸及其炮制品中，尽管主要砷形态为几乎无毒的As B或As C，但所有样品均检出DMA。由于DMA具有二甲基亚砷酸和二甲基砷酸两种不同的亚型结构，研究表明二甲基亚砷酸有剧毒，其毒性大于As 21，且发现的3个未知砷形态结构与毒性也不明确，因此，海螵蛸药材存在一定的安全风险。3 结 论 本研究建立了HPLCICPMS测定海螵蛸药材中多种砷形态的分析方法，并研究了海螵蛸药材煎煮后砷及砷形态的转移率，方法准确度高，专属性好，适用于海螵蛸中砷形态分析。由实际样品分析可知，海螵蛸药材中主要砷形态为有机砷形态（如As B、DMA、As C等），且发现3个未知砷形态，海螵蛸药材水煎煮后砷及砷形态的平均转移率在50%以上，并存在个体差异。本研究为海螵蛸药材的安全性评价奠定了基础，但人体服用后，海螵蛸中砷及砷形态的变化规律还需进一步探索。参考文献：1Liu R，Wei S，Wang X Z，Cheng J M，Wu HChina J.Chin.Mater.Med.（刘睿，魏爽，王欣之，程建明，吴皓中国中药杂志），2020，45（16）：38833889.2Liu S H，Wang Y X，Shao Z B，Jiang K J，Cao L G，Li B，Shen J Y，Liu W WChin.Tradit.Patent Med.（刘书豪，王有宪，邵仲柏，蒋凯俊，曹联攻，李冰，沈金阳，刘玮炜中成药），2022，44（10）：33663368.3Yu J，Gu Q Q，Miao X Y，An R，You L S，Wang X HChin.Tradit.Patent Med.（于静，顾青青，缪潇瑶，安叡，尤丽莎，王新宏中成药），2015，37（3）：583587.4Zhu X D，Luo J Y，Kong D D，Wu J J，Sheng P，Yang M HChina J.Chin.Mater.Med.（朱晓东，骆骄阳，孔丹丹，吴建杰，盛萍，杨美华中国中药杂志），2019，44（23）：50655071.5Schmidt L，Landero J A，Novo D R，Duarte F A，Mesko M F，Caruso J A，Flores E M MFood Chem.，2018，255：340347.6Camurati J R，Salomone V NJ.Toxicol.Environ.Health B，2020，23（1）：112.7Luvonga C，Rimmer C A，Yu L L，Lee S BJ.Agric.Food Chem.，2020，68（4）：943960.图3炒海螵蛸（无针乌贼）药材（A）和炒海螵蛸（金乌贼）（B）的色谱图Fig.3Chromatograms of frying Sepiella maindroni de Rochebrune（A）and frying Sepia esculenta Hoyle（B）1005第 42 卷分析测试学报8Ptursdttir H，Blagden J，Gunnarsson K，Raab A，Stengel D B，Feldmann J，Gunnlaugsdttir HAnal.Bioanal.Chem.，2019，411（19）：49734985.9Liu Y，Chen S Z，Liu L P，Li X Y，Li Q YJ.Instrum.Anal.（刘洋，陈绍占，刘丽萍，李晓玉，李乾玉分析测试学报），2023，42（2）：227232.10Lu Y N，Lu J S，Zhu T，Shi J H，L J LFujian Anal.Test.（陆奕娜，卢金素，朱婷，史佳虹，吕坚羚福建分析测试），2017，26（4）：2633.11Yang F，Wei C Y，Liu J XEnviron.Sci.Technol.（杨芬，韦朝阳，刘金鑫环境科学与技术），2016，39（10）：7986.12Rong N N，Li Y F，Ren L Y，Hu Y XKunming Med.Univ.（荣娜娜，李玉凤，任李玥，胡月新昆明医科大学学报），2021，42（8）：3539.13Chinese Pharmacopoeia Commission.Chinese Pharmacopoeia.Part，2020 ed.Beijing：China Medical Science Press（国家药典委员会.中国药典.四部，2020版.北京：中国医药科技出版社），2020：307.14Chinese Pharmacopoeia Commission.Chinese Pharmacopoeia.Part，2020 ed.Beijing：China Medical Science Press（国家药典委员会.中国药典.一部，2020版.北京：中国医药科技出版社），2020：234236.15China Traditional Chinese 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