实验指导书--减少版(实验针灸学).doc

《实验针灸学》实验指导书
（供针灸学院针推专业五年制学生使用）

福建中医药大学针灸学院

实验 针刺对失血性休克家兔血压的调整作用
（一）选定原则
休克是临床比较危急的问题，针灸急救时作用如何？为了观察针灸对休克调整作用，选择了此实验。
（二）实验目的与要求
练习动物手术操作技术，学会动物休克的造模方法，验证针刺对血压的调整作用。
（三）每组人数
6－8人
（四）主要仪器设备及配套数
生物机能检测系统、家兔、兔台、颈动脉切开器械一套、眼科镊一把、眼科剪1把、注射器（10毫升、5毫升、2毫升各1支）、颈动脉夹、颈动脉插管、气管插管、针灸针、干棉球、纱布4块、生理盐水、20%乌拉坦、肝素等、垃圾袋、绳子
（五）实验步骤
1、动物抓取、称重：把家兔双儿置于右手手心，右手其余手指抓住耳后皮厚处，左手脱住家兔臀部，把家兔提起，放于婴儿称上称重。
2、动物麻醉：用生理盐水棉球轻擦耳缘静脉处皮肤，用注射器抽取乌拉坦，按照25mg/kg的剂量给动物麻醉。以动物的角膜反射、呼吸深度、腹壁肌肉的紧张度为观察指标，用棉絮查看动物的角膜反射、止血钳挟持四肢肌肉，待动物安静，呼吸平稳，角膜反射迟钝，麻醉成功。
3、动物固定（家兔）：仰卧位把家兔四肢及牙齿都固定在动物实验台上。
4、气管插管：用剪毛剪剪去实验需要部位的兔毛，毛放入装有水的弯盘中。成员互相配合，两人分别用止血钳挟住颈部两侧的皮肤，用手术刀切开皮肤。若有血，用棉球、止血钳等止血。再颈部切开的基础上，逐层分离局部的组织，暴露气管长度约3－4cm，其下放置10cm长的丝线备用，气管倒“T”切口，插入气管插管，然后用丝线固定。
5、动脉插管：用手在颈部寻找颈总动脉，手感知到搏动处慢慢用止血钳剥离局部的组织，充分暴露视野，分离出颈总动脉约3－4cm，远心端结扎，近心端用动脉夹挟住，丝线放于动脉下备用。准备就绪，在远心端（第一次失败后，再在切口的前方切开实验）用眼科剪剪一小口，用手术刀柄放置于动脉下方，手持动脉插管将其插入。
6、剪去切开腹股沟处皮肤毛，组员配合皮肤切口，逐层分离，找到搏动的股动脉，动脉插管（方法如颈总动脉），以备放血。
7、在三通管中注入肝素，打开动脉夹，向颈动脉插管中注入肝素，关闭动脉夹，把动脉插管和三通管连接，调整实验所需程序，记录正常血压约13.2kpa（100mmHg）后，在股动脉放血，血压降至6.6kpa（50mmHg），停止放血，并记录数值。
8、针刺“水沟”穴，留针15分钟，观察并记录血压变化。
9、停针后观察血压变化情况15－20分钟，比较针刺后血压变化程度及持续时间。
10、动物处死：耳缘静脉注射空气处死动物。
（六）注意事项
1、麻醉动物时，速度缓慢，严格控制剂量，待麻醉成功后再实验。
2、动脉插管时要仔细认真，以免造成家兔失血性休克。
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实验 针刺对小鼠耐缺氧的影响
（一）选定原则
小鼠实验是走向工作岗位经常做的实验。针刺可以改善缺氧情况。为了了解针刺对缺氧的改善情况而选择本实验
（二）实验目的与要求
熟练动物抓取，验证针刺对小鼠耐缺氧的影响。
（三）每组人数
6-8人
（四）主要仪器设备及配套数
广口瓶、钠石灰、小鼠、秒表、垃圾袋、针灸针、胶布、图钉
（五）实验步骤
1、小鼠禁食12小时：实验前通知动物房小鼠禁食12小时
2、在每个广口瓶装入2g钠石灰，密封备用。
3、小鼠抓取，称重：左手拇、食指提住小鼠后颈部皮肤，鼠体置于左手心中，将鼠尾巴用无名指和小指压在手掌上，用天平称重，两组小鼠的体重接近、性别相同。
4、小鼠随机分组2组，每组6只。
5、把小鼠用胶布和图钉固定在兔台上，一组针刺10分钟，另组除针刺外，其余操作同针刺组。
6、经过处理后，两组小鼠分别装入广口瓶，盖紧盖子，按下秒表，记录两组各自小鼠从塞入至死亡的时间。
7、比较两组的差异。
（六）注意事项
1、除针刺外，两组操作均相同。
2、钠石灰要新鲜干燥。
实验 针刺“内关”穴对家兔实验性心律失常疗效的观察
（一）选定原则
心律失常是临床多种病的并发症。针灸对心律失常疗效确切，为了观察针刺对家兔实验性心律失常的具体效果而选择此实验。
（二）实验目的与要求
熟练动物抓取，观察针刺“内关”穴对家兔心律失常的调节作用。
（三）每组人数
6-8人
（四）主要仪器设备及配套数
生物机能检测系统、家兔、兔台、婴儿称、注射器（10毫升、5毫升、2毫升各1支）、针灸针、干棉球、纱布4块、生理盐水、20%乌拉坦、秒表、0.002％乌头碱生理盐水溶液、垃圾袋、绳子
（五）实验步骤
1、动物抓取、称重：把家兔双儿置于右手手心，右手其余手指抓住耳后皮厚处，左手脱住家兔臀部，把家兔提起，放于婴儿称上称重。
2、动物固定（家兔）：仰卧位把家兔四肢及牙齿都固定在动物实验台上。
3、410－（310）生物机能系统调制备用状态，动物四肢末端局部去毛，把测试夹夹在四肢末端，测定正常心电图，并保存。
4、家兔耳缘静脉注射0.002%乌头碱生理盐水溶液（1ml/kg），注射速度每分钟1ml，测定心电图，并记录出现心律失常的时间。
5、6组中，3组针刺家兔双侧“内关”穴5分钟，平补平泻，观察心电图的变化，记录家兔恢复窦性心律的时间，计算出现心律失常到恢复窦性心律的时间；另3组针刺臀部非经非穴点，余操作均相同。
6、家兔处死。
7、统计结果并进行分析，并写出实验报告。
（六）注意事项
1、不可用麻醉剂麻醉动物。
2、注射乌头碱时速度要均匀。
实验 针刺对小白鼠胃肠蠕动的调整作用
（一）选定原则
针刺对小白鼠胃肠蠕动具有调整作用，通过本实验观察针刺对小白鼠胃肠蠕动功能的影响。
（二）实验目的与要求
观察针刺对小白鼠胃肠蠕动功能的影响。
（三）每组人数
6人/组
（四）主要仪器设备及配套数
小白鼠、淀粉、炭末、烧杯、天平、灌胃针头、注射器、小镊子、眼科剪、33cm直尺、图钉、毫针数支、胶布、蒸馏水、垃圾袋
（五）、实验步骤：
1、小白鼠实验前交待动物房禁食12h。
2、实验前先取淀粉、炭末、水适量，在酒精灯上烧成糊状备用。
3、将小白鼠尾端用胶布编号。
4、用注射器抽取淀粉炭末糊约2ml，给12只小白鼠用淀粉炭末糊灌胃后，将四肢末端用胶布固定，胶布留少许，用图钉穿过胶布，仰卧位将小鼠固定于兔台上。随机分成针刺组、对照组，每组6只。
5、针刺组，针刺小鼠双侧足三里、上巨虚穴，捻转为主，持续10min后拔针，对照组不刺激。
6、灌胃10min和针刺10min后，小鼠颈椎脱臼法处死，剖腹取出胃肠拉直，测量被炭末充满显示黑色之间的距离。
7、算出2组小鼠胃肠道被炭末糊充满之距离的平均值。
（六）、注意事项
1、淀粉炭末糊不要太稠，以利于灌胃。
2、灌胃时动作要轻柔、熟练、准确，以免误入气管导致动物死亡。
实验 针刺对实验性肺水肿家兔呼吸状态的影响
（一）选定原则
针刺对实验性肺水肿家兔呼吸状态有一定的影响，通过此实验验证针刺对实验性肺水肿家兔呼吸状态的影响。
（二）实验目的与要求
观察针刺对实验性肺水肿家兔呼吸状态的影响，了解肺水肿动物模型的制作方法。
（三）每组人数
6人/组
（四）主要仪器设备及配套数
生物机能检测系统、家兔、毫针、注射器（10毫升3只）、20%乌拉坦液、生理盐水、50%葡萄糖溶液、气管插管、动物手术台、手术器械一套、婴儿称、缝线、垃圾袋、绳子、干棉球、纱布4块
（五）、实验步骤：
1、动物抓取、称重：把家兔双儿置于右手手心，右手其余手指抓住耳后皮厚处，左手脱住家兔臀部，把家兔提起，放于婴儿称上称重。
2、动物麻醉：用生理盐水棉球轻擦耳缘静脉处皮肤，用注射器抽取乌拉坦，按照25mg/kg的剂量给动物麻醉。以动物的角膜反射、呼吸深度、腹壁肌肉的紧张度为观察指标，用棉絮查看动物的角膜反射、止血钳挟持四肢肌肉，待动物安静，呼吸平稳，角膜反射迟钝，麻醉成功。
3、动物固定（家兔）：仰卧位把家兔四肢及牙齿都固定在动物实验台上。
4、气管插管：用剪毛剪剪去实验需要部位的兔毛，毛放入装有水的弯盘中。成员互相配合，两人分别用止血钳挟住颈部两侧的皮肤，用手术刀切开皮肤。若有血，用棉球、止血钳等止血。再颈部切开的基础上，逐层分离局部的组织，暴露气管长度约3－4cm，其下放置10cm长的丝线备用，气管倒“T”切口，插入气管插管，然后用丝线固定。
5、剪去上腹部兔毛，在剑突下做一个2－3cm长的切口，沿正中线切开肌肉，暴露剑突，用悬吊在张力感传器（与410－生物机能检测系统已连接）上的缝针钩住剑突处皮肤并垂直绷紧。
6、观察电脑上的数值，记录家兔呼吸曲线，观察呼吸频率、幅度。
7、由气管插管处注射50％葡萄糖1.0ml，记录呼吸曲线（注入5min、10min、15min呼吸波形），并观察呼吸频率、幅度，对比注射前后频率、幅度的变化。
8、针刺“膻中”、“素髎”穴持续运针5分钟后出针，记录针刺家兔呼吸曲线，比较针刺前后频率、幅度的变化。
9、动物处死：耳缘静脉注射空气。
（六）、注意事项
1、麻醉动物时，速度缓慢，严格控制剂量，待麻醉成功后再实验。
2、气管插管时要仔细认真。

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