原料、中间体与终产物样品检验标准操作规程.doc

原料、中间体与终产物样品检验
标准操作规程

原料、中间体与终产物样品检验标准操作规程
标准操作规程

制定部门：开发部
页数：4页
批准人：
执行日期：
目的：建立原料与中间体样品检验SOP，确保样品检验操作的规范化和标准化。
范围：公司购入的原料药、中间体及公司自行合成的化合物。
职责：开发部操作人员严格按照本操作规程进行样品检验，部门领导对本规程的有效执行进行监督检查。

内容：
1 样品领取
由公司项目管理部下达样品检验项目启动单(如属购买的原料、中间体，一并附上其公司的自检报告单)，开发部质检科根据项目启动单计算检验所需样品的质量，出具样品检验申请单，申请并领取化合物。
2 样品检测项目的确定
根据后续实验的性质和要求及公司开发部的实验条件，开发部质检科与合成部相关实验员商定样品检测项目。
3 样品检测
3.1性状
3.1.1 比旋度测定*
3.1.2 熔点测定*
3.2 检查
3.2.1 有关物质
3.2.2 水分测定*
3.2.3 pH值测定*
3.2.4 炽灼残渣*
3.2.5 重金属检查*
3.2.6 其他(砷盐、铁盐、硒等)*

3.3 含量测定
4 样品检测报告(样品检验报告单中标注样品检验的参考标准，中国药典、美国药典、欧洲药典或企业内控标准)

注：标注*项目后附检验细则

旋光度测定标准操作规程

1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（二部）
2 定义：偏振光透过1dm并每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。
3 原理：直线偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，此种旋转在一定条件下，有一定的度数，其旋转的度数称为旋光度。
4 检验操作方法
4.1 仪器及用具
电热恒温干燥箱
电子天平
旋光计、旋光管
4.2 化学试剂：蔗糖
4.3 操作方法
4.3.1 旋光计的检定：可用蔗糖作为基准物质进行，取在105℃干燥2小时的蔗糖，用电子天平精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含0.2g的溶液，依法测定，结果应如表：
温度（℃）
15
20
25
30
比旋度（°）
+66.68
+66.60
+66.53
+66.45
4.3.2 调零点：测定旋光度时，用读数至0.01度，并经检定的旋光计，将测定管用供试品所用的溶剂冲洗数次，缓缓注入适量溶剂，置于旋光计内调整零点或读取3次旋光度，取其平均值作为空白。
4.3.3 测定：按照各该药品项下规定方法，制备供试品，注意调节至20℃±0.5℃将测定管用供试品液冲洗数次，缓缓注入供试液，置于旋光计内测定读数，读取旋光度3次，取平均值，即得供试品的比旋度。
4.3.3.1 使偏振光向右旋转者（顺时针方向转）为右旋，以“+”符号表示；
4.3.3.2 使偏振光向左旋转者（逆时针方向转）为左旋，以“-”符号表示。
4.3.4 计算公式
液体样品： [α]td =α/Ld
固体样品： [α] td =100α/Lc
式中 ： [α]—比旋度 ；
D—钠光谱的D线；
t—测定时的温度；
L—测定管长度，dm ；
α—测得的旋光度 ；
d —液体的相对密度；
c —每100ml溶液中含有被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g。
5 注意事项
5.1 用钠光谱的D线（589.3nm）测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为2dm，温度为20℃。
5.2 每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后再测定一次，以确定在测定时零点有无变动，如第二次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。
5.3 供试品应不显浑浊或含有混悬的小粒，如有上述情况时，应预先过滤，并弃去初滤液。
5.4 测定管放在旋光计内的位置，供试品和空白应一致，测定管上的玻璃片保持光洁、清洁，否则影响测定结果。
5.5 测定管上的橡皮圈注意经常更换，老化后易漏溶液，在测定管里不应有气泡，否则影响测定的准确度。
熔点测定标准操作规程

1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005版（二部）
2 定义：由固体熔化成液体的温度，初熔至全熔所经历的一段温度。
3 原理：一个固体物质熔点，即置物质在大气压下，固态与液态达到平衡时的温度。
4 检验操作方法
4.1 仪器及用具
数字熔点仪
电热恒温干燥箱
毛细管1支
研钵1个
表面皿1个
玻璃管1支
4.2 操作方法
4.2.1 供试品的准备：取供试品适量，用研钵研成细粉，除另有规定外，应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。
4.2.1.1 若该药品不检查干燥失重，熔点范围低限在135℃以上，受热不分解的供试品，可采用105℃干燥。
4.2.1.2 熔点在135℃以下或受热分解的供试品，可在五氧化二磷干燥器中干燥过夜或用其他适宜的干燥方法干燥，如恒温减压干燥。
4.2.2 供试品的制备：取供试品适量，置干净的表面皿上，将熔点管开口端向下插入粉末中，装取少量粉末，取一支长约30-40cm的玻璃管，垂直立于干净的表面皿上，将熔点管自上口放入使自由落下，反复数次，使粉末紧密集结在毛细管的熔封端（高约为3mm）。
4.2.3 测定
4.2.3.1 插上电源，将熔点测定仪开启后，升温控制所需温度，稳定20分钟。
4.2.3.2 将毛细管插入，此时电表基本指零，初熔灯熄灭（调零使完全指零）。
4.2.3.3 按动升温钮，数分钟后，初熔灯先闪亮，记下读数。
4.2.3.4 然后出现终熔，读数显示，即为终熔，测定完毕。关上开关，拔下电源。
5 注意
5.1 供试品加热至规定的熔点低限约10℃。
5.2 升温速度以每分钟1.5℃为宜。
5.3 装入供试品高度以3mm为宜。

水分测定标准操作规程

费休氏水分测定法
1 简述
费休氏水分测定法是利用碘在吡啶和甲醇溶液中氧化二氧化硫时需要定量的水参加反应的原理来测定样品中的水分含量，本法可适用任何可溶解于费休氏试液但不与费休氏试液起化学反应的药品的水分测定，故对遇热易破坏的样品仍能用本法测定。
基本反应为 I2＋SO2＋H2O→2HI＋SO3-
上述反应是可逆的，但有吡啶存在时，无水吡啶能定量地吸收HI和SO3-，生成氢碘酸吡啶和亚硫酸吡啶。
C5H5N·I2＋C5H5N·SO2＋C5H5N＋H2O→2C5H5N·HI＋C5H5N·SO3亚硫酸吡啶亦不稳定，能与水发生副反应，消耗一部分水，因而干扰测定。
C5H5N·SO3＋H2O→C5H5NHSO4H
加入无水甲醇可使亚硫酸吡啶转变成稳定的甲基硫酸氢吡啶，避免了上述副反应的发生。
C5H5N·SO3＋CH3OH→C5H5NHSO4CH3
滴定的总反应为 C5H5N·I2＋C5H5N·SO2＋C5H5N＋CH3OH＋H2O→2C5H5N·HI＋C5H5N HSO4CH3…………（1）
由上式可知，吡啶与甲醇不仅作为溶剂，而且参与滴定反应，此外，吡啶还可以与二氧化硫结合降低其蒸气压，使其在溶液中保持比较稳定的浓度。
1.1 容量滴定法
根据碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能与水起定量反应的原理；由滴定溶液颜色变化（由淡黄色变为红棕色）或用永停滴定法指示终点；利用纯水首先标定出每1ml费休氏试液相当于水的重量（mg）；再根据样品与费休氏试液的反应计算出样品中的水分含量。
1.2 库仑滴定法
与容量滴定法相同，库仑滴定法也是根据碘和二氧化硫在吡啶（有些型号仪器改用无臭味的有机胺代替吡啶）和甲醇溶液中能与水起定量反应的原理来进行测定的。
与容量滴定法不同，在库仑滴定法中，碘是由含碘化物的电解液在电解池阳极电解发生碘。2I-→I2＋2e-…………（2）
只要滴定池中存在水，发生的碘就会按反应（1）进行反应。当所有的水都反应完毕，阳极电解液中会剩余少许过量的碘。此时，双铂电极就能检测出过量的碘，并停止产生碘，根据法拉第定理，产生碘的数量与流过的电流和时间成正比，在反应（1）中，碘和水以1:1反应。1摩尔水（18.0g）对应于2×96487库仑，也就是说，每毫克水会消耗掉10.72库仑的电量，当电源固定时，根据电解至终点的时间即可计算出水分含量，本法尤其适合于药品中微量水分（0.0001～0.1%）的测定，并具有很高的精确度。而且含水量是根据电解电流和电解时间计算，只须加入供试品前，先将电解液通电流电解至碘刚生成少许，停止电解，再加入供试品继续电解即可，不需用标准水标定滴定液。
用库仑滴定法测完水分的操作，见各仪器的操作规程。以下仅介绍容量滴定法的操作规程。
2 仪器与用具
2.1 实验条件与要求由于费休氏试液吸水性强，因此在配制、标定及滴定中所用仪器均应洁净干燥。试液的配制过程中应防止空气中水分的侵入，进入滴定装置的空气亦应经干燥剂除湿。试液的标定、贮存及水分滴定操作均应在避光、干燥环境处进行。
2.2 仪器及器具的处理：分析天平（感量0.1mg）、大台秤、水分测定仪或磨口自动滴定管（最小分度值0.05ml）、永停滴定仪、电磁搅拌器。凡与试剂或费休氏试液直接接触的物品，玻璃仪器须在120℃至少干烤2小时，取出置干燥器内备用。
2.3 用具和装置：1000ml干燥的锥形瓶一个，500ml干燥量筒一个以及用作安全、洗气和放置干燥剂瓶4个（配有双孔橡皮塞），载重1000g的架盘天平及配套砝码。
3 试液
3.1 试剂
3.1.1 碘 将碘平铺于干燥的培养皿中置硫酸干燥器内干燥48小时以上，以除去碘表面吸附的水分。
3.1.2 无水甲醇（AR，含水量<0.1%），原包装。
3.1.3 吡啶（AR，含水量<0.1%），原包装。
3.1.4 二氧化硫一般使用压缩的二氧化硫气体，用时通过硫酸脱水。
3.1.5 浓硫酸（AR）。
3.1.6 无水氧化钙（CP）。
3.2 费休氏试液的配制 用架盘天平，称得1000ml锥形瓶的重量，再分别称取碘110g，吡啶158g置锥形瓶中，充分振摇。加入吡啶后，溶液会发热，应注意给予冷却。用500ml量筒量取无水甲醇300ml，倒入锥形瓶中，塞上带有玻璃弯管的双孔橡皮塞，称其总重量。将锥形瓶置于冰水浴中，缓缓旋开二氧化硫钢瓶的出口阀，气体流速以洗气瓶中的硫酸和锥形瓶中溶液内出连续旗袍为宜。直至总重量增加至72g为止。再用无水甲醇稀释至1000ml，摇匀，避光放置24小时备用。
4 费休氏试液的标定及供试品的测定
4.1 自身作指示剂法
4.1.1 用具包括干燥器一个，30ml锥形瓶和翻口橡皮塞数个或带橡皮塞的供注射用抗生素的小瓶数个。10ml自动滴定装置2套（分别贮放费休氏试液和无水甲醇）。
4.1.1.2 准备将磨口自动滴定管装置的下支管连接一个经硅胶瓶除湿的双联球，顶部的上支管连接一个装有硅胶的干燥管，取一带橡皮塞的玻瓶，将两个注射器针头刺入橡皮塞至小瓶中，一个针头供排气用，另一个针头用乳胶管与滴定管尖端相连，供加入费休氏试液用。把试液加入干燥的贮液瓶中，旋转活塞使贮液瓶与滴定管接通，挤压双联球使试液压至零刻度（注意不要用力过猛，否则试液将从上支管冲出），旋转活塞，接通滴定管尖端，用试液排出乳胶管与注射器针头中的空气，直至排出的液体与试液的颜色一致时为止，关闭活塞。
4.1.2 标定取重蒸馏水约10～30mg，精密称定，置干燥的带橡皮塞玻瓶中，通过有无水甲醇的滴定装置加无水甲醇2ml后，立即用费休氏试液滴定，在不断振摇下，溶液由浅黄色变为红棕色即得。另以2ml无水甲醇作空白对照，按下式计算即得：
F = W
A－B
式中 F=每1ml费休氏试液相当于水的重量（mg）；
W=称取重蒸馏水的重量（mg）；
A=滴定所消耗费休氏试液溶积（ml）；
B=空白所消耗费休氏试液溶积（ml）；
标定应取3份以上，3次连续标定结果应在±1%以内，以平均值作为费休氏试液的强度。
4.1.3 供试品的测定取供试品适量（约消耗费休氏试液1～5ml），精密称定，置干燥具塞玻璃瓶中，通过贮有无水甲醇的滴定装置加入无水甲醇2ml，在不断振摇下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，另以2ml无水甲醇作空白试验，按下式计算机得：
供试品中水分含量%= （A－B）F ×100%
W
式中 A=供试品所消耗费休氏试液的量（ml）；
B=空白所消耗费休氏试液溶积（ml）；
W=供试品的重量（mg）。
4.1.4 滴定完毕后，将费休氏试液移入贮存瓶中密闭保存，滴定装置用甲醇洗涤，以防滴管头及磨口和活塞处析出结晶以致堵塞。
4.2 永停终点法
将上述滴定瓶橡皮塞上再分别刺入两个注射器针头，针头中插入两根作双铂电极用的铂丝。拔去注射器针头，将铂丝电极留在橡皮塞上，铂丝电极接至永停滴定仪。照电位滴定法与永停滴定法操作，滴定至终点即得。

干燥失重检查标准操作规程
1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（一部、二部）
2 定义：药品的干燥失重是指药品在规定的条件下，经干燥后所失去的重量，主要是指水分、结晶水，亦包括其它挥发性的物质减失的重量。
3 原理：在常压和规定温度下，用电热恒温干燥箱将供试品干燥至恒重。
4 检验操作方法
4.1 应用范围：本法适用于受热较稳定的供试品。
4.2 仪器及用具
电热恒温干燥箱
电子天平1
扁形称量瓶2个
干燥器1个
4.3 操作方法
4.3.1 用电子天平精密称取供试品1～2g（如颗粒较大，迅速研成2mm以下的颗粒），置与供试品同样条件下干燥恒重的称量瓶中，使供试品平铺瓶底，厚度不超过5mm，如为疏松物质，不超过10mm，精密称定，将称量瓶放入洁净的干燥器中，瓶盖半开或置瓶旁，放入规定温度（±2℃）干燥箱中干燥至恒重。
4.3.2 取出后迅速盖好瓶盖，放入装有干燥剂的干燥器内放20～
30分钟，迅速精密称重（放置时间与称重顺序与空称量瓶一致）。
4.4 计算

干燥失重%= m1-m2 ×100%
m1-m0
式中：m0—空称量瓶质量，g ；
m1—干燥前称量瓶和供试品质量，g ；
m2—干燥后称量瓶和供试品质量，g 。
5 注意事项
5.1 干燥器内的变色硅胶使用过程中，如蓝色变为粉红色，应将硅胶置105～110℃烘箱内烘烤2小时以上，至蓝色后，取出稍冷，置干燥器内。
5.2 每个干燥器内放入称量瓶不得超过6个。
5.3 供试品如未达到规定干燥温度即熔化时，应先将供试品置于较低温度中干燥，除去大部分水后，再按规定条件干燥。
6 附注
恒重：除另规定外，系指供试品连续两次干燥的重量差异在0.3mg以下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行。

PH测定标准操作规程

1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（二部）
2 定义：用酸度计测定药品水溶液的pH值来控制药物的酸碱度
3 检验操作方法
3.1 仪器
精密pH计
电子天平
100ml烧杯7个
1000ml容量瓶 5个
3.2 化学试剂
3.2.1 分析纯：草酸三氢钾、邻苯二甲酸氢钾、磷酸盐、硼砂
3.2.2 草酸三氢钾标准缓冲液：用电子天平精密称取在54±3℃干燥4～5小时的草酸三氢钾〔KH3（C2H4）2.2H2O〕12.71g放入100ml烧杯中，加少量水溶解，然后转移至1000ml容量瓶中并稀释至刻度，即得。
3.2.3 邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液：用电子天平精密称取在115℃±5℃干燥2～3小时的邻苯二甲酸氢钾〔KH（C8H4O4）〕10.21g放入100ml烧杯中，加少量水溶解，然后转移至1000ml容量瓶中并稀释至刻度，即得。
3.2.4 pH6.8磷酸盐标准缓冲液：用电子天平精密称取在115℃±5℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠3.55g放入烧杯中，加少量水溶解，然后转移至容量瓶中并稀释至1000ml，即得。
3.2.5 pH7.4磷酸盐标准缓冲液：用电子天平精密称取在115℃±5℃干燥3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g放入100ml烧杯中，加少量水溶解，然后转移至1000ml容量瓶中并稀释至刻度，即得。
3.2.6 硼砂标准缓冲液：用电子天平精密称取硼砂3.8g（注意避免风化）放入100ml烧杯中，先加少量水溶解，然后转移至1000ml容量瓶并稀释至刻度，置塑料瓶中，密塞。
3.3 不同温度时标准缓冲液的pH值如下表
温 度（℃）
草酸三氢钾标准缓冲液
邻苯二甲酸
钾标准缓冲液
磷酸盐标准缓冲液（pH6.8）
磷酸盐标准缓冲液（pH7.4）
硼砂标准缓冲液
0
1.67
4.01
6.98
7.52
9.64
5
1.67
4.00
6.95
7.49
9.40
10
1.67
4.00
6.92
7.47
9.33
15
1.67
4.00
6.90
7.44
9.28
20
1.68
4.00
6.88
7.43
9.23
25
1.68
4.01
6.86
7.41
9.18
30
1.68
4.02
6.85
7.40
9.14
温 度（℃）
草酸三氢钾标准缓冲液
邻苯二甲酸
钾标准缓冲液
磷酸盐标准缓冲液（pH6.8）
磷酸盐标准缓冲液（pH7.4）
硼砂标准缓冲液
35
1.69
4.02
6.84
7.39
9.10
40
1.69
4.03
6.84
7.38
9.07
45
1.70
4.04
6.83
7.38
9.04
50
1.71
4.06
6.83
7.38
9.02
3.4 测定法：被测溶液与标定用缓冲溶液温度应相同，用纯化水清洗电极，再用滤纸吸干，然后将电极插入被测溶液中，摇动烧杯，使溶液均匀后读出溶液的pH值。
4 注意事项
4.1 配制缓冲液和溶解供试品的用水，均应用新沸过的冷纯化水，其pH值应为5.5～7.0。
4.2 三次pH值读数相差应不超过0.1，取三次读数的平均值为其pH值。
4.3 玻璃电极应预先在纯化水中浸放一昼夜。
4.4 使用前应预热。
4.5 仪器在测定之前，先要标定，连续使用时，每天标定一次。

炽灼残渣检查标准操作规程

1 简述
本法（中国药典2005年版二部附录Ⅷ N）中的“炽灼残渣”系指将药品（多为有机化合物）经加热灼烧至完全灰化，再加硫酸0.5～1.0ml并炽灼（700～800℃）至恒重后遗留的金属氧化物或其硫酸盐。
2 仪器与用具
2.1 高温炉。
2.2 坩埚 瓷坩埚、铂坩埚、石英坩埚。
2.3坩埚钳 普通坩埚钳、尖端包有铂层的铂坩埚钳。
2.4 通风柜。
2.5 分析天平 感量0.1mg。
3 试药与试液
硫酸 分析纯。
4 操作方法
4.1空坩埚恒重 取洁净坩埚置高温炉内，将坩埚盖斜盖于坩埚上，经加热至700～800℃炽灼约30～60分钟，停止加热，待高温炉温度冷却至约300℃，取出坩埚，置适宜的干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温（一般约需60分钟），精密称定坩埚重量（准确至0.1mg）。再以同样条件重复操作，直至恒重，备用。
4.2 称取供试品 取供试品1.0～2.0g或各品种项下规定的重量，置已炽灼至恒重的坩埚内，精密称定。
4.3 炭化 将盛有供试品的坩埚置电炉上缓缓灼烧（应避免供试品受热骤然膨胀或燃烧而逸出），炽灼至供试品全部炭化呈黑色，并不在冒烟，放冷至室温（以上操作应在通风柜内进行）。
4.4 灰化 除另有规定外，滴加硫酸0.5～1ml，使炭化物全部湿润，继续在电炉上加热至硫酸蒸汽除尽，白烟完全消失（以上操作应在通风柜内进行）。将坩埚置高温炉内，坩埚盖斜盖于坩埚上，在700～800℃炽灼约60分钟，使供试品完全灰化。
4.5 恒重 按操作方法4.1自“停止加热，待高温炉…”起，依法操作，直至恒重。
5 注意事项
5.1 炭化与灰化的前一段操作应在通风柜内进行。供试品放入高温炉前，务必完全炭化并除尽硫酸蒸气。必要时，高温炉应加装排气管道。
5.2 供试品的取用量，除另有规定外，一般为1.0～2.0g（炽灼残渣限度为0.1%～0.2%）。如有限度较高的品种，可调整供试品的取用量，使炽灼残渣的量为1～2mg。
5.3 坩埚应编码标记，盖子与坩埚应编码一致。从高温炉中取出时的温度、先后次序、在干燥器内的放冷时间以及称量顺序，均应前后一致；同一干燥器内同时放置的坩埚最好不超过4个，否则不易达到恒重。
5.4 坩埚放冷后干燥器内易形成负压，应小心开启干燥器，以免吹散坩埚内的轻质残渣。
5.5 炽灼残渣如需留作重金属检查，则供试品的取用量应为1.0g，炽灼温度必须控制在500～600℃。
5.6如供试品中含有碱金属或氟元素时，可腐蚀瓷坩埚，应使用铂坩埚。在高温条件下夹取热铂坩埚时，宜用钳头包有铂箔的坩埚钳。
5.7 开关炉门时，应注意勿损坏高质耐火绝缘层。
6 记录与计算
6.1 记录 记录供试品的取用量、炽灼的温度、时间，坩埚及残渣的恒重数据、计算与结果。
6.2 计算
炽灼残渣% = 残渣及坩埚重量－空坩埚重量 ×100%
供试品重量
7 结果与判定
计算结果按“有效数字和数值的修约及其运算”修约，使其与标准中规定限度的有效数位一致。其数值小于或等于限度值时，判为符合规定（当限度规定为≤0.1%，而实验结果符合规定时，报告数据应为“小于0.1%”或“为0.1%”）；其数值大于限度值时，为不符合规定。
炽灼至恒重，除另有规定外，系指在规定温度下连续两次炽灼后的重量差异在0.3mg以下，第二次炽灼时间不少于30分钟。
重金属检查标准操作规程

1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（二部）
2 定义：重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。
3 原理：硫化钠或者硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解产生的硫化氢，与供试品中重金属在实验条件下所显的颜色，同与一定量的标准铅溶液在同样操作条件下所显的颜色比较。检查供试品中重金属限量。
反应式：Pb2++S2-→PbS↓
4 检验操作方法(第一法)
4.1 适用范围：本法适用于在酸性溶液中金属杂质的限量检查
4.2 仪器及用具
架盘药物天平（最大称量100g，分度值为0.1g）
精密pH计
蒸发皿
50ml纳氏比色管2支
5ml量筒2个
1000ml容量瓶1个
100ml容量瓶3个
100ml烧杯3个
10ml移液管1个
玻璃棒4支
4.3 化学试剂
4.3.1 分析纯：醋酸盐、硫代乙酰胺、硝酸铅
4.3.2 醋酸盐缓冲液（pH3.5）：用架盘天平称取醋酸铵25g，置100ml烧杯中，先加水25ml溶解后，加盐酸液（7mol/l）38ml，用盐酸液（2mol/l）或氨溶液（5mol/l）准确调节pH值至3.5（电位法指示），然后转移到100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，即得。
4.3.3 硫代乙酰胺试液：用架盘天平称取硫代乙酰胺4g，置100ml烧杯中，先加少量水使溶解，然后转移到100ml容量瓶中，再稀释至刻度，即得。置冰箱中保存，临用前取混合液[由氢氧化钠液（1mol/l）15ml，加水5.0ml及甘油20ml组成]5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，在水浴上加热20秒钟，冷却后立即使用。
4.3.4 标准铅溶液：用电子天平精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸铅0.160g，置100ml烧杯中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，转移到1000ml容量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀即得。
临用前，用10ml移液管精密量取贮备液10ml，置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。（每1ml相当于10μg Pb。）
4.3.5 稀焦糖溶液：取蔗糖或葡萄糖适量，置瓷蒸发皿中，加热使炒成褐色糊状，用水溶解后，贮于试剂瓶中备用。
4.4 操作方法
4.4.1 供试品的配制：除另有规定外，用电子天平精密称取规定量供试品置50ml纳氏比色管中，用5ml量筒加水或各该药品项下规定的溶剂适量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，然后用水或各该药品项下规定的溶剂稀释至 25ml，摇匀，将用5ml量筒量取的硫代乙酰胺试液2ml倒入纳氏比色管中，摇匀即得供试品。
4.4.2 对照品的配制： 用移液管精密量取各药品项下规定的标准铅溶液，置50ml纳氏比色管中，用5ml量筒加水或各该药品项下规定的溶剂适量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，然后用水或各该药品项下规定的溶剂稀释至25ml, 将用5ml量筒量取硫代乙酰胺试液2ml倒入纳氏比色管，摇匀即得对照品。
4.4.3 比色：放置2分钟，置白色背景上，从上至下垂直观察，所显颜色不得深于相同操作条件下规定量的标准铅溶液所产生的颜色。
4.4.4 供试液如带颜色，可在对照品管中滴加少量稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，调节两管颜色一致，再按上述方法检查。
如上述方法调节颜色仍不一致时，可取两倍规定量的供试品，用量筒加水或该药品项下规定的溶剂使成30ml，溶解后将溶液分成甲乙两等份，乙管中加水或各该药品项下规定溶剂使成25ml，甲管中加入硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，经滤膜（孔径3μm）滤过，然后甲管中加入标准铅溶液一定量，加水或各该药品项下规定的溶剂使成25ml，再分别用5ml量筒量取硫代乙酰胺试液2ml加入乙管中，2ml水加入甲管中，照上述的方法比较即得。
供试品中如含有高铁盐，在弱酸性溶液中氧化硫化氢，析出硫，干扰检查。这时可在供试管和标准管中同时加入抗坏血酸0.5～1.0g，再按上述方法检查。

5 检验操作方法(第二法)
5.1 应用范围：本法适用于含芳环或杂环的有机药物，经有机破坏后重金属杂质限量检查。
5.2 仪器及用具
电子天平
精密pH计
电热恒温水浴锅
电阻炉
瓷坩埚（含氟的供试品用铂坩埚）
50ml纳氏比色管 2个
20ml量筒1个
5ml量筒1个
5.3 化学试剂除第一法的试剂外，还需要：硫酸、盐酸、硝酸
5.3.1 氨试液：用500ml量筒量取浓氨溶液400ml，置1000ml烧杯中，加水使成1000ml。
5.3.2 酚酞指示液：用架盘天平称取酚酞1g，置100ml烧杯中，先加少量乙醇溶解，然后转移到100ml容量瓶中，再稀释至刻度，即得。
5.4 操作方法
5.4.1 供试品的配制：除另有规定外，用电子天平1精密称取1～2g或规定量供试品置瓷坩埚中，于排气橱里在电炉上缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰湿润，加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干至氧化氮除尽，放冷。将坩埚放入高温炉中在500～600℃炽灼至完全炭化（需3h），取出放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干，加水15ml，滴加氨试液使对酚酞指示液显中性(即加1滴酚酞然后滴加3滴氨试液)，再用5ml量筒加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶解后，移入50ml纳氏比色管中，加水稀释定容至25ml，摇匀。将用5ml量筒量取的硫代乙酰胺试液2ml倒入纳氏比色管中，摇匀即得供试品。（共计27ml）
5.4.2 对照品的配制：配制供试品溶液时，如使用过硫酸、硝酸、盐酸或氨试液，应取同样同量的试剂，置瓷皿中蒸干后，加水15ml，醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量（1ml相当于10ppm），再加水稀释定容至25ml，摇匀。将用5ml量筒量取的硫代乙酰胺试液2ml倒入纳氏比色管中，摇匀即得供试品。
5.4.3 比浊：颜色不得深于相同条件下规定量的标准铅溶液所显的颜色。
5.5 结果判定
5.5.1 供试品溶液的颜色浅于相同条件下规定量的标准铅溶液所显的颜色，判为符合规定；
5.5.2 供试品溶液的颜色深于相同条件下规定量的标准铅溶液所显的颜色，判为不符合规定。

砷盐检查标准操作规程

1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（二部）
2 古蔡氏法原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与供试品中微量亚砷酸盐作用，生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色砷斑与标准砷斑比较，判定供试品中含砷的量。
反应式：AsO33-+3Zn+9H+→AsH3 ↑+3H2O+3Zn2+
AsH3+3HgBr2→3HBr+As（HgBr）3 黄色
2As（HgBr）3 +AsH3→3AsH（HgBr）2 棕色
3 检验操作方法
3.1 仪器及用具
架盘药物天平（最大称量为100g，分度值0.1g）
电子天平
电热恒温干燥箱
1000ml容量瓶2个
100ml烧杯6个
100ml容量瓶3个
50ml容量瓶1个
棕色瓶3个
检砷器2个
镊子1把
3.2 化学试剂
3.2.1 分析纯：盐酸、碘化钾、醋酸铅、溴化汞、氯化亚锡、三氧化二砷
3.2.2 碘化钾试液：用架盘天平称取碘化钾16.5g置100ml烧杯中，先加少量水使溶解，然后转移到100ml容量瓶中，再加水至刻度。置棕色瓶中密闭保存。本液配制后使用不得超过10天。
3.2.3 醋酸铅试液：用架盘天平称取醋酸铅10g置100ml烧杯中，加新沸过的冷水80ml溶解后，转移到100ml容量瓶中，滴加醋酸使澄清，再加水稀释至刻度，即得。
3.2.4 醋酸铅棉花：用架盘天平称取脱脂棉1.0g置100ml烧杯中，将醋酸铅试液与水等容混合液12ml倒入烧杯中，待脱脂棉湿透后，挤压除去过多的溶液，并使之疏松,于80～90℃干燥后，贮于具塞磨口瓶中备用。
3.2.5 溴化汞试纸：取质地疏松的定量滤纸条（60mm×15mm）浸入装有乙醇制溴化汞试液（取溴化汞2.5g置于100ml烧杯中，用50ml量筒量取无水乙醇50ml倒入同一烧杯中，必要时在水浴上微热，使溶解完全，贮于棕色磨口瓶中）的烧杯中，在暗处放置1小时，取出在暗处晾干，贮于棕色磨口瓶中。取出部分溴化汞试纸，剪成15×15mm/mm小块，置另一小棕色瓶，以免光、湿气、氨气影响，使溴化汞试纸失效。
3.2.6 酸性氯化亚锡试液：用架盘天平称取氯化亚锡20g放在100ml烧杯中，先加少量盐酸使溶解，然后转移到50ml容量瓶中，并稀释至刻度。滤过，即得。本液配制后，使用不得超过3个月。
3.2.7 标准砷溶液：用电子天平精密称取在105℃干燥至恒重的三氧化二砷0.132g放在100ml烧杯中，加20%氢氧化钠溶液（1→5）5ml溶解后，再加酚酞指示液一滴，用稀硫酸中和至无色，再加稀硫酸10ml，然后转移到1000ml量瓶中，用水稀释至刻度。摇匀，作为贮备液。
用移液管精密吸取贮备液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，加水稀释至刻度，摇匀即得（每1ml相当于1μg的As）。
3.2.8 锌粒：直径1～2mm的无砷锌粒（通过1号筛的锌粒）。
3.2.9 酚酞指示液：用架盘天平称取酚酞1g，放入100ml烧杯中，先加少量乙醇溶解，然后转移到100ml容量瓶中，再稀释至刻度，摇匀即得。变色范围pH 8.3-10.0（无色→红色）。
3.3 装置的准备：取醋酸铅棉花适量（60～100mg），撕成疏松状，每次少量。用细玻璃棒轻轻均匀的装入导气管中，装置的高度应为80mm。用镊子取出一小片溴化汞试纸（不可用手接触生成砷斑部分），置旋塞顶端平面上，盖住孔径，旋紧旋塞。
3.4 操作方法
3.4.1 供试品：取按规定方法制成的供试液置100ml标准磨口锥形瓶中，加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，放置10分钟，加锌粒2g，立即将装好的导气管塞于100ml标准磨口锥形瓶上，并将检砷器置25～40℃水浴反应45分钟（反应时氢气发生速度宜均匀，过强或过弱影响砷斑的清晰程度）。取出溴化汞试纸，即得供试品。
3.4.2 对照品：精密量取标准砷溶液2ml，置100ml标准磨口锥形瓶中，加盐酸5ml、水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，放置10分钟，加锌粒2g，立即将装好的导气管塞于100ml标准磨口锥形瓶上，使生成的砷化氢气体导入管中，并将检砷器置25～40℃水浴反应45分钟，添加氯仿至刻度，混匀，即得对照品。
3.4.3 比色：供试品生成的砷斑与对照品生成的砷斑比较不得更深。
3.5 计算
3.5.1 标准砷溶液浓度的计算：1mol的三氧化二砷质量为197.82g，称取三氧化二砷0.132g，溶于1000ml量瓶中，配成1000ml贮备液。每1ml含As量为：
2×74.92×0.132×1000 =0.1（mg）
197.82×1000
贮备液定量稀释至100倍后所得标准砷溶液，每1ml含As量为1μg。
3.5.2 砷限量计算：如取标准砷液2ml，标准砷浓度0.000001g/ml，供试品取样1g。
砷限量% = 2×0.1×10-5 ×100% =0.0002%（百万分之二）
1
3.5.3 供试品取样量计算
供试品的量（g）= 2×0.1×10-5 ×100% =2（g）
0.1×10-3
4 结果判定
4.1 供试品溶液生成的砷斑比标准砷斑的颜色浅，判为符合规定；
4.2 供试品溶液生成的砷斑比标准砷斑的颜色深，判为不符合规定。
5 注意事项
5.1 选用四条定量滤纸。
5.2 已取出的试纸不应放回原瓶。
5.3 用细玻璃棒将醋酸铅棉花轻轻均匀的装入导气管中，过紧影响砷化氢通过；过松除不尽硫化氢，生成硫化汞色斑影响检验结果。
5.4 加锌粒时，如锌粒较大应酌情加量。

铁盐检查标准操作规程

1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（二部）
2 原理：三价铁在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液在同样操作条件下生成的硫氰酸铁溶液所显的颜色比较，检查供试品中铁盐的限量。
反应式：Fe3++6SCN- H+ Fe（SCN）63-
3 检验操作方法
3.1 仪器及用具
电子天平
架盘药物天平（最大称量100g，分度值为0.1g）
50ml纳氏比色管3支
250ml量筒1个
50ml量筒1个
5ml量筒4个
1000ml烧杯1个
100ml烧杯2个
100ml容量瓶2个
分液漏斗2个
滴管4个
试剂瓶2个
吸管2个
玻璃棒1个
3.2 化学试剂
3.2.1 分析纯：盐酸、硫氰酸铵、硫酸铁铵
3.2.2 稀盐酸：用250ml量筒量取盐